• Applied Microscopy
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• 제29권1호
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• pp.105-124
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• 1999

마우스(ICR mouse)의 신경배형성에 따른 뇌 및 척수 신경상피의 조직학적 및 미세구조적 분화를 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 배발생 8일 (embryonic day 8) 마우스배 (mouse embryo)에서 위중층원주상피의 신경판 및 신경고랑이 형성되었고, 배발생 9일에서는 두부의 전단부 및 말단부를 제외한 전 체장에서 신경관이 형성되었으며, 배발생 10일에서는 미아에서 이차신경배형성이 이루어졌다. 배발생 8일 마우스배의 미부 말단부에서는 신경상피와 중간엽과의 경계가 불분명한 원시선이 관찰되었고, 두부에서는 신경상피, 척삭 및 중간엽세포의 구분이 분명하였다. 배발생 9일과 10일 마우스배의 경우, 후뇌 부위에서는 표피 외배엽세포의 결합에 의하여, 척수 부위에서는 신경상피세포의 결합에 의하여 덮개판을 이루어졌고, 바닥판은 높이가 낮은 위중층원주상피세포로 이루어겼다. 배발생 10일 마우스배에서 척수의 운동신경이 처음 분화되었다. 배발생 9일과 10일 마우스배에서 신경상피세포들은 세포소기관의 분화 및 전자밀도의 차이에 따라 암세포, 중간형세포 및 명세포로 구분되었다. 배발생 9일에서는 모든 형의 세포가 관찰되었으나, 배발생 10일에서는 중간형 및 명세포들 만이 관찰되었다. 모든 신경상피세포에서 free ribosome 및 polysome들이 다같이 발달하였으나, 암세포에서는 RER과 lipid droplet들, 중간형세포와 명세포에서는 Golgi체들이 발달하였다. 중간형세포의 세포질돌기에서는 신경미세섬유, 명세포의 세포질들기에서는 신경미세섬유 뿐만 아니라 미세소관들도 다수 관찰되었다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제29권4호
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• pp.339-344
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• 2014

The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR associated protein (Cas9) system can be applied to produce transgenic pigs. Therefore, we applied CRISPR/Cas9 system to generate FoxN1-targeted pig parthenogenetic embryos. Using single guided RNA targeted to pig FoxN1 genes was injected into cytoplasm of in vitro matured oocyte before electrical activation. In results, regardless of the concentrations of vector, the cleavage rate were significantly (p<0.05) decreased ($4ng/{\mu}l$, 51.24%; $8ng/{\mu}l$, 40.88%; and $16ng/{\mu}l$; 45.22%) compared to no injection group (70.44%). The blastocyst formation rates were also decreased in vector injected 3 groups ($4ng/{\mu}l$, 7.96%; $8ng/{\mu}l$, 6.4%; and $16ng/{\mu}l$; 9.04%) compared to no injection group (29.07%). In addition, the blastocyst formation rates between sham injected group (13.51%) and no injection group (29.07%) also showed significant difference (p<0.05). The mutation rates were comparable between groups ($4ng/{\mu}l$, 18.4%; $8ng/{\mu}l$, 12.5%; and $16ng/{\mu}l$; 20.0%). The sequencing analysis showed that blastocysts derived from each group were successfully mutated in FoxN1 loci regardless of the vector concentrations. However, the deletion patterns were higher than the patterns of point mutation and insertion regardless of the vector concentrations. In conclusion, we described that cytoplasmic microinjection of FoxN1-targeted CRISPR/Cas9 vector could efficiently generate transgenic pig parthenogenetic embryos in one-step.

• 한국수정란이식학회지
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• 제32권1호
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• pp.17-24
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• 2017

Ganglioside GD1a is specifically formed by the addition of sialic acid to ganglioside GM1a by ST3 ${\beta}$-galactoside ${\alpha}$-2,3-sialyltransferase 2 (ST3GAL2). Above all, GD1a are known to be related with the functional regulation of several growth factor receptors, including activation and dimerization of epidermal growth factor receptor (EGFR) in tumor cells. The activity of EGF and EGFR is known to be a very important factor for meiotic and cytoplasmic maturation during in vitro maturation (IVM) of mammalian oocytes. However, the role of gangliosides GD1a for EGFR-related signaling pathways in porcine oocyte is not yet clearly understood. Here, we investigated that the effect of ST3GAL2 as synthesizing enzyme GD1a for EGFR activation and phosphorylation during meiotic maturation. To investigate the expression of ST3GAL2 according to the EGF treatment (0, 10 and 50 ng/ml), we observed the patterns of ST3GAL2 genes expression by immunofluorescence staining in denuded oocyte (DO) and cumulus cell-oocyte-complex (COC) during IVM process (22 and 44 h), respectively. Expression levels of ST3GAL2 significantly decreased (p<0.01) in an EGF concentration (10 and 50 ng/ml) dependent manner. And fluorescence expression of ST3GAL2 increased (p<0.01) in the matured COCs for 44 h. Under high EGF concentration (50 ng/ml), ST3GAL2 protein levels was decreased (p<0.01), and their shown opposite expression pattern of phosphorylation-EGFR in COCs of 44 h. Phosphorylation of EGFR significantly increased (p<0.01) in matured COCs treated with GD1a for 44 h. In addition, ST3GAL2 protein levels significantly decreased (p<0.01) in GD1a ($10{\mu}M$) treated COCs without reference to EGF pre-treatment. These results suggest that treatment of exogenous ganglioside GD1a may play an important role such as EGF in EGFR-related activation and phosphorylation in porcine oocyte maturation of in vitro.

