For defining the possibilities of the commercial mass liquid culture of Cordyceps sinensis, the pharmacological activities of mycelia were analyzed. The mycelium of C. sinensis consists of carbohydrate (5.1%) and fat (1.3%), and contains a low content of protein (0.7%) and ash (0.5%), and 92.4% moisture. The molecular sugar ratio of carbohydrate was composed mainly of glucose, mannose (1.0 : 0.9), in addition a small amount of galactose and arabinose (0.2 : 0.1). The cellular materials of mycelia were fractionated into ethylacetate (EA), MeOH (M) and hot-water extract fraction (HW). HW fraction showed the most potent intestinal immune system modulating activity, anti-coagulant activity, and anti-complementary activity, and M fraction had the inhibition activity of radical generation as effective as genistine. These results reveal that the mycelium of liquid cultured C. sinensis showed pharmacological activities and could be used for commercial purpose.
This study investigated the effects of mycelia of Lentinus edodes mushroom-cultured Glycyrrihiza radix(LMG) on cancer cell lines and sarcoma 180(S-180), as well as on human mast cells. In an anti-cancer tests using Hep3B(hepatic cancer cell), MCF-7(breast cancer), and HeLa(uterine cancer) cells, LMG extract exhibited greater anti-proliferation effects than Glycyrrihiza glabra(GG) extract. LMG extract multiplication restraining effects were 60% that of ethanol at 3 mg/mL extract also displayed tumor suppressive effects in mice injected with S-180 cells. The growth-inhibition rates against tumor cells were 56% for LMG and 37% for GG. When LMG was added to human mast cells, the Intensity of RT-PCR products using primers($FC{\varepsilon}RI\;c-kit$) decreased. significantly compared with that of control. These results suggest that Lentinus edodes Mushroom-Cultured Glycyrrhiza glabra has an anti-proliferation effects against cancer cell lines(Hep3B, MCF-7 and HeLa) and S-180 tumors and will be also beneficial in treating allergic reactions.
애기졸각버섯의 균사를 액내 진탕 배양법으로 배양하여 항종양성 성분을 생성시키고 이 성분의 특징을 밝히기위하여 위의 방법으로 배양된 균사체를 증류수로 가온 추출하였으며 그 추출물을 이온 교환수지 및 겔여과크로마토그라피법으로 정제하였다. 이 정제과정에서 분리된 5개의 분획에 대하여 각각 항종양 실험을 시행하였던 바, 그 정제의 정도에 비례하여 항암작용이 증가하였으며, 최종 분획 E를 1회 10mg/kg용량으로 백서에 투여하였을 때 75%의 종양 억제율을 나타내었으며, 다당류 81% 및 단백질 4%를 함유하고 있었다. 이 성분은 백서의 복강내 마크로훼이지의 수를 증가시켰으며 이 성분을 laccaran으로 명명한다.
보다 항암력이 강하고 독성이 적은 항암물질을 얻기 위해, 경기도 수원에서 채집한 애기졸각버섯 Laccaria laccate의 자실체 및 배양균사체로 부터 다당체를 분리하여 그 화학적 조성 및 sarcoma 180에 대한 항암효과를 검토하였다. 이 물질의 구성 성분은 다당류와 단백질이었으며 다당류는 한 종류의 미확인 물질을 포함한 7종의 단당으로 구성되어 있고 단백질은 14종의 아미노산으로 구성되어 있었다. 마우스에 sarcoma 180을 이식한 후 자실체의 단백질-다당류를 1일 20mg과 50mg/kg씩을 각각 투여했을 때 75%와 65%의 높은 저지율을 나타내었으며, 배양균사체에서 추출한 단백질-다당체는 1일 20mg/kg씩 투여시 58%의 항암효과를 나타내었다.
재래식 버섯균사체메주로부터 제조된 재래식 버섯균사체 된장의 항종양성, 항산화성 및 항돌연변이성을 연구하였다. 항종양성 (S-180 세포로 유발한 mouse ascites cancer) 에서는 느타리, 영지, 상황, 신령 버섯균사체 된장이 각각 33, 30, 26, 25% 억제하여 재래식 된장(11%)에 비해 매우 우수한 항종양성을 나타내었다. 버섯균사체 된장은 S. typhimurium TA98에 대한 IQ와 AFB$_1$에 의한 돌연변이성을 각각 39.7~46.1%, 38.0~39.7% 억제하여 대조된장(32.0, 33.2%)에 비해 항돌연변이성이 우수하였다. S. fyphimurium TA 100에 대해서는 IQ와 AFB$_1$의 돌연변이성을 각각 31.9~35.6%, 24.9~30.4% 억제하여 대조된장(27.5, 22.5%)에 비해 항돌연변이성이 좋았다. 항산화성 역시 버섯균사체된장이 대조된장에 비해 효과가 우수하였다 관련 물질로서 $\beta$-D-g1ucan 함량은 버섯균사체된장의 경우 재래식 된장에 비하여 3~8배, 총 Phenol성 화합물과 isoflavone 함량은 느타리버섯균사체된장과 신령버섯균사체가 가장 높았다.
