A protein chip based on surface plasmon resonance (SPR) imaging was developed for measuring classical swine fever virus (CSFV) antibody using a recombinant gp55 protein as an antigen. The diagnostic potential of SPR imaging for detecting antibodies to the CSFV gp55 protein was compared with that of a enzyme -linked immunosorbent assay (ELISA) using 70 pig sera. There was a strong positive correlation between the SPR imaging and ELISA (n=70, r=0.916, p<0.01). Therefore, the SPR imaging, which is a label-free and high-through put method, is expected to be a valuable tool in the serodiagnosis of CSFV.
For a immunohistochemical diagnosis of the frozen and paraffin-embedded tissues against rabies virus, mice were intracerebrally inoculated with challege virus standard(CVS) rabies virus and then were used to detect the rabies viral antigen by the immunoperoxidase(IP) and the avidin-biotin complex(ABC) method. In this study, the results confirmed that ABC and IP methods, although the former showed more specific and sensitive than the latter, were reliable and effective for the demonstration of rabies virus in both frozen and paraffin-embedded brain tissues prepared from rabies-infected mice. Additionally, IP technique using the monoclonal antibody against rabies virus could be recommended as a standard diagnostic tool instead of the present immunofluorescent method for the local veterinary services in Korea.
Helicobacter pylori is one of the most commonly encountered human pathogens. It has been shown to be closely associated with peptic ulcer disease (PUD), gastric adenocarcinoma, and the gastric mucosa-associated lymphoid tissue (MALT) that may lead to gastric lymphoma. The current diagnostic methods include histology, microbiological culture, classic serology unease activity detection, polymerase chain reaction (PCR) and stool antigen detection. Its treatment modality options are multiple; however, a triple regimen consisting of a proton pump inhibitor (PPI), and two antibiotics for 10 to 14 days is preferred. Drug resistance is a growing problem in this organism and new therapeutic options are currently limited .
A 12-year-old dog was referred due to multiple superficial lymphadenopathy. On cytology, each lymph node showed different cell populations where some of them consisted of intermediate to large lymphocytes with frequent Mott cells. Presence of Mott cells along with immature lymphocytes made the cytological diagnosis challenging, and therefore, supplementary diagnostic tests including PCR for Antigen Receptor Rearrangement (PARR) assay and flow cytometry were performed. This case report illustrates the value of flow cytometry in the diagnosis of lymphadenopathy with ambiguous cytologic findings.
Two 1-year-old Korean native steers in the same herd presented severe hemorrhagic diarrhea. Case 1 had severe dehydration and died after 3 days, whereas case 2 had anorexia, depression, and severe diarrhea with mucus and blood. Only case 2 was necropsied, and bovine viral diarrhea virus-2a (BVDV2a) was detected in the tissues of its alimentary tract. Gross lesions, including erosion, ulceration, and extensive hemorrhage, were observed in the digestive tract mucosa. Immunohistochemistry revealed marked positive staining for BVDV2a antigen in the large intestine. These findings are indicative of hemorrhagic disease caused by BVDV2a in a native Korean steer.
Hypersensitivity pneumonitis (HP) is an inflammatory and fibrosing interstitial lung disease caused by inhaled antigens in susceptible individuals. Various environmental materials can serve as inciting agents of HP. Recent guidelines have defined typical radiologic and histopathologic findings of HP, classifying it into nonfibrotic and fibrotic HP categories, as this classification better correlates with clinical outcomes. Diagnosing HP poses challenges, necessitating multidisciplinary discussions based on clinical assessments and radiologic or histopathological features. The cornerstone of treatment lies in avoiding the causative antigen. Oral glucocorticoids serve as the initial treatment for symptomatic HP. Immunosuppressants may be employed in patients who do not respond to initial treatment, and antifibrotics could be considered for patients displaying progressive fibrosis. This review outlines the clinical features, diagnostic evaluation, and treatment of HP.
The use of screening tests as part of a diagnostic work-up is common in domestic canine practice, but understanding of the diagnostic test characteristics and factors affecting diagnostic accuracy is not clear among clinicians. This article was aimed to provide clinicians with a better understanding on the selection of test kits and with a proper interpretation of test results using an example from heartworm(Dirofilaria immitis) studies. From the literatures, diagnostic accuracy varied depending on the kits: percent average sensitivity and specificity of ELISA antigen-detecting kits were DiroChek(Synbiotics, USA) 78.1 and 95.2, SNAP(IDEXX, USA) 66.3 and 98.1, and Solo Step(Heska, Switzerland) 69.5 and 97.5, respectively, while the values for three hematological methods(Modified Knott's, direct smear and capillary tube) ranged from 38.4 to 81.8% and from 96.9 to 100%, respectively. Furthermore, it was also reported that the prevalence of heartworm disease in domestic dog populations varied depending on the regions studied: 2.5-22.8% for microfilarial test and 2.2-66.3% by ELISA. The values of predictive values for positive(PPV) and negative(NPV) provide useful information to clinicians on the probability of heartworm infection, but the PPV and NPV are greatly dependent on the heartworm prevalence. This suggests that PPV or NPV values of a test should be interpreted carefully in different clinical settings. Practical methods on the interpretation taking into account heartworm prevalence were discussed.