• 대한세포병리학회지
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• 제4권1호
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• pp.45-51
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• 1993

말초성 신경아세포종은 예후가 나쁘고 희귀한 종양으로 이 종양의 세침흡인 세포학적 소견에 관한 보고는 세계 문헌상 1988년 Neuhold에 의해 처음 기술된 1례가 있을 따름이다. 최근 저자들은 30세 여자의 우측 상박의 연부조직 종괴로 부터 세침흡인 세포 검사를 시행하여 진단된 말초성 신경아세포종을 경험하여 그 세침흡인 세포학적 소견을 기술하는 바이다. 환자는 1개월전 부터 우측 상박에 서서히 자라는 종괴를 주소로 내원하였다. 우측 상박 X-선 및 초음파 촬영술에서 주위와 잘 경계지어진 방추형의 연부조직 종괴가 관찰되었고 주변조직으로 침윤하는 소견은 관찰할 수 없었으며 상완골은 정상이었다. 종괴의 세침흡인 도말은 세포밀도가 매우 높았고 작고 둥근 세포들이 뭉쳐있거나 산재되어 있었다. 세포간의 크기나 모양의 차이는 아주 미약하였고 유사분열은 거의 관찰되지 않았다. 종양세포들의 집단은 간혹 모세혈관을 중심으로 뭉치거나, 로제트 형태를 보이며 그 세포질은 가늘고 긴 돌기를 보였다. 핵은 뚜렷한 핵막과 미세하게 뭉친 염색질 및 작고 뚜렷한 핵 소체를 갖고 있었다. 이상의 소견은 작고 둥근 세포로 된 악성 종양 중 말초성 신경아세포종에 매우 합당하였으나 골외 Ewing 육종과의 감별은 불가능하였다. 단순 절제술이 시행되었고 종양은 조직학적으로 말초성 신경아세포종임이 확인되었다.

• 대한세포병리학회지
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• 제18권2호
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• pp.143-152
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• 2007

Sono-guided fine needle aspiration (FNA) of the thyroid is widely used, but the aspirated samples are typically not well preserved and low cellularity makes diagnosis difficult in many cases. The object of the current study is to evaluate the adequacy and diagnostic accuracy of the use of $SurePath^{TM}$ liquid-based cytology (SP-LBC) in the sonoguided fine needle aspiration of the thyroid nodule and to compare its use with that of the use of a conventional smear (CS). A total of 172 sono-guided FNAs of thyroid nodules from April to June, 2006 were prepared by the use of the split method with either SP-LBC or CS; the samples were stained with the use of hematoxylin-eosin (H&E) and Papanicolaou (Pap) stains. A cyto-histological correlation was performed in 69 (30 SP and 39 CS) cases that had been histologically confirmed. The rate of producing unsatisfactory slides by the use of the SP-LBC method (9.3%) was less than that of the use of the CS method (20.9%). The diagnostic accuracy of the SP method (93.3%) was better than that of the CS method (85.3%). The sensitivity and specificity of the SP method (94.4% and 92.3%) was better than that of the CS method (83.3% and 70%), respectively (p < 0.05). The CS of sono-guided aspirated specimens had some unavoidable limitations related to inadequate sampling such as a bloody background, low cellularity and an indication that some clinicians smeared many useless slides (averaging four to ten slides), and that most slides showed only blood that included few follicular cells. The SP method resulted in more thinly smeared slides and showed cleaner background and greater cellularity than the use of the CS method. Each follicular cell shows superior nuclear detail, and more distinct cytoplasmic features than with the use of the CS method. SP-LBC appears to be an easy, highly accurate, and reliable cytological method for employ for a diagnostic approach of thyroid disease and thyroid nodules. The SP-LBC method is a suitable alternative to the CS method to overcome diagnostic difficulties.

