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Escherichia coli에서의 Streptomyces coelicolor A3(2)의 acetyl xylan esterase 발현 양상 (Expression Pattern of Acetyl Xylan Esterase of Streptomyces coelicolor A3(2) in Escherichia coli)

  • 이인숙;윤석원;정상운;오충훈;김재헌
    • 미생물학회지
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    • 제39권2호
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    • pp.83-88
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    • 2003
  • streptomyces coelicolor A3(2)의 acetyl xylan esterase 유전자를 Escherichia coli께 클로닝하여 그 발현양상을 조사하였다. 이를 위하여 유전자 전체 DNA를 PCR증폭을 통하여 제조하였다. PCR산물의 염기서열을 분석한 결과 1,008개의 nucleotide로 구성된 하나의 open reading frame이 존재함을 확인하였고, 이것은 335개의 아미노산으로 이루어진 약 38 kDa의 단백질을 생성할 것으로 예측할 수 있었다. 이 유전자의 염기 서열은 streptomyces lividans의 acetyl xylan esterase와 98%의 상동성을 가졌다. 그런데 Escherichia coli (pLacl)에서 IPTG유도에 의해 두가지의 acetyl xylan esterase가 발현되었으며 각각의 분자량은 38 kDa과 34 kDa이었다. 이중에서 38 kDa의 단백질은 N-말단의 signal peptide를 포함한 전체 단백질이고,34 kDa의 단백질은 41번과 42번의 두 알라닌 잔기사이의 펩티드 결합이 끊어져 생산된 것으로 추정되었다.

Risk Factors for Displacement of the Abomasum in Dairy Cows and its Relationship with Postpartum Disorders, Milk Yield, and Reproductive Performance

  • Kang, Hyun-Gu;Jeong, Jae-Kwan;Kim, Ill-Hwa
    • 한국임상수의학회지
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    • 제36권1호
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    • pp.68-73
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    • 2019
  • We determined the risk factors for displacement of the abomasum (DA), and the relationships between DA and postpartum disorders, milk yield, and reproductive performance in dairy cows. Initially, we identified the risk factors for DA using data regarding cow health and calving season from 2,208 lactations. Then, we compared the incidence of postpartum disorders, culling, death, and reproductive performance between cows with DA and their control herdmates (each n = 57). In addition, serum metabolites concentrations and milk yield were compared between cows with DA and controls (each n = 33). Ketosis (odds ratio [OR] = 9.27, p < 0.0001) and twin calves (p = 0.06) increased the risk of DA. Cows with a parity of three had a higher risk (OR = 5.23, p < 0.01) of DA than primiparous cows. Serum total cholesterol concentration was lower but non-esterified fatty acid, ${\beta}-hydroxybutyrate$, and alanine aminotransferase concentrations were higher after calving in cows with DA than in controls (p < 0.05). The removal rate from the herd by 2 months after calving was higher (p < 0.05) but milk yield 1 and 2 months after calving (p < 0.01) and the rate of first insemination by 150 days postpartum were lower (hazard ratio = 0.49, p < 0.05) in cows with DA than controls. In conclusion, higher parity, twin calves, and ketosis are risk factors for DA in dairy cows, which is associated with a higher removal rate from the herd, lower milk yield, a longer calving to first insemination interval, and unfavorable levels of metabolites related to energy and liver function.

Benzoate 분해세균 Acinetobacter sp. kS-1에서 분리된 catechol 1,2-dioxygenase의 특성 및 N 말단 아미노산 서열 분석 (Characterization and N Terminal Amino Acid Sequence Analysis of Catechol 1,2-Dioxy-genase from Benzoate Degrading Acinetobacter sp. KS-1)

