In order to clarify one of the biological functions of pork, we investigated whether a peptic hydrolysate of denatured porcine crude myosin showed inhibitory activity against angiotensin I-converting enzyme (ACE), which contributed to hypertension. Our results indicated that this hydrolysate showed relatively strong activity, and we therefore attempted to separate the involved peptides, which were considered to be active substances. To isolate these active peptides, the hydrolysate was separated using a solidphase separation, gel filtration high-performance liquid chromatography (HPLC), and two kinds of reverse phase HPLC. In each stage of separation, many fractions were detected, almost all of which showed ACE inhibitory activity. Thus, we suggested that the activity of the hydrolysate as a whole was a result of the activities of the many individual peptides. Six peaks were distinguished, with yields from 34 to 596 ppm of original crude myosin. In addition to the six peaks, many other active fractions were found throughout the separation steps, strongly suggesting that whole porcine crude myosin itself had ACE inhibitory activity. Moreover, pork as food was considered to function as an ACE inhibitory material in vivo, because pork proteins consist primarily of crude myosin, which included almost all the myofibrillar structural proteins.
This study was prepared to observe some enzyme activities in the liver of mice treated with extracts of Ginseng anticancer compound, separated from the petroleum ether extracts by silicic acid chromatography, has the cytotoxic activity against cancer cells. Swiss mice, 72 heads were used (or this experiment and they were divdied into control, test group I and test group If, that test group I was injected crude extract and test group II was injected anticancer compound, while the control group was injected 0.9% NaCl solution. The injections were carried out 1,2,4 and 8 times once a day for 1-8 day, respectively. The liver was removed carefully from the mice at 24 hours after drugs injected, and homogenized at 4$^{\circ}C$ for enzyme study. The activities of glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase(GPT) were determined by Reitmen and Frankel method and lactic acid dehydrogenase activity was determined by Wroblewski methods in vitro. The results obtained are summarized as follows; 1. The GOT activity was increased 26%, crude extract and 16%, anticancer compound than those of control at 1st injected groups and decreased gradually according to increase of injection time, at 8th injected groups, the GOT activity was decresed by 16%, crude extract and 12%, anticancer compound. 2. The GPT activity was not changed significantly at 1st and 2nd injected groups, but, at 4th injected groups, the GPT activity was decreased 20%, crude extract and 14%, anticancer compound. While the GPT activity was recovered to normal value at 8th injected groups. 3. At 1st injected groups, the LDH activity was increased 17%, anticancer compound, while those of crude extract was shown normal value. At 2nd injected groups, the LDH activity increased 35yo:, crude extract while those of anticancer compound was showed normal value. And the LOH activity was recovered gradually at 4th and 8th injected groups.
This experiment was conducted to measure nutrient digestibility and performance in broiler chicks fed diets based on normal and low viscosity rye or barley fed with and without enzyme (pentosanase and $\beta$-glucanase) during a 17 day growth trial. A total of 150 one-day old, male broiler chicks (5 birds per pen and 5 pens per treatment) were randomly assigned to one of six dietary treatments in a $3{\times}3$ factorial design experiment (3 cereals${\times}$2 enzyme levels). Digestibility coefficients were determined using chromic oxide. Digestibility coefficients for dry matter and crude protein were significantly (p=0.0001) higher for the barley-based diets than for any of the rye-based diets. Digestibility coefficients for gross energy did not differ (p>0.05) due to cereal grain. There were no differences in the digestibility coefficients for dry matter and gross energy between chicks fed normal and low viscosity rye. However, the digestibility coefficient for crude protein was higher (p=0.01) for the low viscosity rye compared with the normal viscosity rye. Addition of enzyme to the diet significantly (p=0.0001) increased digestibility coefficients for dry matter, crude protein and energy. There were no significant differences in weight gain, feed intake or feed conversion between birds fed barley or rye or between birds fed normal or low viscosity rye. Enzyme supplementation significantly improved (p=0.0001) weight gain, intake and feed conversion. The overall results of this experiment indicate that unsupplemented barley and rye do not support adequate growth rates in poultry. Enzyme supplementation dramatically improved broiler performance. In addition, genetic selection to reduce the viscosity of rye had only a modest effect on the nutritive value of rye for broilers.