• Journal of Animal Science and Technology
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• 제46권5호
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• pp.729-734
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• 2004

본 연구는 한우의 mtDNA D-loop 영역 염기 변이가 산유량에 미치는 효과를 검증하기 위하여 수행하였다. 젖소의 mtDNA D-loop 영역에서 단일염기의 치환이 20 개의 지역에서 확인되었다. 그중 8, 169, 16042, 16051, 16057, 16093, 16119, 16122, 16209, 16255, 16302 bp 지역에서 높은 빈도의 염기치환이 검출되었다. 16119bp 지역에서는 T가 C로 치환된 빈도가 0 .138로 검출되었으며, 이 위치에서의 염기치환에 의한 산유량 효과는 -1.61 (p<0.1)로 나타났다. 16185bp 지역에서의 염기치환에 의한 산유량 효과는 3.557(p<0.05)로 나타났으며 G가 A로 치환된 빈도는 0.063로 나타났다. 본 연구에서 검출한 한우 다유계통 집단의 mtDNA내 D- loop 영역의 염기서열 변이 빈도와 유량과의 연관성분석 결과 등은 한우 집단의 유전적 변이성 추정과 좀 더 다양한 경제형질과의 관련성 분석으로 다양한 유전적 지표인자 발굴에 도움 될 것이며 이를 통해 분자유전학적 기법을 이용한 한우의 육종 전략을 확립하논데 기초 자료가 되는 것은 물론 우려나라 고유 품종인 한우의 유전자원 보존과 분자육종학적인 연구에 기초 자료로서 유용하게 활용 할 수 있을 것으로 기대된다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제10권5호
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• pp.273-282
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• 2006

The aim of the present study was to investigate the effects of R-(-)-2,10,11-trihydroxy-N-propylnoraporphine [R-(-)-TNPA], a selective agonist of dopaminergic $D_2$ receptor and S(-)-raclopride, a selective antagonist of dopaminergic $D_2$ receptor, on the secretion of catecholamines (CA) evoked by cholinergic stimulation and membrane-depolarization in the isolated perfused model of the rat adrenal gland, and also to establish its mechanism of action. R-(-)-TNPA $(10{\sim}100\;{\mu}M)$ perfused into an adrenal vein for 60 min produced dose- and time-dependent inhibition in CA secretory responses evoked by ACh (5.32 mM), high $K^+$ (56 mM), DMPP $(100\;{\mu}M)$ and McN-A-343 $(100\;{\mu}M)$. R-(-)-TNPA itself did also fail to affect basal CA output. Also, in adrenal glands loaded with R-(-)-TNPA $(30\;{\mu}M)$, the CA secretory responses evoked by Bay-K-8644 $(10\;{\mu}M)$, an activator of L-type $Ca^2+$ channels and cyclopiazonic acid $(10\;{\mu}M)$, an inhibitor of cytoplasmic $Ca^{2+}-ATPase$ were also inhibited. However, S(-)-raclopride $(1{\sim}10\;{\mu}M)$, given into an adrenal vein for 60 min, enhanced the CA secretory responses evoked by ACh, high $K^+$, DMPP and McN-A-343 only for the first period (4 min), although it alone has weak effect on CA secretion. Moreover, S(-)-raclopride $(3.0\;{\mu}M)$ in to an adrenal vein for 60 min also augmented the CA release evoked by BAY-K-8644 and cyclopiazonic acid only for the first period (4 min). However, after simultaneous perfusion of R-(-)-TNP A $(30\;{\mu}M)$ and S(-)-raclopride $(3.0\;{\mu}M)$, the inhibitory responses of R(-)-TNPA $(30\;{\mu}M)$ on the CA secretion evoked by ACh, high $K^+$, DMPP, McN-A-343, Bay-K-8644, and cyclopiazonic acid were significantly reduced. Taken together, these experimental results suggest that R-(-)-TNPA greatly inhibits the CA secretion from the perfused rat adrenal medulla evoked by cholinergic stimulation (both nicotininc and muscarinic receptors) and membrane depolarization, but S(-)-raclopride rather enhances the CA release by them. It seems that this inhibitory of R-(-)-TNPA may be mediated by stimulation of inhibitory dopaminergic $D_2$ receptors located on the rat adrenomedullary chromaffin cells, while the facilitatory effect of S(-)-raclopride is due to the blockade of dopaminergic $D_2$ receptors, which are relevant to extra- and intracellular calcium mobilization. Therefore, it is thought that dopaminergic $D_2$ receptors may be involved in regulation of CA release in the rat adrenal medulla.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제24권6호
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• pp.555-561
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• 2020

