CYP1B1 enzyme metabolize PAHs and estradiol. CYP1B1 metabolize estradiol to 4-hydroxyestradiol that is considered as carcinogenic metabolite. Luciferase activity was induced about 20 folds over that control by 1 nM TCDD (2,3,7,8-tetrchlorodibenzo-p-dioxin) and these inductions were dose-dependent. Recent industrialized society, human hasbeen widely been exposed to widespread environmental contaminants such as PAHs (polycyclic aromatic hydrocarbon) that are originated from the incomplete combustion of hydrocarbons. PAHs are known to be ligands of the AhR (aryl hydrocarbon receptor). Induction of cytochrome P4501B1(CYP1B1) in cell culture is widely used as a biomarket for PAHs. Therefore we have studied the effect of PAHs in the human breast cancer cells MCF-7 to evaluate bioactivity of PAHs. Cytochrome P4501B1(CYP1B1) is known to be inducible by xenobiotic compounda such as policyclic aromatic hydrocarbon (PAH) and dioxins such as 2,3,7,8-tetrachloro-dibenzo-p-dioxin(TCDD). And these induction of CYP1B1 is also regulated by many categories of chemicals. In order to investigate the effects of several chemicals on CYP1B1 gene expression in luciferase gene, and then transfected into these cells. After treatment of chemicals, the luciferase activity was measured. We examined effects of PAHs on the CYP1B1-lucifrease reporter gene and CYP1B1 mRNA level. Benzo(k)fluoranthene showed strong response to CYP1B1 promoter activity stimulation, and also CYP1B1 mRNAs increase in MCF-7 cells in a concentration-dependent manner. flvonoids such as genistein decreased B(k)F induced luciferase activity at low concentration. it exhibited stimulatory effect at high concentration.
Cytochrome $b_{5}$($b_{5}$) can be found in a variety of tissues and plays a role in the electron transfer pathways. Several retropseudogenes (numbered as I, II, II, IV, V) have been identified and well investigated for their structures. However, retropseudogene I is not clear in terms of its location on the chromosome. In addition the structure and the exression of retropseudogene V have not been confirmed. To examine the structure of bs retropseudogenes V and to see whether it is expressed in human blood we applied recombinant DNA technologies including polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing. Retropseudogene V turned out to contain open reading frame (ORF) within its structure, however, no evidence of its expression was detected. Retropseudogene I was also found on the chromosome V. This study should contribute to the understanding of the structure of bs gene family.
To reexamine taxonomic status of endemic Mogera wogura coreana from Korea, we first obtained partial 12S rRNA sequences (893 bp) and complete cytochrome b gene sequences (1140 bp) of this subspecies, and these sequences and partial cytochrome b sequences (402 bp) were compared to the corresponding haplotypes of M. wogura from East Asia, obtained from GenBank. The one of three 12S rRNA haplotypes in M. w. coreana was identical to one 12S rRNA haplotype of M. w. robusta from East Asia: 10 complete and 13 partial cytochrome b haplotypes of M. w. coreana formed a single clade with one complete and four partial cytochrome b haplotypes of M. w. robusta, respectively. We considered that M. w. coreana from Korea is an endemic subspecies with only morphological differences, although it is necessary to reexamine the subspecies status of M. w. coreana. Additionally, in the 12S rRNA and complete cytochrome b sequences, M. wogura from Japan was distinct from the two continental subspecies of M. w. coreana and M. w. robusta with average distances of 1.76 and 5.65%, respectively; insular M. wogura, with within-group distances of 2.09 and 4.38%, respectively, was also genetically more divergent than the mainland M. wogura, with within-group distances of 0.08 and 0.57%, respectively. Thus, we considered that insular M. wogura of Japan dispersed into neighboring East Asian continent, which is opposite to the traditional hypothesis on the origin of Japanese M. wogura.
In analyzing the region of the Amycolatopsis mediterranei S699 chromosome responsible for the biosynthesis of the ansamycin antibiotic rifamycin, we identified a gene, designated orj0, which is located immediately upstream of the rifamycin polyketide synthase (PKS). Orj0 encodes a protein, on the basis of sequence-comparative analysis, that is similar to several cytochrome P450 monooxygenases from different sources. The rifamycin producer, A. mediterranei, predominantly produces rifamycin B from its macrocyclic intermediate, proansamycin X, through dehydrogenation and hydroxylation steps. However, an A. mediterranei strain, deleted in orj0 by gene replacement, no longer produced rifamycin B. Furthermore, a versatile replicative vector in A. mediterranei was constructed and rifamycin B production was restored in a complementation experiment of orj0 using this novel vector. These consecutive results verified that the arf0 protein, which is a P450 hydroxylase, is required for the production of rifamycin B in A. mediterranei.
