The aim of the present study was to examine the effects of green tea extract (CUMS6335) on the release of CA evoked by cholinergic stimulation and direct membrane-depolarization in the perfused model of the adrenal gland isolated from the spontaneously hypertensive rats (SHRs), and to establish the mechanism of action. Furthermore, it was also to test whether there is species difference between animals, and between CUMS6335 and EGCG, one of biologically the most powerful catechin compounds found in green tea. CUMS6335 $(100\;{\mu}g/ml)$, when perfused into an adrenal vein for 60 min, time-dependently inhibited the CA secretory responses evoked by ACh (5.32mM), high $K^+$(56 mM), DMPP $(100\;{\mu}M)$, and McN-A-343 $(100\;{\mu}M)$ from the isolated perfused adrenal glands of SHRs. However, CUMS6335 itself did fail to affect basal catecholamine output. Also, in adrenal glands loaded with CUMS6335 $(100\;{\mu}g/ml)$, the CA secretory responses evoked by Bay-K-8644 $(10\;{\mu}M)$ and cyclopiazonic acid $(10\;{\mu}M)$ were also inhibited in a relatively time-dependent fashion. However, in the Presence of EGCG $(8.0\;{\mu}g/ml)$ for 60 min, the CA secretory response evoked by ACh, high $K^+$, DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644 and cyclopiazonic acid were not affected except for last period. Collectively, these results indicate that CUMS6335 inhibits the CA secretion evoked by stimulation of cholinergic (both nicotinic and muscarinic) receptors as well as by direct membrane-depolarization from the perfused adrenal gland of the SHR. It seems that this inhibitory effect of CUMS6335 is exerted by blocking both the calcium influx into the rat adrenal medullary chromaffin cells and the uptake of $Ca^{2+}$ into the cytoplasmic calcium store, which are at least partly relevant to the direct interaction with the nicotinic receptor itself. It seems likely that there is much difference in mode of the CA-releasing action between CUMS6335 and EGCG.
Human cytomegalovirus (HCMV) replication and $Ca^{2+}$ response in human cell lines of neuronal origin were investigated. SK-N-SH (neuroblastoma cells) and A172 cells (glioblastoma cells) were used. SK-N-SH cells were permissive for HCMV multiplication with a delay of one day compared to virus multiplication in human embryo lung (HEL) cells. The delay of HCMV multiplication in SK-N-SH cells appeared to be correlated with a delay in the $Ca^{2+}$ response. The cytoplasmic free $Ca^{2+}$ concentration ($[Ca^{2+}]_i$) began to increase at 12 h p.i. in HCMV-infected SK-N-SH cells, while $[Ca^{2+}]_i$ increase in HCMV-infected HEL cells was observed as early as 3 h p.i. On the whole, the level of the increase in $[Ca^{2+}]_i$ in SK-N-SH cells was about 30% of that in HEL cells. On the other hand, in A172 cells infected with HCMV, neither production of infectious virus nor detectable increase in $[Ca^{2+}]_i$ was observed. Treatment with TPA of HCMV-infected SK-N-SH cells resulted in $[Ca^{2+}]_i$ increase at 6 h p.i. The stimulatory effect of TPA on HCMV- induced $[Ca^{2+}]_i$ increase continued until 12 h p.i., but TPA failed to stimulate the $Ca^{2+}$ response in SK-N-SH cells at 24 h p.i., suggesting that the effect of TPA had disappeared in SK-N-SH cells at that time point. In conclusion, SK-N-SH cells are permissive for HCMV replication and the delay in $Ca^{2+}$ response may be a consequence of the lower responsiveness of SK-N-SH cells than HEL cells to HCMV infection.
The morphologic changes of small intestinal epithelium in pigs diagnosed as porcine epidemic diarrhea(PED} by virus isolation and immunohistochemistry were studied through light microscope and transmissible electron microscope. On semi-thin section, the histologic findings showed severe villous atrophy and fusion with hyperplasia of cuboidal epithelium in the villi, inflammatory cell infiltration in lamina propria, and increased mitotic figures in the crypt. The structural changes were mostly restricted to the cytoplasm of affected absorptive epithelium of villi. 3 types of epithelial changes were found; degenerated virus-affected cells, undifferentiated cuboidal cells, and normal columnar cells. On electron microscopy, round to spherical viral particles of 50∼l00nm in diameter were found within the dilated vesicles and endoplasmic reticulums of degenerated cells, which had decreased their cytoplasmic electron density due to dilated and missing organelles(e.g. mitochondria, ERs, etc.). Microvilli were shortened and sparse, leaving denuded terminal web of the villous epithelial cells. Fat globules were often found within slightly degenerated enterocytes. On the tip of villi, severely damaged cells were exfoliated and replaced by undifferentiated cuboidal cells We found distinct ultrastructural changes in the jejunal epithelium confirming PED virus infection is involved in malabsorptive diarrhea.
