A bacterial strain PN33 producing large amounts of extracellular pectin lyase (PNL, EC 4.2.2.10) was isolated from soil. The isolated bacterium was identified as a strain of Bacillus sp. Production of PNL by the strain was induced only by pectins, with a higher degree of esterification, which had been added to the culture medium as a sole carbon source. The optimal medium for PNL production was determined to consist of 10 g pectin, 2 g yeast extract, 4 g $K_2HPO_4{\cdot}3H_2O$, 0.6 g $MgSO_4$, and 0.11 g $CaCl_2$ per liter (pH 7.0). The PNL activity in the culture supernatant reached the highest level of 132 mU/ml after 32 h cultivation at $37^{\circ}C$ in the optimal medium. The PNL produced was purified to homogeneity by ammonium sulfate fractionation (50~80%), and cation exchange and size exclusion chromatographies. The molecular mass of the enzyme was estimated to be approximately 52 kDa by SDS-PAGE. Almost the same mass was determined by nondenaturing PAGE, indicating that the functional enzyme had a monomeric structure. As expected, the PNL exhibited higher activities on the highly esterified pectins whereas it gave no detectable activity on polygalacturonic acid. The enzyme showed the highest activity at the acidic pH of 6.0, exceptional for a bacterial PNL. Maximum activity was measured at $40^{\circ}C$, although the stability f the purified enzyme was poor at this temperature. alcium (1 mM) was found to activate the PNL activity by $50\%$, and also remarkably increased the thermal stability f the enzyme. Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) and iethylpyrocarbonate (DEPC) inhibited the PNL activity lmost completely at the concentration of 5 mM. This result ndicates that some serine and histidine residues of the nzyme may play an essential role for catalytic function of he enzyme.
Ho Bang Kim;Chang Jae Oh;Nam-Hoon Kim;Cheol Woo Choi;Minju Kim;Sukman Park;Seong Beom Jin;Su-Hyun Yun;Kwan Jeong Song
Journal of Plant Biotechnology
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v.49
no.4
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pp.271-291
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2022
Pectin methylesterase (PME) plays an important role in vegetative and reproductive development and biotic/abiotic stress responses by regulating the degree of methyl-esterification of pectic polysaccharides in the plant cell wall. PMEs are encoded by a large multigene family in higher land plant genomes. In general, the expression of plant PME genes shows tissue- or cell-specific patterns and is induced by endogenous and exogenous stimuli. In this study, we identified PME multigene family members (CsPMEs) from the sweet orange genome and report detailed molecular characterization and expression profiling in different citrus tissues and two fruit developmental stages. We also discussed the possible functional roles of some CsPME genes by comparing them with the known functions of PMEs from other plant species. We identified 48 CsPME genes from the citrus genome. A phylogenetic tree analysis revealed that the identified CsPMEs were divided into two groups/types. Some CsPMEs showed very close phylogenetic relationships with the PMEs whose functions were formerly addressed in Arabidopsis, tomato, and maize. Expression profiling showed that some CsPME genes are highly or specifically expressed in the leaf, root, flower, or fruit. Based on the phylogenetic relationships and gene expression profiling results, we suggest that some CsPMEs could play functional roles in pollen development, pollen tube growth, cross incompatibility, root development, embryo/seed development, stomata movement, and biotic/abiotic stress responses. Our results shed light on the biological roles of individual CsPME isoforms and contribute to the search for genetic variations in citrus genetic resources.