TWIK-related two-pore domain K⁺ channel-2 (TREK-2) has voltage-independent activity and shows additional activation by acidic intracellular pH (pH_i) via neutralizing the E³³² in the cytoplasmic C terminal (Ct). We reported opposite regulations of TREK-2 by phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP₂) via the alkaline K³³⁰ and triple Arg residues (R^355-357); inhibition and activation, respectively. The G³³⁴ between them appeared critical because its mutation (G³³⁴A) endowed hTREK-2 with tonic activity, similar to the mutation of the inhibitory K³³⁰ (K³³⁰A). To further elucidate the role of putative bent conformation at G³³⁴, we compared the dual mutation forms, K³³⁰A/G³³⁴A and G³³⁴A/R^355-7A, showing higher and lower basal activity, respectively. The results suggested that the tonic activity of G³³⁴A owes to a dominant influence from R^355-7. Since there are additional triple Arg residues (R^377-9) distal to R^355-7, we also examined the triple mutant (G³³⁴A/R^355-7A/R^377-9A) that showed tonic inhibition same with G³³⁴A/R^355-7A. Despite the state of tonic inhibition, the activation by acidic pH_i was preserved in both G³³⁴A/R^355-7A and G³³⁴A/R^355-7A/R^377-9A, similar to the R^355-7A. Also, the inhibitory effect of ATP could be commonly demonstrated under the activation by acidic pH_i in R^355-7A, G³³⁴A/R^355-7A, and G³³⁴A/R^355-7A/R^377-9A. These results suggest that the putative bent conformation at G³³⁴ is important to set the tug-of-war between K³³⁰ and R^355-7 in the PIP₂-dependent regulation of TREK-2.

• 한국균학회지
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• 제23권4호통권75호
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• pp.285-297
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• 1995

영지의 균사체를 분획화하여 ${\beta}-glucan$성 다당류인 ganoderan을 분리한 결과, 12%의 균체외성, 13%의 세포질성, 그리고 75%의 세포벽성 분획으로 각각 수획되었다. 각각의 분획들은 추출 부위와는 상관없이 포도당을 가장 많이 포함하고 있었으며, ${\beta}-glucan$의 특정을 지닌 다당류이었다. Ganoderan의 구성당 및 구성 아미노산은 균사체 추출부위에 따라 상이한 비율을 나타내었다. 이들의 생리적 활성을 검색한 결과, 항 보체 활성은 균체외성이며 수용성인 EXO-WS 분획이 38%로 가장 우수하였으며, 세포벽에서 추출한 알칼리 가용성이며 수용성인 CW-AS-WS 분획이 37%를 나타내었다. 항암활성은 CW-AS-WS 분획이 가장 우수하였으며 94%의 종양 억제율을 보였다. CW-AS-WS 는 평균 분자량 20kD로 80% 의 포도당으로 이루어진 ${\beta}-glucan$성 다당류이다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제36권1호
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• pp.7-14
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• 1998

최근 가시아메바 각막염의 치료제로 새롭게 주목을 받고 있는 polyhexamethylene biguanide (PHMB)의 가시아메바에 대한 작용 기전을 알기 위해 각막염 유래 가시아메바 4 분리주에 대한 PHMB의 최저 살충 농도 (minimal cysticidal concentration; MCC)를 결정하고, 이 MCC의 PHMB로 처리한 포낭의 형태학적 변화를 투과전자현미경으로 관찰하였다. PHMB의 8시간과 48시간에 대한 MCC를 결정하였는데, 8시간 MCC는 KA/E1 $14.32{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$. KA/E2 $22.45{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E3 $21.54{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, 및 KA/E4 $23.59{\;} {\mu\textrm{g}}/ml$였다. 48시간 MCC는 KA/El $3.97{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E2 $7.49{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$, KA/E3 $6.40{\;}{\mu\textrm{g}}/ml$ 및 KA/E4 $4.92{\mu\textrm{g}}/ml$로 나타났다. PHMB를 처리한 포낭에서는 포낭 내 amoeb고가 심하게 수축되고 이로 인해 포낭 내벽과 분리되는 형태학적 변화가 관찰되었다. 세포막 아래의 subplasmalemmal lipid droplet의 모양이 불규칙해졌다 심한 경우 세포질이 응집되고. 미토콘드리아의 cristae도 크게 감소하는 등 세포 내 소기관들도 모양이 심하게 변하였다. 포낭 내외벽은 그 형태가 비교적 잘 유지되었다. 이상의 변화들로 볼 때. PHMB는 세포막에 주로 작용하며, 세포 내 소기관들의 막에도 영향을 미치는 것을 알 수 있었다 가시아메바의 세포막의 lipidcomposition은 아직 잘 알려져 있지 않지만 PHMB에 의한 가시아메바 포낭에 대한 살충 효과는 environmental biocide로서 Escherichia col거 세포벽에 있는 acidic prlospholipids에 작용하여 살균 효과를 나타내는 것과 유사한 기전으로 일어날 것으로 사료된다.