This study was conducted to evaluate the yield of bio-ethanol produced by separate hydrolysis and fermentation (SHF) with the pretreated rapeseed straw (RS) using crude enzyme of Cellulomonas flavigena and Saccharomyces cereviase. Crude enzyme of C. flavigena showed enzymatic activity of 14.02 U/mL for CMC 133.40 U/mL, for xylan 15.21 U/mL, for locust gum and 15.73 U/mL for rapeseed straw at pH 5.0 and $40^{\circ}C$, respectively. The hemicellulose contents of RS was estimated to compromise 36.62% of glucan, 43.20% of XMG (xylan + mannan + galactan), and 2.73% of arabinan by HPLC analysis. The recovering ratio of rapeseed straw were investigated to remain only glucan 75.2% after 1% $H_2SO_4$ pretreatment, glucan 45.44% and XMG 32.13% after NaOH, glucan 44.75% and XMG 5.47% after $NH_4OH$, and glucan 41.29% and XMG 41.04% after hot water. Glucan in the pretreatments of RS was saccharified to glucose of 45.42 - 64.81% by crude enzyme of C. flavigena while XMG was made into to xylose + mannose + galactose of 58.46 - 78.59%. Moreover, about 52.88 - 58.06 % of bio-ethanol were obtained from four kinds of saccharified solutions by SHF using S. cerevisiae. Furthermore, NaOH pretreatment was determined to show the highest mass balance, in which 21.22 g of bio-ethanol was produced from 100 g of RS. Conclusively, the utilization of NaOH pretreatment and crude enzyme of Cellulomonas flavigena was estimated to be the best efficient saccharification process for the production of bio-ethanol with rapeseed straw by SHF.
Kim, Min-A;Lee, Han-Saem;Chon, So-Hyun;Park, Jeong-Eun;Lim, Yu-Mi;Kim, Eun-Jeong;Son, Eun-Kyung;Kim, Sang-Jun;So, Jai-Hyun
Journal of Applied Biological Chemistry
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제62권1호
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pp.39-50
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2019
Mitogen-activated protein (MAP) kinases play an important role in cell growth and differentiation, as well as the modulation of proinflammatory cytokines. The objective of this study was to examine the increase in the anti-inflammatory effect of Gentiana scabra Bunge (GSB), due to bioconversion with the Aspergillus kawachii crude enzyme, via inhibition of the $NF-{\kappa}B$ signaling and MAP kinase pathways in RAW 264.7 cells. The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells treated with the GSB ethyl acetate fraction bioconverted with A. kawachii crude enzyme (GE-BA), was dramatically suppressed as compared to GSB ethyl acetate fraction non-bioconverted with the A. kawachii crude enzyme (GE-UA). The phosphorylation of p38, extracellular signal-regulated kinases, and inhibitory ${\kappa}B$ in RAW 264.7 cells treated with GE-BA was further suppressed, as compared to exposure to GE-UA. Moreover, the mRNA expression of interleukin 6, interleukin 1-beta, and tumor necrosis $factor-{\alpha}$ was further suppressed by GE-BA, compared to GE-UA. Similarly, anti-oxidant activities, such as 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl hydrate and 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) radical scavenging activity, of GE-BA were further increased compared to GE-UA. These observations demonstrate that the anti-oxidant and anti-inflammatory activities of GSB ethyl acetate fraction increases as a result from bioconversion with the A. kawachii crude enzyme.
This study investigated the physicochemical properties and palatability-enhancing effects of the alcohol precipitate, in the enzymatic extracts of Sargassum confusum C. Agardh (SC), obsained using the crude enzyme of Shewanella oneidensis PKA 1008. We analyzed the oligosaccharides recovered from the alcohol precipitate using a thin-layer chromatography for SC-degrading extracts, pH, color, reducing sugar, and viscosity. Thin-layer chromatography showed that after treating with the crude enzyme for 60 h, the polysaccharides were degraded into tetramers, dimers, and trimers and pH increased in the alcohol precipitate (EtOH Sedi). In terms of color, the redness and yellowness of alcohol precipitate/supernatant (EtOH Sedi+Super) and the brightness of EtOH Sedi were the highest among enzyme treated for 0 h and 60 h, EtOH Sedi, and EtOH Sedi+Super. In the reducing sugar analysis, EtOH Sedi showed the lowest value of 13.63 ㎍/mL, and the lowest viscosity of 1.13. In terms of the sensory evaluation, EtOH Sedi+Super showed the highest value with respect to the overall preference. These results suggest that the crude enzyme of S. oneidensis PKA 1008 is effective at degrading polysaccharides, and its recovery increases the palatability of the alcohol precipitate.