The influence of temperature and calcium concentration on the gelation kinetics of purified Aigeok system has been investigated by small deformation oscillatory measurement. DE(degree of esterification) of the present sample was indicated of low methoxyl Aigeok polysaccharide by FT-IR. The calcium induced gelation of Aigeok has been studied. Both moduli reached the saturation value during the period of experiments. Rate constant increased with increasing calcium concentration, however above 4.08 mM calcium chloride caused a sudden drop in gel strength. The experimental result that the decrease in gel strength at high calcium concentration was seems to be phase separation or competitive inhibition between calcium ions. The storage and loss shear moduli decreased with increasing temperature. The rate constant of Aigeok system remarkably dropped above $35^{\circ}C$. Thus hydrogen bonding is prior to hydrophobic interaction for Aigeok molecule.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.4
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pp.569-573
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2001
A pectic substance from citron peel was extracted with different methods to establish the optimum extraction conditions. The extraction yields of pectin with HCl, citrate and tartrate (concentration : 0.1 N, extraction ratio : 1 : 20) were 17.9%, 15.6% and 11.4%, respectively. Six times of 65% ethanol washing step was followed after first ethanol precipitation of acid extract for pure pectin. The degree of esterification (DE) of pectins was in the range of 43.0~47.6% and intrinsic viscosity was in the range of 0.94~2.63 (η$_{sp}$ /C (dL/g)). The sugar compositions such as rhamnose, xylose, glucuronic acid, galacturonic acid, galactose and glucose were little different in three kinds of pectins except for the content of arabinose.
Epoxy-methacrylate prepolymer was synthesized from methacrylic acid and a diglycidyl ether type low molecular weight epoxy resin, and the electron beam curing of the prepolymer was studied using styrene and polyethyleneglycol dimethacrylates as comonomers. The esterification was carried out quantitatively without any side reaction adding more than 250∼300ppm hydroquinone and less than $1{\%}$ (wt) triethanolamine by wt. of methacrylate acid, respectively. In the radiation curing under air atmosphere, the maximum gel fraction was observed at 10∼$30{\%}$ monomer contents. The rate of gel formation was decreased by the presence of unreacted epoxy group and acid in the prepolymer and increased with increasing degree of polymerization of polyethyleneglycol block in the dimethacrylates. Considerable oxygen effect in the curing, particularly when polyethyleneglycol dimethacrylate was used as a comonomer, was recognized through the differences of the product properties, though no remarkable differences were found in the rate of gel formation in air and nitrogen atmosphere.
Total pectin content of Korean apple varieties at optimum harvest time was deter-mined by carbazole reaction method and pectin fraction content in each variety was also determined. Properties of pectin extracted ty 2a Sodium hexa metaphesphate were compared with commercial pectin. Among apple varieties, pectin contents varied in the range of 0.26-0.48% on fresh basis and 1.76-4. 0% on dry basis. Ball's was the highest and then high in order of Spur early blaze, Golden delicious, Fuji. , Jonathan. In each pectin fraction, soluble pectin fractions in Rall's was the lowest and in both Spur early blaze and Golden Delicious were highest but insoluble fractions in the latter were lowest. Thub the changes in poetic substances in Spur early blaze and Golden delicious seem to he occurred: during early ripening. In the analysis of properties of isolated pectin, ash, anhydrogalacturonic arid7(AUA) content and methoxyl content were different among apple varieties. Ash and methoxyl content in all isolated pectin were higher and AUA content lower than in commercial pectin. Degree of esterification (DE) in all apple varieties were above 70%.
(6-Cholesteryloxycarbonylpentoxypropyl)celluloses (CHPCs) with degree of esterification (DE) ranging from 2.25 to 2.91 were synthesized by reacting hydroxypropyl cellulose with 6-cholesteryloxycarbonylpentanoyl chloride. The acrylic esters of CHPCs (CHPCEs) and their photocrosslinked films with liquidcrystalline order were also synthesized. The thermotropic properties of mesophase for both uncrosslinked and crosslinked samples and the swelling behavior of the crosslinked samples in acetone were investigated. The hydroxypropyl cellulose exhibited an enantiotropic cholesteric phas, while all the uncrosslinked cholesterylbearing samples exhibited a monotropic cholesteric phases; the 6-cholesteryloxycarbonylpentanoyl chloride also showed a monotropic smectic phase. The hydroxypropyl cellulose formed a right-handed helix whose optical pitch (λ$\sub$m/) increases with temperature, whereas all the uncrosslinked derivatives farmed left-handed helices whose λ$\sub$m/'s decreased with temperature. The thermal stability of the mesophase and the magnitude of λ$\sub$m/ at the same temperature for both CHPCs and CHPCEs decreased with increasing DE. All the crosslinked samples, in constrast with CHPCEs, did not display reflection colors but exhibited an anisotropic swelling characteristic of crosslinked gel retaining liquid-crystalline order.
