Purpose: Laser treatment has become a popular method in implant dentistry, and lasers have been used for the decontamination of implant surfaces when treating peri-implantitis. This study was performed to evaluate the effects of an Erbium-doped:Yttrium-Aluminum-Garnet (Er:YAG) laser with different settings on machined (MA), sand-blasted and acid-etched (SA), and resorbable blast media (RBM) titanium surfaces using scanning electron microscopy and confocal microscopy. Materials and Methods: Four MA, four SA, and four RBM discs were either irradiated at 40 mJ/20 Hz, 90 mJ/20 Hz, or 40 mJ/25 Hz for 2 minutes. The specimens were evaluated with scanning electron microscopy and confocal microscopy. Result: The untreated MA surface demonstrated uniform roughness with circumferential machining marks, and depressions were observed after laser treatment. The untreated SA surface demonstrated a rough surface with sharp spikes and deep pits, and the laser produced noticeable changes on the SA titanium surfaces with melting and fusion. The untreated RBM surface demonstrated a rough surface with irregular indentation, and treatment with the laser produced changes on the RBM titanium surfaces. The Er:YAG laser produced significant changes on the roughness parameters, including arithmetic mean height of the surface (Sa) and maximum height of the surface (Sz), of the MA and SA surfaces. However, the Er:YAG laser did not produce notable changes on the roughness parameters, such as Sa and Sz, of the RBM surfaces. Conclusion: This study evaluated the effects of an Er:YAG laser on MA, SA, and RBM titanium discs using confocal microscopy and scanning electron microscopy. Treatment with the laser produced significant changes in the roughness of MA and SA surfaces, but the roughness parameters of the RBM discs were not significantly changed. Further research is needed to evaluate the efficiency of the Er:YAG laser in removing the contaminants, adhering bacteria, and the effects of treatment on cellular attachment, proliferation, and differentiation.
공초점 현미경(confocal microscopy) 기술의 적용은 살아있는 세포를 고배율로 관찰하는 것을 가능하게 하였다. 알츠하이머나 파킨슨 질환 같은 퇴행성 뇌질환의 경우 뇌세포의 수상돌기의 형태학적 변화가 연관되어 있음이 알려져 있다. 따라서 공초점 현미경 영상으로부터 이러한 정보를 추출하는 방법에 대한 연구가 필요하다. 그러나 공초점 현미경 영상은 명암도 분포가 고르지 않고, 구조의 경계 부분의 번짐 현상 등으로 인해 구조 추출에 어려움을 겪고 있는 실정이다. 따라서 이러한 문제를 극복하고 관심 구조에 대한 특성을 추출할 수 있는 영상처리 기법이 필요하다. 본 논문에서는 뇌세포의 수상돌기 공초점 현미경 사진으로부터 구조정보를 추출하는 새로운 방법을 제안한다. 첫째, 미세 분기 구조의 경계를 향상시키는 비선형 확산 필터링을 적용한다. 둘째, 관심구조를 반복적 역치 선택 방법을 이용해 분할한다. 셋째, 분할된 구조의 분석을 위해 구조의 중심축과 경계선을 추출하기 위한 패스트 마칭 방법(Fast Marching Method)에 기반을 둔 골격화를 수행한다. 본 논문에서 제안된 방법은 기존의 방법들과는 달리 주변 잡음에 덜 민감하였으며 거친 경계선에 영향을 훨씬 적게 받음으로써 보다 정확하고 사실적인 중심축 추출 결과를 보였다.
Confocal laser scanning microscopy (CLSM) was used to examine archaeoparasitological specimens from coprolites associated with La Cueva de los Muertos Chiquitos (CMC) located near present-day Durango, Mexico. The eggs for 4 different types of parasites recovered from CMC coprolites were imaged using CLSM to assist with identification efforts. While some of the parasite eggs recovered from CMC coprolites were readily identified using standard light microscopy (LM), CLSM provided useful data for more challenging identifications by highlighting subtle morphological features and enhancing visualization of parasite egg anatomy. While other advanced microscopy techniques, such as scanning electron microscopy (SEM), may also detect cryptic identifying characters, CLSM is less destructive to the specimens. Utilizing CLSM allows for subsequent examinations, such as molecular analyses, that cannot be performed following SEM sample preparation and imaging. Furthermore, CLSM detects intrinsic autofluorescence molecules, making improved identification independent of resource and time-intensive protocols. These aspects of CLSM make it an excellent method for assisting in taxonomic identification and for acquiring more detailed images of archaeoparasitological specimens.
Intracellular trafficking of transferrin-conjugated dimethyldioctadecyl-ammonium bromide liposome $(T_f-liposome)/DNA$ complexes in HeLa cells was studied using the double-labeled fluorescence technique and confocal microscopy. The size of the $T_f-liposome/DNA$ complex was about 367 nm in diameter and the zeta-potential of it at a 5:1 (w/w) ratio was almost neutral. The intracellular pathway of the $T_f-liposome/DNA$ complex, noted as green (FITC), red (rhodamine) or yellow (FITC + rhodamine) fluorescence, was elucidated from the plasma membrane to the endosome (or lysosome), and finally to the nucleus. The results of this study indicate that plasmid DNA enters into the nucleus not only as a free form but as an associated form complexed with $T_f-liposome$. More interestingly, the $T_f-liposome$ undergoes a nuclear location in the form of ordered structures. This could be a very useful piece of information in designing a safe and advanced gene delivery system.
