To select the sntagonistic bacteria against B. cinerea, isolates were screened from the eggplant leaves and rhizosphere soils in the eggplnat fields in the greenhouse. W1 and P99 isolates were selected by the inhibition of mycelial growth of B. cinerea E12 in vitro test. These isolates, W1 and P99, were identified as Bacillus subtilis and Pseudomonas putida, respectively, by the Bergeys manual and API systems, For the formulation of the antagonistic bacteria, the media for the mass production were prepared with biji(soybean curd residues) or soybean flour. B. subtilis W1 or P. putida P99 was mass cultured in biji broth or soybean flour extrect broth and then soybean flour, corn starch flour, rice glutinous flour and biji flour as high molecular substrates were added. These mixtures were dried, grinded and formulated as brofungicides of wettable powder type. The assess the control effect of biofungicides against the infection of B. cinerea, six types of formulations were assayed at the pot culturing with eggplant in the greenhouse. According to the results, there were no significant differences among the formulation methods. However, P99S or PppB formulated with P. putida P99 showed the highest control values as 90.4% and 96.1%, respectively. Then. BSB or BSD formulated whit B. subtilis W1 were 80.8% and 83.0%, respectively. There afforementioned values were more effective than that of chemical fungicide. Ipro W.P which showed as 72.6%.
Facial hyperpigmentation in women, which is considered to be a serious cosmetic disability and a cause of mental distress, requires proper management. Melanocyte dendricity is a crucial factor affecting epidermal pigmentation. We found that BQ-788, the endothelin-B (ETB) receptor antagonist, blocks the formation of multi-dendricity which is induced by cocultured keratinocytes. Melanocytes in vivo show numerous dendrites which are in close contact with multiple keratinocytes, forming the epidermal-melanin unit. While melanocytes transfer their melanosomes into the neighboring keratinocytes via dendrites, keratinocytes secrete many growth factors and cytokines that influence viability, morphology, and melanin formation of melanocytes. Endothelin-1 (ET-1), prostaglandin E2(PGE2), and leukotriene-C4 (LT-C4) have been suggested as the candidates for increasing dendricity. Other reports suggested that ET-1 has stimulatory effects on proliferation and melanin formation of melanocytes in vitro. In the present study, using type-specific ET receptor antagonists, we observed how the morphology of melanocytes could be modulated in a coculture system. In addition, the roles of ET-1 for morphology and proliferation on melanocytes were evaluated in different culture media. We suggest that ET-1 increases dendricity and proliferation of melanocytes, and that its dendrite-inducing effect and mitogenic effect are regulated independently.
Park, Joong-Hyeop;Park, Ji-Hyun;Choi, Gyung-Ja;Lee, Seon-Woo;Jang, Kyoung-Soo;Choi, Yong-Ho;Cho, Kwang-Yun;Kim, Jin-Cheol
Mycobiology
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제31권3호
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pp.179-182
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2003
A total of 187 endophytic fungi were isolated from 11 plant species, which were collected from 11 locations in Korea. Their antifungal activities were screened in vivo by antifungal bioassays after they were cultured in potato dextrose broth and rice solid media. Antifungal activity against plant pathogenic fungi such as Magnaporthe grisea(rice blast), Corticium sasaki(rice sheath blight), Botrytis cinerea(tomato gray mold), Phytophthora infestans(tomato late blight), Puccinia recondita(wheat leaf rust), and Blumeria graminis f. sp. hordei(barley powdery mildew) was determined in vivo by observing the inhibition of plant disease development. Twenty(11.7%) endophytic fungi fermentation broths were able to control, by more than 90%, at least one of the six plant diseases tested. Among 187 liquid broths, the F0010 strain isolated from Abies holophylla had the most potent disease control activity; it showed control values of more than 90% against five plant diseases, except for tomato late blight. On the other hand, fourteen(7.5%) solid culture extracts exhibited potent disease control values of more than 90% against one of six plant diseases. The screening results of this study strongly suggested that metabolites of plant endophytic fungi could be good potential sources for screening programs of bioactive natural products.