Hemal nodes and hemolymph nodes are lymphoid organs that share morphologic and functional characteristics of lymph nodes and spleens. The aim of the present study was to obtain new informations on the distinct morphological structures of hemal nodes and hemolymph nodes according to ages, and to get the basic data for their functions in Korean native goats. Goats were divided into 5 groups, consisting of 3 animals aged 1, 3, 6, 10 and 12 months, respectively. Ultrastructural features of the organs were observed by transmission and scanning electron microscopes. The sinuses of hemal nodes and hemolymph nodes were lined by endothelial-like reticular cells which had euchromatin-rich nuclei and many cytoplasmic processes, surrounding collagen fibrils. Macrophages containing phagocytosed erythrocytes were often noted in the diffuse lymphatic tissues of hemal nodes and hemolymph nodes. Some mast cells were in contact with the plasma cells near the blood vessel. Hemal nodes and hemolymph nodes had venous sinusal-like vessels which were different from the deep sinus. The lymph vessels with valves were observed in the capsule of the hemolymph node. There were no ultrastructural differences of the organs in the age different groups of the animals. These results suggest that hemal nodes and hemolymph nodes may take part in hemopoiesis, blood filtration and immune reaction in Korean native goats.
These studies were carried out to detect the presence of mycotoxin fungi and detoxification of toxins in various kinds of grain and foodstuffs in Korea. The experiments were divided into three parts: mycologic, toxicologic and electron microscopic study. The resuIts were summarized as follows: 1. From the 210 various, samples(local grains, 150 samples; rice-cakes, 50 samples; meju, 10 samples), 1,205 colonies or fungi were isolated. In 1,127 of 1,205 colonies, it was possible to identify 21 genera. Among the identified strains, the predominant genera were Aspergillus sp.(28.5%), Penicillium sp.(27.1%) and Mucor sp.(7.8%). 2. In cytotoxicity test on HeLa cells, 25 strains showed severe toxic effects among the 240 strains of experiments. 3. In histopathologic test on mice, 21 strains showed severe toxic effect to mouse liver cells among the 240 tested strains. 4. In electron microscopic studies of HeLa cells and mouse liver cells from animal which had been treated with crude toxin, the liver cells showed the cytoplasmic change: dillatation or vacuolization of endoplasmic reticulum, swelling of mitochondria and disappearance of mitochondrial cristae, increased number of lipid and glycogen particles. Nucleus and nucelar envelope alterations, were also noted. 5. In the detoxification study with ultraviolet irradiation, 90% of the toxic substances were denatured by the ultraviolet light irradiation for 24 hours. 6. As a mass screening, the cytotoxicity test of HeLa cells and histopathologic study of mice liver cells treated with culture filtrates, employed and feasible to detect mycotoxin producing fungi.
Topical anesthetics are commonly used in oral & maxillofacial surgery to control pain in the oral cavity mucosa before local anesthetic injection. These anesthetic agents come in many forms, developed for different usages, to minimize adverse reactions, and for optimal anesthetic efficiency. Earlier studies have revealed that these agents may also limit the growth of microorganisms in the area of anesthetic application. Many topical anesthetic agents show different levels of antimicrobial activity against various bacterial strains and Candida. The dosage of local anesthetic agent used in some clinical preparations is too low to show a significant effect on microbial activity. Efficiency of antimicrobial activity depends on the local anesthetic agent's properties of diffusion within the bloodstream and binding efficiency with cytoplasmic membrane, which is followed by disruption of the bacterial cell membrane. The antimicrobial properties of these agents may extend their usage in patients to both control pain and infection. To develop the topical local anesthetic optimal usage and antimicrobial effect, a collaborating antiseptic agent may be used to benefit the local anesthetic. However, more research is required regarding minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of topical local anesthetic agents with drug interaction between anesthetics and antiseptic agents.
Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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제4권4호
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pp.231-240
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2000
Effects of Jasmonic Acid and Wounding on Polyphenol Oxidase Activity in Senescing Tomato Leaves The effects of jasmonic acid(JA) and wounding on polyphenol oxidase(PPO) during leaf senescence was investigated by measuring the PPO activity in detached tomato(Lycopersicon esculentum Mill.) leaves of two-week-old seedlings. The PPO activity in the detached senescing leaves increased significantly in the dark. The leaf segments responded to the application of JA with accelerated senescence, as indicated by the loss of chlorophyll and rapid increase in the PPO activity. The senescence-promoting action of JA differed in the light and dark. Wounding the detached senescing leaves by scraping surface segments or making punctures with needles considerably delayed the loss of chlorophyll and had a significant effect on the PPO activity, the amounts of which were roughly proportional to the intensity of the wounding. In the dark, the combination of wounding plus JA resulted in stable levels of chlorophyll and PPO. JA and ABA acted similarly in both unwounded and wounded leaves, however, the amount of chlorophyll and PPO in the wounded segments was always higher than in the respective controls. JA was found to eliminate the senescence-retarding action of benzyladenine. In a histochemical localization test, the PPO activity was found to be localized in the cell walls of the parenchyma tissue, thereby indicating moderate cytoplasmic reactions. In the JA-treated plants, the PPO activity was intense in the cells of the cortex and phloem parenchyma. Accordingly, based on these observations it would appear that PPO is a component of a defense response maker, whereas JA plays an integral role in the intracellular signal transduction involved in inducible defense mechanisms.