양조용 발효제 비율을 달리한 현미 술덧을 정치배양하여 현미식초를 제조하여 품질특성을 조사하였다. 그 결과, 발효과정에서 알코올 함량은 (B) 9.1%, (C) 8.8%, (D) 8.6%, (E) 8.5%로 조효소제 비율이 높을수록 감소하였고 (A)는 7.7%로 가장 낮게 나타났다. 또한 적정산도는 모든 구간에서 0.7% 정도로 나타났다. 정치배양 현미식초의 최종 적정산도는 (BV)가 약 5.2%로 가장 높게 나타났다. 초기 pH는 3.6~4.0으로 나타났고 발효가 진행됨에 따라 꾸준히 감소 하였으며, 발효 15일 이후에는 거의 변화가 없었다. 유기산 함량 변화를 조사한 결과, acetic acid는 모든 첨가구에서 비슷한 함량을 나타내었고, 기타 유기산들은 단일 첨가구(AV, EV)보다 혼합 첨가구(BV, CV, DV)에서 더 높게 나타났다. 따라서 누룩 단일 첨가구에 비하여 누룩 및 조효소제 혼합 첨가구의 알코올 발효능 및 식초의 품질이 더 우수한 것으로 나타났다. 향후, 숙성과정에서 변화를 거치면서 향기성분, 관능적 특성에 차이가 있을 것으로 예상되어 다양한 식초의 품질인자에 관한 연구가 요구된다.
감초의 에틸아세테이트 분획 중 flavonoid 지표물질인 liquiritin이 들어있는 분획 (GUE6)에 살구 및 복숭아 종자로부터 얻은 조효소액 (PDE, PAE, PPE)을 법제 처리하였다. 각 조효소액에서 ${\beta}-glucosidase$ 활성도는 아몬드 (P. dulcis) 259.6 U/g 살구 (P. persica), 복숭아 (P. persica) 조효소액의 ${\beta}-glucosidase$ 활성도가 가장 높게 관찰되었다. PDE, PAE, PPE를 이용한 발효 법제 후 liquiritigenin의 함량 비교 결과, 효소중의 ${\beta}-glucosidase$에 의해 liquiritin이 대사되어 항산화, 향군, 세포 독성 억제, 항치매, 항피부암 등 많은 약리효능을 가진 활성 물질인 liquiritigenin이 생산됨이 확인되었으며, 세효수 모두 liquiritin에 1.2배의 효소 처리 시 가장 대사가 활발한 것으로 나타나 변환을 위한 최적 농도로 결정되었다 세효소 중 특히 PPE 처리 시 liquiritin이 모두 liquiritigenin으로 변환됨으로써 liquiritin의 변환에 복숭아 종자 유래 효소가 가장 효율적인 것으로 밝혀졌다.
The aklavinone 11-hydroxylase which was overexpressed using T7 promoter in E. coli could be detected in SDS-PAGE only in insoluble precipitate without any detectable enzyme activity. The insoluble enzyme was solubilized in 6M guanidine$.$HCl solution and their refolding ability was tested under various conditions. When the enzymatic activity was checked by the bioconversion experiment, stepwise dialysis against 6M, 3M, 1M guanidine$.$HCl and finally 100 mM potassium phosphate buffer of the solubilized protein gave the best bioconversion efficiency. The aklavinone 11-hydroxylase showed its enzymatic activity in the reaction buffer containing NADPH with vigorous shaking. The enzymatic activity was lost during partial purification and regained by the addition of crude extract of S. lividans in the reaction mixture. This effect was confirmed to due to some low-molecular weight component(s) in the crude extract, because the addition of dialyzed crude extract could not recover the enzymatic activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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