This study was carried out to develope enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of canine brucellosis in dogs experimentally inoculated with Brucella abortus 1119-3 and B. canis RM666. Groups A, B and C of dogs (each group consisting of three dogs) were orally inoculated with approximately $5{\times}10^9$ colony-forming units of B. abortus and B. canis, and with sterile pyrogen-free PBS, respectively. The animals were monitored at regular intervals upto the 12th week post inoculation (PI) by standard tube agglutination test (STAT), plate agglutination test (PAT), Rose Bengal test (RBT), 2-mercaptoethanol rapid slide agglutination test (2ME-RSAT) and ELISA. The induced antibody titers in group A dogs were detected from the first week PI to the eighth week PI in STAT, PAT and RBT using the inactivated whole cells of B. abortus 1119-3 as antigens, while no sera in groups B and C dogs reacted with the antigens. In 2ME-RSAT using whole cells of B. canis M-strain as antigens, the induced antibody titers in group B dogs were observed at the second week PI and persisted for the 12th week PI, while sera of groups A and C dogs did not react with the whole cells. In ELISA using cytoplasmic fractions antigen of B. abortus 1119-3, the mean optical density of antibodies in groups A and B was detected from the first and second weeks PI, respectively, and persisted for 12th week PI, while sera of group C did not cross-react with the fractions antigen. However, in ELISA using the hot saline extracts of B. canis M- as an antigen, the induced antibody titers in only group B dogs were detected from second week PI and persisted for until the end of this study. These results indicate that the ELISA using B. abortus 1119-3 cytoplasmic fractions as antigens can be a good candidate for detection of brucellosis by B. abortus as well as B. canis in dogs.
담배나방 유충에서 분리한 세포질다각체병 바이러스의 형태, 다각체 단백질 및 핵산의 전기영동상과 바이러스의 병원성을 조사하여 본 바이러스를 이용한 담배나방의 생물적 방제 이용성을 검토하고자 본 실험을 수행하였다. 다각체의 형태는 외관상 6각형으로 0.5~3.7 ${\mu}m$ 크기이고 바이러스 입자는 정 20면체로 55nm였다. SDS-PAGE에 의한 다각체 단백질은 단일 롤리?타이드인 24.3 Kd와 5개의 작은 구성분으로 이루어졌다. 바이러스입자는 7개의 폴리?타이드로 구성되어 있으며 분자량은 28.0~133.6 Kd였다. 바이러스 게놈은 10개의 조각으로 된 총 분자량 18.08 Md인 이본쇄 RNA로 각 조각의 분자량 범위는 0.65~2.79 Md이였다. 3령 유충에 대한 담배나방 세포질 다각체병바이러스의 $LC_{50}$은 $2.895{\times}10^5PIBs/ml$이었으며 $5.0{\times}10^{6}PIBs/ml$의 농도에서 $LT_{50}$에서 16.4일이었다.
This experiment was undertaken to examine the injurious environment conditions for occuring of the virus disease, grasserie and cytoplasmic polyhedrosis in rearing of silk worms, to observe of cytoplsamic polyhedrosis diseased silkworms with histological preparation and to define the virus origin on the gattine and the disease of shrinked form after moulting (Okichijimi). The results obtained are as follows. 1) The grasserie in spring season rearing was remarkably infected in highly percent with 20.1 % in high temperature condition during 3rd to 4th instar, the high temperature during 1st to 2nd instar and 5th instar in 16.5% and 16.3%, respectively. In the fall season rearing, the disease was infected by the feeding of soft leaves plot in 5.3% and 4.8%, respectively with significant difference in 5% level, accordingly, it was thought to the nutritional condition is a factor in occuring of the disease. 2) In spring season rearing, the number ofl infected silk worms of cytoplasmic polyhedrosis was increased in the high temperautre and high humidity conditions, and in fall season rearing, order of the low temperature and high humidity plot, first feeding plot and feeded with hard leaves plot were found insome high infected ratio of the disease than control plot. 3) The occuring of cytoplasmic polyhedrosis was observed even in control rearing plot with the examining of anatomical and histological preparation in spring and fall. 4) It was found that the high diseased ratio of the gattine and disease of shrinked form after moulting in 21.8% of control and 93.2% in feeded with inocylated plot in the biosassay of inoculum. It was defined as a virus flacherie acoording to the Danaka and Shimizu's examine method.