한국산 총알고둥(Littorina brevicula)의 지리적 변이를 조사하기 위하여 동해안, 남해안, 서해안에서 총 11개 집단 106개체를 대상으로 미토콘드리아 DNA cytochrome b 유전자의 염기서열을 분석하였으며, 분석 결과 총 500 bp의 염기서열을 검출하였다 검출된 염기서열을 대상으로 염기치환 유무 및 치환 장소를 비교한 결과 13종류의 haplotype으로 구분되었으며, 그 중 LbA가 주 haplotype으로 나타났다. LbA의 평균 출현빈도는 0.877이었으며, 동해안은 0.82, 남해안 0.70, 서해안 1.00으로 각각 나타나 동해안 집단이 타 집단에 비해 haplotype의 다양성이 더 높았다. 특히 오염지역과 비오염지 역간의 비교에서는 8종류의 haplotype이 구분되었으며, 역시 LbA가 주 haplotype으로 나타났다.
우리나라 망둑어과 어류 중 말뚝망둥어아과에 속하며 형태학적으로 흡사한 짱뚱어 (B. pectinirostris)와 남방짱뚱어(S. gigas)를 대상으로 12S rRNA, 16S rRNA 및 mitochondria cytochrome b 유전자의 염기서열 분석을 통해, 종내 및 종간의 분자유전학적 특성을 파악하고자 하였다. 짱뚱어 종내 개체간 유전적 차이를 밝히기 위해 mitochondria내에 3가지 유전자를 분석한 결과, 순천지역과 군산지역간의 염기서열은 12S rRNA는 총 434 bp (base pair)의 염기서열을 얻었으며 이를 비교 분석한 결과, 순천지역과 군산지역의 집단 간에는 100% 동일한 염기서열을 보였고, 16S rRNA 유전자는 총 484 bp의 염기서열 중 99.6%의 차이로 단지 2 bp가 치환된 것으로 나타났고, mitochondria cytochrome b 유전자의 경우, 444 bp의 염기서열을 얻었으며 두 지역 간 염기서열은 100%의 일치도를 보였다. 한국산 짱뚱어를 대상으로 한 동일한 종내에서 서식지 (서해, 남해)에 따른 유전적 차이나 지리적 거리의 차이가 있을 것으로 예상하였으나 이상의 3가지 유전자를 비교해 본 결과를 종합해 보면, 종내 개체 변이와 지역별 변이는 일어나지 않은 것으로 밝혀졌다. 또한 짱뚱어와 남방짱뚱어 2종간 비교 (inter-species)에서는 순천지역 짱뚱어와 해남지역 남방짱뚱어를 12S rRNA 유전자와 16S rRNA 유전자 및 mitochondria cytochrome b 유전자 염기서열을 비교 분석한 결과, 각각 96.1% (17 bp), 94.0 (29 bp), 그리고 82.9% (76 bp)로 나타나 두 종의 유전학적 차이는 크게 나타났다. 따라서 본 연구에서 나타난 짱뚱어와 남방짱뚱어 두 종간에 3.9~17.1%를 보여 서로 다른 종으로 볼 수 있을 것으로 사료되었다.
캐비어에 대한 수요가 증가하면서 캐비어 종류의 진위여부를 확인 할 수 있는 분석법 마련이 필요해졌다. 본 연구에서는 캐비어 종류을 나누는 철갑상어 종 특이 KASP 마커를 개발하였고 모니터링을 통해 국내 유통중인 불법 캐비어 제품을 확인하고자 하였다. 본 연구에서는 16S ribosomal RNA gene, cytochrome b gene, cytochrome coxidase subunit I gene, cytochrome c oxidase subunit II gene, NADH dehydrogenase subunit 5 gene에서 철갑상어종 특이적인 SNP를 선정하고 이를 표적하는 KASP 마커 11종을 개발하였다. 개발한 KASP 마커를 이용하여 한국의 온라인 마켓에서 유통중인 캐비어 10종을 모니터링 분석한 결과 2개의 제품에서 제품에 표기된 철갑상어 종과 다른 것으로 확인하였으며 두 제품 모두 실제보다 더 비싼 캐비어로 둔갑하여 판매한 것으로 확인되었다. 본 연구를 통해 제작한 KASP 분석방법으로 유통되는 캐비어 종류 분류가 가능하였고 모니터링을 통해 국내 유통되고 있는 불법 캐비어 제품도 확인하였다. 이에 따라 본 연구에서 개발한 SNP기반 KASP 분석법으로 불법 캐비어 제품 유통 근절에 기여 할 수 있을 것으로 기대한다.