Crosslinked PVA membranes were achieved by esterification between the hydroxyl groups of PVA and carboxyl group of sulfosuccinic acid (SSA). SSA containing sulfonic group was used as a chemical crosslinking agent as well as a donor of fixed anionic group ($-SO_3$H). The crosslinking density of membranes was controlled by SSA content and calculated using polar and non-polar solvent. The crosslinking density measured by using non-polar solvent such as xylene and benzene increases with SSA content. However, using the polar solvent such as water and methanol, the crosslinking density increases up to SSA content of 20 wt% and above the content decrease due to sulfonic acid groups. The crosslinked PVA membranes were studied in relation with water diffusion coefficient and mechanical property as well as proton conductivity and methanol permeability as a function of crosslinking density. These properties were all dependent on the effect of SSA content.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.31
no.4
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pp.642-652
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2014
The synthesis of octenyl succinyl ${\beta}$-gucan (OSA-${\beta}$-glucan) was carried out and its interfacial properties at the oil-water interface and in emulsion systems were investigated. An aqueous ethanol system as a reaction media was used to facilitate the synthesis process; 10% (w/w) ethanol found to be the best as it showed a maximum degree of substitution (DS: 0.0132). FT-IR showed a characteristic absorption spectrum at $1736cm^{-1}$, indicating the esterification of octenyl succinyl groups to ${\beta}$-glucan backbone. As for interfacial tension measurements, it was decreased with increasing concentration of OSA-${\beta}$-glucan in the aqueous phase and when NaCl was added to aqueous OSA-${\beta}$-glucan solution in the range of 0.01 M to 0.1 M and also when pH was raised (pH 3 ~ pH 9). In systems of emulsion stabilized with OSA-${\beta}$-glucan, fat globule size found to decrease with increasing concentration of OSA-${\beta}$-glucan, showing a critical value of about $0.32{\mu}m$ at 0.5 wt%. When the OSA-${\beta}$-glucan emulsions were stored, it was found that fat globule size was increased with storage time and particularly pronounced increase was observed in emulsion with 1% OSA-${\beta}$-glucan, possibly due to depletion flocculation. Results of creaming stability evaluated by light scattering technique showed that it was more stable in emulsions containing smaller fat globule size. Surface load of OSA-${\beta}$-glucan in emulsions increased with increasing concentration of OSA-${\beta}$-glucan, suggesting a multilayer adsorption.
The multistep mechanism of photosensitized curing reaction cinnamoylated photosensitive polymer is proposed from the energy level diagram of cinnamic acid and sensitizer, and from the fact that excess of sensitizer brings the sensitivity to a limiting value etc. Various factors which have effects on the ability of sensitizer are also discussed. The mechanism involves following steps: activation to the first excited singlet states of cinnamoyl group(C) and sensitizer(S) by their absorption of photon, their intersystem crossing to the lowest triplet state, bimolecular internal quenching by formation of excimer of sensitizer, triplet excitation energy transfer and intermolecular addition between cinnamoyl group in ground state and that in triplet state. The rate equation derived from this mechanism is $-\frac{d[C]}{dt} = \frac{K_1[C]}{K_2 + [C]}[\frac{I^c_{abs}}{K_3 + [S]} + \frac{K_4[C]}{(K_5 + [C])(K_6 + [S])}(I^s_{abs} + \frac{K_7I^c_{abs}[S]}{K_8 + [S]})]$ where $I^c_{abs}\;and\;I^s_{abs}$: the rates of absorption of photon by cinnamoyl group and sensitizer $K_n$: Constants. It is proved with the cinnamate of poly(glyceryl phthalate)(PGC) in the absence of sensitizer using the infrared analytical method and successfully applied for the experimental data reported on the effects of the degree of cinnamoyl esterification and the concentration of sensitizer upon the sensitivity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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