From April 2014 to September 2015, 153 piglets from 52 farms in Jeju were diagnosed with porcine epidemic diarrhea (PED). The major PED cases were focused on suckling piglets (144 piglets, 94.1%), particularly in 1-7-day-old piglets. Histopathologically, severe villous atrophy was observed in the small intestine, especially in the jejunum and ileum. The mean villous height to crypt depth ratios of the jejunum and ileum were 1.4:1 and 1.5:1, respectively. The major histopathologic findings of the small intestine were cytoplasmic vacuolation, cuboidalization, squamation, and exfoliation of the mucosal enterocytes in the villi. The cytoplasmic vacuolations in the enterocytes were the most prevalent lesions in the small intestine and were more severe in the ileum than in the jejunum. According to immunohistochemistry methods, the PED virus (PEDV) antigens were presented in the cytoplasms of the enterocytes, and were distributed more prevalently in the ileum than in the jejunum. PEDV antigens were also detected in the colon of 26 piglets (19.5%). Sequence comparison and phylogenetic analysis indicated that 12 PEDV had more than a 98.9% homology with each other. These PEDV strains were highly homologous with the genogroup 2 North American group.
저자들은 성숙한 雄性白鼠(Albino Wistar)에 INH 40mg/kg, pyridoxine 20mg/kg를 경구적으로 투여하여 mast cell과 enterochromaffin cell 의 변동을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. INH투여로 白鼠 약 舌 mast cell 의 심한 파괴와 細胞質顆粒의 逸出作用으로 세포수는 격감하였으나, pyridoxine 투여군에서는 대조군에 비해 상당한 수적증가를 보였다. 2. INH 투여로 白鼠 심이지장 enterochromaffin cell의 세포수와 細胞質顆粒양에 현저한 감소를 나타냈으나 pyridoxine 투여군에서는 대조군에 비해 enterochromaffin cell의 상당한 수적증가를 보였다. 3. 이상의 성적에 있어서 INH의 다량 투여는 mast cell과 enterochromaffin cell의 생성에 심한 장해를 주며 pyridoxine 의 적당한 투여는 mast cell과 enterochromaffin cell의 생성을 조장 하고 顆粒양을 증가시키는 것으로 보아 이들 세포의 分泌産物인 5-Hydroxytryptamine 대사에 pyridoxine이 관여하는 것으로 사료된다.
Jang Woo Ha;Jung Yoon Pyo;Sung Soo Ahn;Jason Jungsik Song;Yong-Beom Park;Sang-Won Lee
The Korean journal of internal medicine
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제39권3호
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pp.524-536
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2024
Background/Aims: This study applied the 2022 American College of Rheumatology (ACR)/European Alliance of Associations for Rheumatology (EULAR) criteria for antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA)-associated vasculitis (AAV) to patients with systemic sclerosis (SSc) and investigated the frequency of overlap syndrome of SSc and AAV (SSc-AAV-OS). Methods: Among the 232 patients diagnosed with SSc, 105 with signs suggestive of small- or medium-vessel vasculitis, which were defined as the present of interstitial lung disease (ILD), peripheral neuropathy, or suspected renal vasculitis, were included in this study and analyzed. Results: Among the 105 SSc patients, the detection rate of ANCA was 19.0%. When the 2022 ACR/EULAR criteria were applied, the frequency of SSc-AAV-OS was 20.0%, which was much higher than 1.7% reported with previous criteria for AAV. ANCA positivity contributed to the reclassification of SSc-AAV-OS more than ANCA negativity in SSc patients with signs suggestive of small- or medium-vessel vasculitis. Conclusions: The frequency of SSc-AAV-OS in SSc patients with signs suggestive of small- or medium-vessel vasculitis at diagnosis was 20.0%. Therefore, we suggest that physicians should perform ANCA tests in SSc patients exhibiting signs suggestive of small- or medium-vessel vasculitis and apply the new criteria for AAV.