한국의 남해안에서 한천 분해능이 뛰어난 해양 미 생물을 분리하여 통정한 결과 Pseudomonas 속으로 판명되었으며, 본 연구에서는 이 균을 Halophilic P Pseudomonas sp. W7이라 명영하였다. 이 균주는 호염성 세균으로, 한천의 존재 하에서 높은 효소활성 을 가지는 extracellular agarase를 생산해 내었다. 이 extracellular agarase를 DEAE-Cellulose ani- on exchange chromatography와 gel filtration을 통해 정제하였으며, 정제된 agarase는 SDS-PAGE 를 통해 약 89KDa의 분자량을 지니는 single protein band염을 확인하였다. 한편 agarase의 대량생 산을 위하여 host cell Eo coli JM83과 vector pUC19를 이용하여 gene cloning을 행하였다. Pseudomonas sp. W7의 chromosomal DNA가 삽 입 된 균주 중에 서 agarase activity를 나타내는 E. coli JM83/pSWl과 Eo coli JM83/pSW3를 선멸하 였으며, 전기영통 실험결과 이들은 각각 307Kb, 3.0 K Kb의 chromosomal 단편을 지니고 있음을 확인하였 다. 또한 agarase 유전자가 압입된 변이 균주(B)는 inclusion body 형태의 interacellular agarase를 세포 내에 축적하고 있음이 확인되었다.
Malau-Aduli, A.E.O.;Nishimura-Abe, A.;Niibayas, T.;Yasuda, Y.;Kojima, T.;Abe, S.;Oshima, K;Hasegawa, K.;Komatsu, M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권11호
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pp.1484-1490
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2004
Mitochondrial DNA haplotypes from the displacement-loop (D-loop) region (436 bp) were genotyped and sequenced in Japanese Black beef cattle raised in the same herd. Correlation coefficients between mitochondrial DNA haplotypes, maternal lineage, birth weight, preweaning average daily gain, weaning weight, post weaning average daily gain and yearling weight were computed. The objective was to study the relationship between maternal and postnatal growth traits and to investigate if postnatal growth of calves to yearling age could be accurately predicted from mitochondrial DNA haplotypes. Results of the phylogenetic analysis revealed 17 maternal lineages and four mitochondrial DNA haplotypes. There were strong, positive and highly significant (p<0.001) correlations among maternal traits ranging from 0.52 to 0.98. Similarly, among postnatal growth traits, most of the correlations were also strong, positive and highly significant (p<0.001); the highest correlation of 0.94 was between preweaning average daily gain and weaning weight. However, correlations between mitochondrial DNA haplotypes and postnatal growth traits were very low, mostly negative and non-significant (p>0.05) ranging from -0.05 to 0.1. Prediction of postnatal growth from mitochondrial DNA yielded very low $R^{2}$ values ranging from 0.002 to 0.019. It was concluded that mitochondrial DNA polymorphism has no significant association with postnatal growth from birth to yearling age, and by implication, nuclear rather than cytoplasmic DNA, accounts for most of the genetic variation observed in postnatal growth of Japanese Black cattle. Therefore, mitochondrial DNA genotyping at an early age has no bearing on the accurate prediction of the future growth performance of calves.
Holstein cow ovaries obtained at a slaughterhouse were used to study the influence of the oocyte collection methods (slicing, puncture, aspiration I and II) on recovery efficiency and subsequent in vitro maturation and embryonic development competence of immature oocytes recovered. In the slicing method, the whole ovarian was chopped into small pieces with a surgical blade. In the puncture method, the whole ovarian surface was punctured by 18-g needle. In other 2 aspiration methods, collected oocytes by aspirating from the visible follicles using an 18-g needle attached to a 5 ml syringe (aspiration I) or using a constant negetive pressure (-80 mmHg) with a vacuum pump (aspiration II). The oocytes were classified into 4 classes on the basis of the morphology of cumulus cells and cytoplasmic appearance of oocyte. Slicing ($9.6{\pm}0.4$) and puncture ($9.7{\pm}0.4$)yielded a larger number of oocytes per ovary than other two aspiration methods (aspiration I and II were $5.8{\pm}0.3$and $5.6{\pm}0.4$, respectively) (p<0.05). The number of the highest quality oocytes (grade A) per ovary was significantly higher in slicing ($4.2{\pm}0.2$) and puncture ($4.6{\pm}0.1$) methods than in other methods (aspiration I and II were $1.2{\pm}0.2$ and $1.4{\pm}0.2$, respectively) (p<0.05). The rate of nuclear maturation of the highest and higher quality oocytes (grade A and grade B, respectively) was not affected by the oocytes collection methods. The oocytes collection methods also did not influence subsequent embryonic developmental competence after in vitro fertilization with M II stage oocytes. It is concluded that slicing and puncture methods of the ovaries can be used as an alternative techniques to aspiration by the syringe or vacuum pump.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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