  • 오계헌;송승열;김승일;윤경하
    • 미생물학회지
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    • 제38권2호
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    • pp.74-80
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    • 2002
  • 단일 탄소원 및 에너지원으로 benzoate를 이용하는 Acinetobacter sp. KS-1에서 분리 정제한 catechol 1,2-dioxygenase (Cl,2O)의 특성과 아미노산 서 열을 분석하였다. Cl,2O는 catechol과 4-methylcatechol에 대해서 효소활성을 나타내었으며, 활성 최적온도는 $35^{\circ}C$이고, 활성 최적 pH는 7.5-9.0의 범위 내에 있었다. 효소활성 저해제로서 은, 수은, 그리고 구리는 Acinetobacter sp. KS-1의 Cl,2O 활성을 억제하였다. SDS-PAGE에 의해 측정된 Cl,2O의 분자량은 약 36 kDa 였으며, N-말단 아미노산 서 열을 분석한 결과, $^{1}MNYQQIDALVKQMNVDTAKG^{20}$로 Acinetobacter radioresistens의 Cl,2O와 95%의 유사성을 보여주었다. In-gel 아미노산 서열 분석을 위하여 trypsin 처리와 peptide mapping을 실시하였다. MALDI-TOF를 이용하여 trypsin으로 처리된 세 개의 peptide flagmen써 분자량을 분석한 결과 966.3 Da, 2081.7 Da, 그리고 1933.8 Da으로 각각 나타났는데, 이는 A. radioresistens의 Cl,2O와 내부 서 열$^{1}SQSDFNLRR^{9}\, ^{1}HGNRPSHVHYFNSAPGYR^{18}\, ^{1}TIEGPLYVAGAPESVGFAR^{19}$ 이 일치하는 것으로 분석되었다. N-말단 서열과 내부 서열을 바탕으로 primer를 제작하여 polymerase chain reaction을 실시하였다.

A NOTE ON BILATERAL SEMIDIRECT PRODUCT DECOMPOSITIONS OF SOME MONOIDS OF ORDER-PRESERVING PARTIAL PERMUTATIONS

  • Fernandes, Vitor H.;Quinteiro, Teresa M.
    • 대한수학회보
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    • 제53권2호
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    • pp.495-506
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    • 2016
  • In this note we consider the monoid $\mathcal{PODI}_n$ of all monotone partial permutations on $\{1,{\ldots},n\}$ and its submonoids $\mathcal{DP}_n$, $\mathcal{POI}_n$ and $\mathcal{ODP}_n$ of all partial isometries, of all order-preserving partial permutations and of all order-preserving partial isometries, respectively. We prove that both the monoids $\mathcal{POI}_n$ and $\mathcal{ODP}_n$ are quotients of bilateral semidirect products of two of their remarkable submonoids, namely of extensive and of co-extensive transformations. Moreover, we show that $\mathcal{PODI}_n$ is a quotient of a semidirect product of $\mathcal{POI}_n$ and the group $\mathcal{C}_2$ of order two and, analogously, $\mathcal{DP}_n$ is a quotient of a semidirect product of $\mathcal{ODP}_n$ and $\mathcal{C}_2$.

Loss of infectivity of Neospora caninum oocysts maintained for a prolonged time

  • Uzeda, Rosangela Soares;Costa, Kattyanne De Souza;Santos, Sara Lima;Pinheiro, Alexandre Moraes;Almeida, Maria Angela Ornelas De;McAllister, Milton M.;Gondim, Luis Fernando Pita
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제45권4호
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    • pp.295-299
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    • 2007
  • The purpose of this study was to investigate whether sporulated Neospora caninum oocysts, which had been stored for 46 mo in a 2% sulfuric acid solution at $4^{\circ}C$, remain morphologically viable and infective to gerbils (Meriones unguiculatus). Six gerbils were orally inoculated with doses of 400 or 1,200 oocysts. Two mo after inoculation, the animals did not show any clinical signs, had no histological lesions, and were seronegative for N. caninum at 1:50 in an immunofluorescent antibody test. PCR using the brain from each gerbil did not reveal N. caninum specific DNA. We conclude that oocysts preserved for 46 mo are not infective, despite being morphologically intact.