Confocal scanning microscopy is a widely used technique for three dimensional measurements because it is characterized by high resolution, high SNR and depth discrimination. Generally an image is generated by moving one optical probe that satisfies the confocal condition on the specimen. Measurement speed is limited by movement speed of the optical probe; scanning speed. To improve measurement speed we increase the number of optical probes. Specimen region to scan is divided by optical probes. Multi-point information each optical probe points to can be obtained simultaneously. Therefore image acquisition speed is increased in proportion to the number of optical probes. And multiple optical probes from red, green and blue laser sources can be used for color imaging and image quality, i.e., contrast, is improved by adding color information by this way. To conclude, this technique contributes to the improvement of measurement speed and image quality.
New real-time confocal microscopy using spectral encoding technique and slit confocal aperture is proposed and designed. Spectral encoding technique, which encodes one-dimensional spatial information of a specimen in wavelength, and slit aperture make it possible to obtain two-dimensional lateral image of the specimen simultaneously at standard video rates without expensive scanning units such as polygon mirrors and galvano mirrors. The working principle and the configuration of the system are explained. The variation in axial responses for the simplified model of the system with normalized slit width is numerically analyzed based on the wave optics theory. Slit width that directly affects the depth discrimination of the system is determined by a compromise between axial resolution and signal intensity from the simulation result. On the assumption of the lateral sampling resolution of 50 nm, design variables and governing equations of the system are derived. The system is designed to have the mapping error less than the half pixel size, to be diffraction-limited and to have the maximum illumination efficiency. The designed system has the FOV of $12.8um{\times}9.6um$, the theoretical axial FWHM of 1.1 um and the lateral magnification of-367.8.
최근 새로 개발된 DIFOTI(Digital Imaging Fiber-Optic Transillumination) 시스템의 초기 법랑질 우식증 진단 능력을 평가하고 임상 적용의 가능성을 타진해 보고자 본 연구를 시행하였다. 임상 연구는 유치 탈락 시기에 근접한 학령기 아동 23명을 대상으로 DIFOTI 이미지 촬영을 시행하고 자연 탈락된 유치 20개를 수거하여 CLSM 촬영 결과를 바탕으로 민감도(sensitivity)와 특이도(specificity)를 산출하였으며 실험실 연구에서는 수거된 40개의 유치를 대상으로 Carbopol 인공 우식 용액으로 1, 2, 4 그리고 8일간 탈회시킨 후 각각 방사선 사진, DIFOTI 이미지 그리고 CLSM와 비교 분석하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 구내에서 촬영한 DIFOTI 이미지의 민감도는 0.61이었고, 특이도는 0.63이었다. 2. 실험실에서 인공 탈회시킨 유치의 협설면 초기 우식증에 대한 DIFOTI 이미지의 민감도는 0.71였고, 특이도는 0.75였다.
Lee SeungWoo;Kang DongKyun;Yoo HongKi;Kim TaeJoong;Gweon Dae-Gab;Lee Suk-Won;Kim Kwang-Soo
Journal of the Optical Society of Korea
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제9권1호
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pp.26-31
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2005
We describe the design and the implementation of video-rate reflection confocal scanning microscopy (CSM) using an acousto-optical deflector (AOD) for the fast horizontal scan and a galvanometer mirror (GM) for the slow vertical scan. Design parameters of the optical system are determined for optimal resolution and contrast. The OSLO simulations show that the performances of CSM are not changed with deflection angle and the wavefront errors of the system are less than 0.012λ. To evaluate the performances of designed CSM, we do a series of tests, measuring lateral and axial resolution, real time image acquisition. Due to a higher axial resolution compared with conventional microscopy, CSM can detect the surface of sub-micrometer features. We detect 138㎚ line shape pattern with a video-rate (30 frm/sec). And 10㎚ axial resolution is archived. The lateral resolution of the topographic images will be further enhanced by differential confocal microscopy (DCM) method and computational algorithms.
Kim, Wi-Han;Kim, Chan-Il;Lee, Sang-Won;Lim, Soo-Hee;Park, Cheol-Woo;Lee, Ho;Park, Min-Kyu
Journal of the Optical Society of Korea
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제14권1호
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pp.42-48
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2010
We used video-rate Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM) to observe the motion of blood cells in a micro-channel. Video-rate CLSM allowed us to acquire images at the rate of 30 frames per second. The acquired images were used to perform Particle Image Velocimetry (PIV), thus providing the velocity profile of the blood in a micro-channel. While previous confocal microscopy-assisted PIV required exogenous micro/nano particles as the tracing particles, we employed blood cells as tracing particles for the CLSM in the reflection mode, which uses light back-scattered from the sample. The blood flow at various depths of the micro-channel was observed by adjusting the image plane of the microscope. The velocity profile at different depths of the channel was measured. The confocal micro-PIV technique used in the study was able to measure blood velocity up to a few hundreds ${\mu}m/sec$, equivalent to the blood velocity in the capillaries of a live animal. It is expected that the technique presented can be applied for in vivo blood flow measurement in the capillaries of live animals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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