Swine influenza virus (SIV) causes one of the most common diseases of the pig population, and its subtypes are determined by hemagglutinin (HA) and neuraminidase (NA). Recently, the SIV subtype diagnosis has been developed. The method using antigen-antibody reaction rather than PCR was mainly used because of the large change in the ribonucleotide sequences of SIV. Here, we have developed 10 diagnostic primer sets through multi-nucleotide sequences alignment of spreaded SIV since 2008 in Korea and then optimized the reaction of the one-step RT-PCR for rapid determination of SIV subtype. In addition, specific primers were designed to early determine the pandemic SIV by detecting unique M sequences proven in highly infectious and virulent subtypes of the influenza H1N1 (pH1N1). Here, some of the SIVs spread in Korea from 2008 to 2014 have been tested to determine the subtypes and pandemic potential of SIV. All diagnostic primer sets were found to be able to accurately determine the SIV subtype and to detect the pandemic SIV. In conclusion, it was confirmed that the optimized one-step RT-PCR analysis using these primer sets is useful for rapid diagnosis of SIV subtypes. These results can be used for development of SIV subtype diagnostic kit to early detect before virulent SIV spreads do.
Khanaliha, Khadijeh;Motazedian, Mohammad Hossein;Kazemi, Bahram;Shahriari, Bahador;Bandehpour, Mojgan;Sharifniya, Zarin
Parasites, Hosts and Diseases
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v.52
no.2
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pp.137-142
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2014
Serologic tests are widely accepted for diagnosing Toxoplasma gondii but purification and standardization of antigen needs to be improved. Recently, surface tachyzoite and bradyzoite antigens have become more attractive for this purpose. In this study, diagnostic usefulness of 3 recombinant antigens (SAG1, SAG2, and SAG3) were evaluated, and their efficacy was compared with the available commercial ELISA. The recombinant plasmids were transformed to JM109 strain of Escherichia coli, and the recombinants were expressed and purified. Recombinant SAG1, SAG2, and SAG3 antigens were evaluated using different groups of sera in an ELISA system, and the results were compared to those of a commercial IgG and IgM ELISA kit. The sensitivity and specificity of recombinant surface antigens for detection of anti-Toxoplasma IgG in comparison with commercially available ELISA were as follows: SAG1 (93.6% and 92.9%), SAG2 (100.0% and 89.4%), and SAG3 (95.4% and 91.2%), respectively. A high degree of agreement (96.9%) was observed between recombinant SAG2 and commercial ELISA in terms of detecting IgG anti-Toxoplasma antibodies. P22 had the best performance in detecting anti-Toxoplasma IgM in comparison with the other 2 recombinant antigens. Recombinant SAG1, SAG2, and SAG3 could all be used for diagnosis of IgG-specific antibodies against T. gondii.
Toxoplasma gondii infections occur throughout the world, and efforts are needed to develop various vaccine candidates expressing recombinant protein antigens. In this study, influenza matrix protein (M1) virus-like particles (VLPs) consisting of T. gondii rhoptry antigen 4 (ROP4 protein) were generated using baculovirus (rBV) expression system. Recombinant ROP4 protein with influenza M1 were cloned and expressed in rBV. SF9 insect cells were coinfected with recombinant rBVs expressing T. gondii ROP4 and influenza M1. As the results, influenza M1 VLPs showed spherical shapes, and T. gondii ROP4 protein exhibited as spikes on VLP surface under transmission electron microscopy (TEM). The M1 VLPs resemble virions in morphology and size. We found that M1 VLPs reacted with antibody from T. gondii-infected mice by western blot and ELISA. This study demonstrated that T. gondii ROP4 protein can be expressed on the surface of influenza M1 VLPs and the M1 VLPs containing T. gondii ROP4 reacted with T. gondii-infected sera, indicating the possibility that M1 VLPs could be used as a coating antigen for diagnostic and/or vaccine candidate against T. gondii infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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