Ha, Doo-Bong;Lee, Chung-Choo;Park, Young-Chul;Lim, Woon-Ki;Yoo, Byoung-Je
한국동물학회지
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제28권3호
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pp.179-193
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1985
鷄胚의 筋原細胞의 증식과 融合에 미치는 계배 抽出液의 영향을 조사하였다. 1. 배양액내의 계배 추출액의 농도가 높을수록 근원세포의 증식은 촉진되었으며, 반면에 근원세포 융합은 지연되었다. 2. 계배 추출액의 단백질을 Sephadex G-75로 分劃하고, 각 분획을 근원세포의 배양액에 첨가한 결과 分子量 40,000과 22,000 dalton 사이의 분획이 근원세포의 증식과 융합을 촉진시켰다. 3. 계배 추출액의 단백질을 ammonium sulfate로 분획시켜 각 분획을 근원세포의 배양액에 첨가한 결과 70% 이상 포화 용액에서 침전하는 분획이 근원세포의 증식과 융합을 현저히 증가시켰다. 이 유효 분획을 Sephadex G-75로 재차 분획하여 각 분획의 효과를 조사한 결과 근원세포의 증식과 융합을 촉진시키는 분획이 계배 추출액을 Sephadex G-75로 분획하여 얻은 유효 분획과 거의 동일한 효과를 나타내었다.
기능성 한천올리고당 생산에 사용할 수 있는 유전자원을 확보하기 위하여 동해안 기장 해수에서 한천분해활성을 보이는 해양유래 세균 SL-12를 분리하였으며 165 rDNA염기서열 분석으로 해양기원의 Glaciecola 속과 가장 유사한 균주임을 확인하였다. SL-12 균주가 생성하는 한천분해효소(agarase)의 최적 pH는 pH 7.0 (20 mM sodium phosphate 완충용액)이고 최적 온도는 $30^{\circ}C$로 나타났다. 분리 된 Glaciecola sp. SL-12 균주가 생산하는 한천분해효소의 분해산물에 대한 TLC 분석결과, 기능성 한천올리고당을 생산하는 ${\beta}$-agarase로 판명되어 산업적 활용 가능성이 높은 것으로 기대된다.
포항 호미곶 해수에서 한천분해활성을 보이는 해양성 세균 SL-5을 분리하였으며 16S rDNA 염기서열분석으로 해양기원의 Thalassomonas 속과 가장 유사한 균주임을 확인하였다. SL-5 균주가 생성하는 한천분해효소(agarase)는 성장의존성인 것으로 확인되었고 효소활성을 위한 최적 pH는 pH 7.0(20 mM sodium phosphate 완충용액)이고 최적 온도는 $40^{\circ}C$로 나타났다. 한천분해효소는 $80^{\circ}C$까지 65%의 효소활성을 보이는 호열성 효소이지만, 내열성은 그리 높지 않았다. 한천 분해효소의 분해산물에 대한 TLC 분석결과, 본 효소가 $\beta-agarase$라는 사실을 확인할 수 있었다. 분리한 Thalassomonas sp. SL-5 균주가 생산하는 한천분해효소를 이용하여 한천으로부터 다양한 기능성 한천올리고당을 생산하는데 있어 유용하게 사용될 것으로 기대된다.
Monascus anka albidus 균사를 쌀가루 7%, $NH_4NO_3$ 0.15%, $KH_2PO_4$ 0.05% 및 $MnSO_4$ 0.1%, 조성의 초기 pH 6.0으로 조절한 배지에 접종하여 $30^{\circ}C$에서 5일간 진탕 배양 하였을 때 가장 높은 색소 생산을 보였다. 특히 탄소원으로써 찹쌀가루가 제일 좋았으며 동시에 질소원으로써 $NH_4NO_3$, 인산염으로는 $KH_2PO_4$가 가장 우수하였으며 최적 C : N율은 18 : 1로 나타났다. 상기 조건에서 색소 생산은 플라스크에서 2.6mg/ml을, 그러나 5l 발효조에서 약 70%인 1.8mg/ml을 생산하였다.