인삼의 천연배지에 상황버섯(Phellinus linteus), 영지버섯(Ganoderma lucidum) 및 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum) 균사체를 접종한 후 10, 20, 30, 40, 50일 동안 배양된 인삼발효물 80% 에탄올 추출물에 대한 항산화활성을 살펴보았다. 총 폴리페놀 함량은 149.63~205.91 mg/g 범위로 영지버섯 균사체 인삼배양물에서 가장 높았다. DPPH법에 의한 항산화활성의 $IC_{50}$값은 1.16~6.48 mg/mL 범위로 노루궁뎅이버섯 균사체 인삼배양물에서 가장 높았고, ABTS에 의한 총 항산화력은 1.37~4.03 mg AA eq/g 범위로 상황버섯 균사체 인삼배양물이 가장 높았다. $\alpha$-Glucosidase 억제활성은 50일 배양된 상황버섯 균사체 인삼배양물에서 92.51%로 가장 높게 나타내었으며, tyrosinase 저해활성은 40일 배양된 영지버섯 균사체 인삼배양물에서 13.21%로 가장 높게 나타났다. 인삼을 균사체로 배양할 경우 40일 정도 배양하면 항산화활성이 증가된 인삼제품을 만들 수 있으리라 생각된다.
Polysaccharides were extracted from mycelia of Phellinus linteus grown under different culture conditions. The in vitro immunostimulating activity was measured by plaque-forming cell (PFC) assay. The activity of the polysaccharides was different from that of mycelia from which was extracted. The number of PFC's ranged from 40 to 600 depending on the media. When P. linteus was cultured on a medium with mannose or starch as a sole carbon source, the fungus produced polysaccharide with the highest activity of 960 PFC. Activity was therefore increased by $50%$ compared with polysaccharide which was extracted from mycelia grown on medium with glucose. pH had little effect on the change in activity. All polysaccharides on media with different pH stimulated about 600 PFC. These results suggest that activity could be increased by polysaccharide modification through changes in physiological conditions.
본 연구는 개발된 밀리타리스 동충하초 균사체를 비육후기 한우에 사료경제적인 한계의 최고점에서 일정기간 급여하여 균사체내에 존재하는 cordycepin이 한우 조직내에 존재하는 지와 혈중 항산화활성의 증가를 확인하기 위하여 수행하였다. 본 연구는 비육후기 거세한우 4두를 공시하여 대조구와 처리구 각각 2두씩 배치하고, 처리구의 균사체 첨가수준은 사료섭취량의 1%로 정하여 80일간 사양하였다. 사양후 도축하여 근육(후지)을 취하여 이들내 cordycepin을 TLC상에서 전개하고, 혈액을 채취하여 혈장내 항산화효소인 GSH-Px활성을 조사하였다. 본 연구에서 얻어진 결과를 살펴보면, 종료체중, 건물섭취량, 중체량은 대조구 및 밀리타리스 동충하초 균사체급여군간에 유의한 차이가 나타나지 않았다. 혈장내 GSH-Px활성은 처리구가 15.70 unit로서 대조구의 9.23 unit보다 높은 항산화도를 나타내었으나, 통계적으로 유의한 차이는 나타나지 않았다. 근육내 cordycepin의 전이는 곡립 밀리타리스 동충하초 균사체 급여군에서 TLC상 band가 확인되었다. 이상의 결과로부터 밀라티리스 동충하초 균사체를 비육후기 거세우에 급여하였을 때 비록 유의성은 나타나지 않았지만, 항산화 기능이 어느 정도 있는 것으로 확인되었고, 처리군의 근육에서 cordycepin이 확인되었다. 따라서, 곡립 밀리타리스 동충하초 균사체를 한우에 급여하면 조직 내의 cordycepin의 전이가 가능한 것으로 사료된다.
To develop potent anitumor polysac-charides from higher hungi of Korea the alcohol precipitated polysaccharides, which were obtained from hot water extracts of shake-cultured mycelia of eight species of basidiomycetes, were subjected to antitumor screening tests, using sarcoma 180 as a tumor cell. When administered i. p, at the dose level of 20mg/kg/day for ten days into the mice which were implanted with $1{times}10^{8}$ cells of sarcoma 180 twenty-four hour before the start of polysaccharide injection, the polysaccharides of Plutcus cervinus ISA-Pc-1004, Pleurotus pulmonarius, Hydnum repandum ISA-Hr-1006, and Laccaria laccata ISA-LI-1008 respectively showed inhibition ratios of 62.0%, 51.7%, 64.8%, and 57.8%. They were selected for further study, while those of Pancillus serotina ISA-Ps-1012, Laccaria amethystina ISA-La 1001, Pholiota adiposa ISA-Pa-1010, and Lepista spISA-Ls-1007 respectively showed inhibition ratios of -9.3%, 25.3%, 27.3% and 33.0%.
A protein-polysaccaride fraction Kp(53.9% polysaccharide, 14.2% protein) was separated from the shake-cultured mycelia of a basidiomycetous fungus, Phellinus linteus, and its antitumor activity against sarcoma 180 in ICR mice was investigated. When administered after the tumor implantation, Kp exerted antitumor activity by inhibiting the growth of the sarcoma 180 solid tumor by 71.5% and increasing the life span of the sarcoma 180 ascitic mice by 51.5% at 100 mg/kg. In pretreatment tests, in which Kp was administered once daily for 9 days before the tumor implantation, Kp inhibited the growth of the solid and ascites form of sarcoma 180, respectively, by 35.4% and by 80.3% at 100 mg/kg. However, Kp showed no in vitro cytotoxic activity against a murine leukemia L1210 and a human gastric tumor SNU.1 upto the concentration of $200\;{\mu}g/ml$. From these results, it is clear that the antitumor activity of Kp is exerted through its immunomodulating activity on the host's immune system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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