Bacillus amyloliquefaciens의 extracellular $\alpha$-amylase는 세포질막에 결합된 ribosome에서 합성되며 이 때 ribosome은 nascent polypeptide쇄에 의해 막에 부착된 것으로 추측된다. $\alpha$-amylase 생산균주인 E. amyioiiquefaciens 야생주의 정상단백(MW, 58kDa)과 이 균주의 $\alpha$-amylase 구조유전자에 변이가 일어나 carboxy 말단이 결실된 변이주의 이상단백 (33kDa)은 동일조건하의 배양외액에서 그 효소활성이 검출됨을 볼 때, $\alpha$-amylase의 carboxy 말단에는 막 투과의 신호가 없는 것으로 생각된다. 그러나 이들 양균주의 대수증식기 세포에 puromycin을 20$\mu\textrm{g}$/$m\ell$까지 가하여 6시간 동안 처리한 결과 균의 사멸에는 영향을 미치지 않았으나 extracellular $\alpha$-amylase 활성은 10$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서도 동일양상으로 감소하였다. 이 감소요인은 puromycin 처리시 막결합 ribosome에서의 막과 ribosome의 가교로 작용할 것으로 예상되는 nascent poly peptide 합성이 중단되므로 막으로부터 ribosome이 해리되어 $\alpha$-amylase의 분비가 억제된 것으로 추측된다. 이 현상은 50mM의 magnesium의 첨가효과 가 약하게 나타났기 때문에 ribosome은 nascent Polypeptide의 가교로 막에 부착되어 있는 것으로 생각된다. 또 Iysozyme 처리에 의해 세포벽을 분해한 protoplas가 trypsin을 함께 처리하므로서 세포외액의 $\alpha$-amylase 활성이 상실됨은 막의 외부로 protruding되는 nascent polypeptide가 trypsin에 의해 분해되기 때문으로 생각된다. 3차 구조를 형성한 extracellular $\alpha$-amylase의 경우 trypsin 내성임을 감안할 때 이 분자가 세포막 통과 직후, 세포벽을 통과하기 이전에 folding이 이루어져서 그 후 성숙된 단백으로서 세포벽을 통과하는 것으로 믿어진다.
This study was to establish in uitro culture system of mouse preantral follicles and to obtain higher in vitro development rates and production of live young. Preantral follicles were obtained from 12-day-old FI mouse (C57BL $\times$ CBA) by enzymatical methods. Oocyte-granulosa cell complexes (OGCs) of preantral follicles were loaded on Transwell-COL insert and cultured in $\alpha$MEM supplemented with 5% FBS, 100 mIU/$m\ell$ FSH and 100 mIU/$m\ell$ hMG for IVG. IVM was performed in $\alpha$MEM supplemented 1.5 IU/$m\ell$ hCG for 18 hrs and IVF was carried out in Ml6 medium. Embryos were cultured in modified Ml6 medium supplemented 10% FBS for 4 days. The effect of the OGCs size on the nuclear/cytoplasmic maturation was significantly higher in 120-150 ${\mu}{\textrm}{m}$ (MII: 33.0%, $\geq$2-cell: 36.7%, $\geq$morula: 20.9%) than in 70-110 ${\mu}{\textrm}{m}$ (MII: 12.2%, $\geq$2-cell: 10.2%, $\geq$morula: 4.8%) (p<0.001). In period of the IVG days, the rate of $\geq$2-cell was significantly higher in 10 days(38.2%) than in 12 days (20.0%) (p<0.01). In period of IVF time, 9 hrs ($\geq$2-cell: 31.5%, $\geq$ morula: 14.3%) indicated significantly higher cytoplasmic maturation rate than 4 hrs ($\geq$2-cell: 17.5%, This study was to establish in vitro culture system of mouse preantral follicles and to obtain higher in vitro development rates and production of live young. Preantral follicles were obtained from 12-day-old FI mouse (C57BL $\times$ CBA) by enzymatical methods. Oocyte-granulosa cell complexes (OGCs) of preantral follicles were loaded on Transwell-COL insert and cultured in $\alpha$MEM supplemented with 5% FBS, 100 mIU/$m\ell$ FSH and 100 mIU/$m\ell$ hMG for IVG. IVM was performed in $\alpha$MEM supplemented 1.5 IU/$m\ell$ hCG for 18 hrs and IVF was carried out in Ml6 medium. Embryos were cultured in modified Ml6 medium supplemented 10% FBS for 4 days. The effect of the OGCs size on the nuclear/cytoplasmic maturation was significantly higher in 120-150 ${\mu}{\textrm}{m}$ (MII: 33.0%, $\geq$2-cell: 36.7%, $\geq$morula: 20.9%) than in 70-110 ${\mu}{\textrm}{m}$ (MII: 12.2%, $\geq$2-cell: 10.2%, $\geq$morula: 4.8%) (p<0.001). In period of the IVG days, the rate of $\geq$2-cell was significantly higher in 10 days(38.2%) than in 12 days (20.0%) (p<0.01). In period of IVF time, 9 hrs ($\geq$2-cell: 31.5%, $\geq$ morula: 14.3%) indicated significantly higher cytoplasmic maturation rate than 4 hrs ($\geq$2-cell: 17.5%, $\geq$morula: 4.8%) and 7 hrs ($\geq$2-cell: 20.4%, $\geq$morula: 6.1%) (p<0.01). However, there was no difference in cytoplasmic maturation between co-cultured preantral follicle ( $\geq$morula: 17.4%) and preantral follicle cultured in Ml6 ( $\geq$morula: 17.4%). 22 morula and blastocysts produced in above optimal condition were transferred to uterus of 2 pseudopregnant recipients, 1 recipient was pregnant and then born 1 live young. This result demonstrates that in vitro culture system of preantral follicles can be used efficiently as another method to supply mouse oocyte.morula: 4.8%) and 7 hrs (2-cell: 20.4%, $\geq$morula: 6.1%) (p<0.01). However, there was no difference in cytoplasmic maturation between co-cultured preantral follicle ( $\geq$morula: 17.4%) and preantral follicle cultured in Ml6 ( $\geq$morula: 17.4%). 22 morula and blastocysts produced in above optimal condition were transferred to uterus of 2 pseudopregnant recipients, 1 recipient was pregnant and then born 1 live young. This result demonstrates that in vitro culture system of preantral follicles can be used efficiently as another method to supply mouse oocyte.