Lee Bang-Yong;Han Sang-Yong;Choi Han Gil;Kim Jee Hyun;Han Kap-Hoon;Han Dong-Min
Journal of Microbiology
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제43권6호
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pp.523-528
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2005
Using the genomic library constructed at the downstream of the niiA promoter, which induces the over-expression of an inserted DNA fragment, we have attempted to screen the genes affecting growth or development by over-expression. The wild-type strain was transformed using the AMA-niiA(p) library and cultured on 1.2 M sorbitol media, in which asexual sporulation is induced, but sexual development is repressed. Over 100,000 strains transformed to $pyrG^+$ were analyzed with regard to any changes in phenotype. Consequently, seven strains were isolated for further analyses. These strains were designated NOT [niiA(p) over-expression transformants] stains. Four of the strains were of the inducible type, and the remaining strains were of the multi-copy suppression type. Two of the inducible-type strains, NOT 1 and NOT40, harbored genes which had been inserted in reverse direction, suggesting that the mutant phenotypes had been derived from an excess amount of anti-sense mRNA. Domain analyses of the deduced polypeptides from the DNA fragments rescued from the transformants revealed that NOT1, NOT40 and NOT6 harbored a LisH motif, a forkhead domain, and a $Zn(II)_2Cys_6$ binuclear zinc cluster, respectively.
In the post-genome period, the technique for identifying gene expression has been progressed to high throughput screening. In the field of molecular nutrition, the use of screening techniques to clarify molecular function of specific nutrients would be very advantageous. In this study, we have evaluated Zn-regulated gene expression in Zn-deficient, homocystein-treated EA.hy926 cells, using cDNA microarray, which can be used to screen the expression of many genes simultaneously. The information obtained can be used for preliminary assessment of molecular and signaling events modulated by Zn under pro-atherogenic conditions. EA.hy926 cells derived from human umbilical vein endothelial cells were cultured in Zn-adequate (control, 15 $\mu$M Zn) or Zn-deficient (experimental, 0 $\mu$M Zn) Dulbecco's MEM media under high homocysteine level (100 $\mu$M) for 3 days of post-confluency. Cells were harvested and RNA was extracted. Total RNA was reverse-transcribed and the synthesized cDNA was labeled with Cy3 or Cy5. Fluorescent labeled cDNA probe was applied to microarray slides for hybridization, and the slide was then scanned using a fluorescence scanner. The expression of seven genes was found to be significantly decreased, and one significantly increased, in response to treatment of EA.hy926 cells with Zn-deficient medium, compared with Zn-supplemented medium. The upregulated genes were oncogenes and tumor suppressor genes, cell cycle-related genes and transporter genes. The down-regulated gene was RelB, a component of the NF-kappaB complex of transcription factors. The results of this study imply the effectiveness of cDNA microarray for expression profiling of a singly nutrient deficiency, namely Zn. Furthur study, using tailored-cDNA array and vascular endothelial cell lines, would be beneficial to clarify the molecular function of Zn in atherosclerosis, more in detail.
Objectives : The author intended to investigate Seonbangpaedoktang (SBPT) significantly affect in vivo and in vitro mucin secretion from airway epithelial cells. Methods : In vivo experiment, the author induced hypersecretion of airway mucin, hyperplasia of tracheal goblet cells and the increase in intraepithelial mucosubstances. Effects of orally-administered SBPT during 1 week on in vivo mucin secretion and hyperplasia of tracheal goblet cells were assessed. For in vitro experiment, confluent hamster tracheal surface epithelial (HTSE) cells were metabolically radiolabeled and chased in the presence of SBPT to assess the effect of the agent on 3H-mucin secretion. Total elution profiles of control spent media and treatment sample through Sepharose CL-4B column were analysed. Possible cytotoxicity of the agent was assessed by measuring LDH release. Also, the effect of SBPT on contractility of isolated tracheal smooth muscle was investigated. Results : SBPT inhibited hypersecretion of in vivo mucin and inhibited the increase of number of goblet cells ; SBPT did not affect in vitro mucin secretion and the secretion of the other releasable glycoproteins with less molecular weight than mucin from cultured HTSE cells, without significant effect on LDH release; SBPT did not affect Ach-induced contraction of isolated tracheal smooth muscle. Conclusions : SBPT can inihibit hypersecretion of in vivo mucin and the author suggest that the effect SBPT with their components should investigate further.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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