LASER ISDG법으로 관찰한 용접재에서의 피로크랙개구거동

  • 송삼흥;김현;최진호
    • 한국정밀공학회:학술대회논문집
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    • 한국정밀공학회 2001년도 추계학술대회 논문집
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    • pp.263-268
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    • 2001
  • The constant .DELTA. K fatigue tests are performed in SS41 and its weldment. The LASER ISDG method is used in determination of crack opening ratio. This method is more precise than indirect measurement method, faster and easier than other direct measurement method. And obtained results are followed 1) Crack opening ratio U is proportional to fatigue crack growth rate da/dN at constant .DELTA. K 2) Fatigue crack growth rate da/dN in weldment increases in weld metal and heat affected zone, decreases in base metal as crack grows.

STRUCTURAL ANALYSIS OF THE SOLUBLE FORM OF BOVINE DOPAMINE BETA-HYDROXYLASE

  • Hwang, On-You;Joh, Tong-Hyub
    • Toxicological Research
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    • 제6권1호
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    • pp.99-107
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    • 1990
  • Dopamine beta-hydroxylase (DBH) is a neurotransmitter biosynthetic enzyme which catalyzes the conversion of dopamine to norepinephrine. Although structural studies of the mature form of this enzyme have been extensive, the culmination of these finding had been hightly controversial and contradictory. In this study, biochemical approaches were taken to characterize the structure of mature DBH. Soluble bovine DBH was purified from aderenal medulla. Three bands of 69 kDa, 72 kDa and 75 kDa which were physically separable and similar in structure were observed by SDS-PAGE. Furthermore, gas phase sequence analysis revealed that the 72 kDa band consists of two polypeptides which are present at equimolar concentrations and differed in that one had three extra amino acids at the N-terminus. Taken together, the soluble form of DBH exist in at least four forms, three identified by SDS-PAGE, one of which consists of two polypeptides as identified by N-terminal sequence analysis. The significance of these forms and their possible biosynthetic mechanisms are discussed.

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Characteristics of protease inhibitor produced by streptomyces fradiae SMF9

  • Kim, Hyoung-Tae;Suh, Joo-Won;Lee, Key-Joon
    • Journal of Microbiology
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    • 제33권2호
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    • pp.103-108
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    • 1995
  • Streptomyces fradiae protease inhibitor (SFI) was purified effectively by preparative isoelectric focusing and hydroxyapatite chromatography. The molecular weight of SFI was estimated to be 1.7 kDa by SDS-PAGE and 1.8 kDa by molecular sieving HPLC. One hundred and sixty amino acid residues were determined from which molecular weight of SFI was calculated to be 17.054 Da and carbohydrate residue was not detected. SFI was calculated to be 17,064 Da and carbohydrate residue was not detected. SFI was a monomeric protein with two reactive sits, of which isoelectric point was pH 4.1. N-terminal amino acid sequence of SFI had homology with SSI (Streptomyces subsilisin inhibitor) and other protease inhibitors produced by Streptomyces.

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천연유기물질의 특성과 막의 종류에 따른 막오염 메카니즘 분석 (Effects of Membrane Size and Organic Matter on Membrane Fouling)