Hyun Ick Lee;Dong Eun Yang;Yu Ri Kim;Hyuk Lee;Jung Eun Lee;Suh Yung Yang;Hei Yung Lee
Animal cells and systems
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제3권1호
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pp.89-96
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1999
Nucleotide sequences of a 501 base-pair (bp) fragment in the mitochondrial cytochrome b (cyt b) gene were analyzed for 12 populations of Rana rugosa from Korea and Japan using a polymerase chain reaction (PCR) and direct silver sequencing. Two genetically distinct groups (type-A and type-B) were found in Korea. Type-A was found throughout most of South Korea and type-B was restricted to the mid-southeastern regions (Samchok, Yongdok, Chongsong and Pohang). But in the Tonghae population, both types were found. The level of mitochondrial DNA (mtDNA) sequence differences ranged from 0% to .0.8% among six populations of type-A, and 0 to 1.0% among 4 populations of type-B. However, sequence differences between type-A and type-B ranged from 5.4% to 6.6%, Using Kimura's two-parameter distance, the level of genetic sequence divergence between type-A and type-B was 6.7%. The Japanese R. rugosa was clustered very far from the Korean R. rugosa with 14.7%. In the neighbor-joining and UPGMA tree, all Korean samples were grouped, but subdivided into two types in 99% of the bootstrap iteration.
Partial sequence of the mitochondrial cytochrome b gene was analyzed to investigate genetic variation from 10 geographic populations of Granulilittorina exigua in Korea. The sequence of 282 base pairs was determined by PCR-directed silver sequencing method. The sequences of two species within the genus Littorina reserved in NIH blast search were utilized to determine geographic variations of species referred. The levels of mtDNA sequence differences were 0.00-2.54% within populations and 0.71-4.43% between populations. There were four amino acid differences between representative species of the genera Granulilittorina and Littorina, but no differences within populations of the genus Granulilittorina. The UPGMA and the N-J trees based on Tamura-Nei genetic distance matrix were constructed, which showed that the genus Granulilittorina was divided into three groups such as eastern (even exception for Tokdo population), southern, and western regional populations. The degrees of genetic divergence within populations of each group were p=0.021, p=0.019, and p=0.018, respectively. The divergence between the eastern and southern populations was p=0.032, showing closer relationship than with the western populations (p=0.052). Based on the diverged time estimation, the eastern and southern populations of Granulilittorina exigua in Korea diverged from the western populations about 2.1 MYBP, and the eastern and southern populations diverged from each other about 1.3 MYBP.
한국의 산양 (Naemorhedus caudatus)의 유전정보를 종보전에 활용하기 위하여, 한국의 2개 장소에서 채집한 6마리의 미토콘드리아 cytochrome b 유전자 염기서열(606 bp)의 양상을 조사하였다 상응하는 중국의 산양의 염기서열은 GenBank에서 얻어서 이용하였다. 한국의 산양의 4개 haplotype의 각각과 중국의 산양의 한 haplotype간의 nucleotide Tamura-Nei 거리는 0.0650부터 0.0803 가지의 변이를 보였으며, 산양은 소과 내에서 높은 수준의 염기서열 다양성을 나타냈다 한국의 산양에서, 양구표본의 3개 haplotype간의 거리는 0.0151부터 0.0185로, 양구집단의 유전자 다양성이 낮은 수준으로 감소되었음을 보여준다. 또한 양구의 3개 haplotype의 각각과 삼척의 한 haplotype간의 거리는 0.0343에서 0.0479였다. 지리적 거리의 멀어짐에 따르는 유전자 거리의 증가가 서식처 단절에 의해 야기되었다고 판단됨으로, 한국의 산양의 유전자 다양성의 감소를 막기 위한 여러 가지 보전 대책이 즉각적으로 수행되어야 할 것이다 산양의 분류학적 검토를 위하여 GenBank에 있는 히말라야산양 (N. goral)의 염기서열 (276 bp)도 이용하였으며, 산양은 히말라야산양과 뚜렷한 차이가 없었다. 산양과 히말라야 산양은 동종으로 판단할 수가 있지만, 두 종의 보다 많은 표본을 이용한 후속 연구가 필요하다
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[게시일 2004년 10월 1일]
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