성숙하고 정상인 포유류 6종의 동물들을 이용하여 위에 분포하는 비만세포의 형태와, 세포내 과립의 구조적 형태의 종간차이를 비교하고자 전자현미경으로 관찰을 하였다. 저자는 특히 관찰된 세포질내 과립을 편의상 다음과 같이 분류하였다. 1) 동질성 과립 (homogeneous granule, GR1) 2) 미세 입자과립 (particulate granule, GR2) a. 고전자밀도 미세 입자과립 (dark dense particulate granule, GR2-1) b. 중전자밀도 미세 입자과립 (less dense particulate graunle, GR2-2) 3) 망상구조과립 (reticular granule, GR5) a, 고전자말도 망상구조과립(dark dense reticular granule, GR5-1) b. 저전자밀도 망상구조과립(light dense reticular granule, GR5-2) 포유류인 염소, 개, 고양이, 햄스터에서는 대부분 세포질내 소기관중 골지체 및 사립체가 나타났으며 세포질내 과립의 대부분이 전자밀도가 높은 동질성인 것 (GR1)과 미세입자형으로 된 것 (GR2)이 나타났다. 그러나 Guinea pig에서는 망상구조형의 과립들 (GR5-1, GR5-2)이 나타났다. 또한 개와 Guinea pig 에서 과립의 한쪽이 함몰되었거나 반월형인 것이 나타났다. 위 결과로 보아 표유류 각 종 간의 비만세포, 세포내 과립은 형태학적으로 차이가 있음을 알 수 있으며, 이러한 차이는 아마도 종 간의 기능에 따른 과립의 구조적 차이와 구성성분 및 성숙도등과 상관관계가 있는 것으로 추측된다.
Phospholamban은 심근 근장그물 $Ca^{2+}-ATPase$ 조절단백이다. 조절작용기전은 탈인산화된 phospholamban에 의해 $Ca^{2+}-ATPase$가 억제됨으로 나타나며, 이 phospholamban이 인산화됨으로 $Ca^{2+}-ATPase$에 대한 억제가 반전됨을 보인다. 최근에 phospholamban의 cytoplasmic domain만으로 $Ca^{2+}-ATPase$를 억제하기에는 불충분하다는 보고가 있어 본 실험을 계획하였다. $Ca^{2+}-ATPase$의 활성을 억제하는 phospholamban domain을 밝히기 위하여 합성한 phospholamban 펩타이드(아미노산 1-25)의 $Ca^{2+}$ uptake에 대한 효과를 살펴보았다. 골격근 근장그물에서 $Ca^{2+}-ATPase$를 분리한 후 phosphatidylcholine이나 phosphatidylcholine과 phosphatidylserine을 포함한 liposome에 재조합시켰다. Phospholamban 펩타이드는 phosphatidylcholine을 이용하여 재조합된 vesicles의 초기 $Ca^{2+}$ uptake rate를 억제하고, cAMP 의존성 protein kinase의 catalytic subunit로 인산화시킨 phospholamban 펩타이드는 이 억제를 반전시킴을 보여 주었다. Phosphatidylcholine과 phosphatidylserine을 포함한 제조합 vesicles에서도 같은 양상을 보였다. 이상의 결과로 미루어 볼 때 인산화 sites를 포함하고 있는 phospholamban의 cytoplasmic domain은 그 자체만으로도 근장그물 칼슘펌프를 억제하기에 충분하다고 결론지을 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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