  • 정철우;손희종
    • 대한환경공학회지
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    • 제28권10호
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    • pp.1046-1054
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    • 2006
  • 낙동강 매리원수의 경우 HPO가 42.9%, HPI가 39.3% 및 TPI가 17.8%를 차지하고 있는 것으로 나타났다. HPO를 세분화한 결과에서 HPO-FA와 HPO-HA의 구성비는 62%와 38%로 나타났고, HPO-car과 HPO-phe로 분류하였을 경우는 HPO 중에서는 각각 64%와 36%를 차지하고 있는 것으로 나타났다. 또한, HPI를 세분화하여 조사한 결과, HPI에 대한 함량은 HPI-N이 44%, HPI-C가 56%를 차지하고 있는 것으로 나타났다. 분리된 NOM을 이용한 막 오염 평가에서 공극 크기가 100 kDa 이상인 막에서는 HPI-N이 가장 막 오염을 많이 유발하는 NOM으로 나타났고, 다음으로 HPO-car, HPO-HA, HPO-FA, HPI-C, HPO-phe 순으로 나타났다. 또한, 10 kDa 막에서는 HPI-N, HPI-C, HPO-HA, HPO-car, HPO-FA, HPO-phe 순으로 막 오염을 많이 유발하는 것으로 나타났다. 100 kDa 막의 경우 친수성 NOM에 비하여 소수성 NOM에서 상대적으로 $K_s$, $K_i$, $K_c$ 값이 크게 나타났으며 소수성 NOM의 경우 막 공극 내부와 막 공극 표면에서 막 오염을 유발하는 것으로 나타났다. 특히 HPI-N과 HPO-car가 막의 공극 내부에서 막 오염을 일으키는 주요 NOM으로 작용하고 있었다. 10 kDa 막의 경우 소수성 NOM에 비해 친수성 NOM 중 HPI-N이 상대적으로 주된 막 오염 물질로 나타났다. 100 kDa 이상의 공극이 큰 막에서는 소수성 계열의 NOM이 막의 공극내부에서 막 오염을 유발하는 것이 주된 막 오염 메카니즘이었으며, 10 kDa 정도의 공극이 작은 막의 경우 친수성 계열의 NOM이 막 표면에서 막 오염을 유발하는 것이 주된 막 오염 메카니즘이었다. 투과 flux 감소에 대한 NOM의 분자량 분포 영향을 살펴본 결과, 전반적으로 2,000 g/mol 이하의 분자량 범위에서 90% 이상의 분포범위를 나타내고 있어 투과 flux 감소에 대한 유기물 분자량 크기분포의 영향은 없는 것으로 나타났다.

레오나르도 다 빈치와 J.N.L. 뒤랑의 그리드 사용법에 관한 비교 연구 (A Comparative Study on the Different Usage of the Grids between Leonardo da Vinci and J.N.L. Durand)

  • 황민혜
    • 예술인문사회 융합 멀티미디어 논문지
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    • 제7권8호
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    • pp.189-199
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    • 2017
  • 본 연구는 레오나르도 다 빈치와 J.N.L. 뒤랑이 건축 평면도를 설계하는 과정에 공통적으로 보이는 그리드 사용법을 비교함으로써, 그 차이를 밝혀내고 이를 통해 서양 건축사 내에서 이들의 위상을 재평가 하는데 목적이 있다. 표준화된 측정 도구가 없었던 시절에 보조선은 디자인을 하는 데 있어 필수불가결한 요소였으며, 이는 전적으로 건축가 개인의 사고방식과 디자인 편의에 의존해서 사용되었다. 이에 건축가들이 그려내는 보조선을 연구하는 것은 그 건축가가 지니고 있던 시대 의식과 사상, 철학, 과학과 수학 등이 관련된 인간의 인식체계를 연구하는데 상당히 타당성이 있는 도구라 여겨진다. 특히 디자인 분야에서의 그리드는 고대로부터 일반적으로 사용되어 왔던 보조선 중 하나이다. 그럼에도 불구하고 정작 건축 분야에서만큼은 레오나르도 다 빈치와 J.N.L. 뒤랑을 제외하고는 그리드 사용자가 드물다. 게다가 이들은 그 사용법에 있어서 상당한 차이점을 보이고 있다. 레오나르도 다 빈치의 그리드 규격은 동일한 것이 아니라, 선행해서 놓인 실의 가로 및 세로 규격에 맞추어 달라지고 있으며, 중심이 다른 그리드가 순차적으로 사용된다는 것이 특징적이다. 반면 J.N.L. 뒤랑의 그리드 중심은 항상 도면의 중심과 일치한다. 그리드의 모든 위치는 하나의 공통된 점을 중심으로 위상을 정할 수 있으며, 모두 동일한 규격을 전제하고 있다. 이에 본 연구에서는 레오나르도 다 빈치의 그리드를 '구상적', J.N.L. 뒤랑의 그리드를 '추상적'이라 구분하여 보았다.