• 한국식품과학회지
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• 제32권3호
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• pp.538-543
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• 2000

가열 처리된 우육, 돈육, 계육, 양육과 염소육과의 종판별을 위한 효소면역측정법(ELISA)을 확립하기 위하여 염소육을 $98^{\circ}C$에서 15분간 열처리해서 추출액을 분리하였다. 열에 안정한 주요 단백질(TS)은 분자량이 36과 38kDa이었고 두 분자량대의 단백질의 pI값은 4.5로 확인되었으며 면역원으로 사용하기 위해 이온교환 (DEAE-Sephadex A-50)과 겔 여과(Sephadex G-75) 크로마토그래피로 정제하였다. 분리, 정제된 TS단백질을 토끼에 면역하여 염소육에 대해 특이성을 갖는 항체를 생산하고 항TS 항체를 이용하여 간접경합 ELISA를 확립하였다. 항TS 항체는 가열 처리된 계육, 우육, 돈육, 양육과는 반응성이 전혀 없었고 동일하게 처리된 염소육과 지표단백질인 TS에만 반응성을 보였다. 따라서, 본 연구에서 확립한 간접경합 효소면역측정법은 가열 처리된 육류 중 염소육 판별에 웅용 가능함을 시사하였다.

• 한국축산식품학회지
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• 제30권1호
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• pp.36-41
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• 2010

The Hen's egg is widely used in many processed foods as an ingredient and is one of the most prevalent food allergens in children. To detect egg proteins in processed foods, we developed a competitive indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ciELISA) using an anti-ovomucoid (OM) antibody, which was produced by immunization of rabbits with OM, the most heat-stable component of the egg proteins. The detection limit of this quantitative assay system was 30 ng/mL. Cross-reactivity of the anti-OM antibody toward OM, ovalbumin, skim milk, casein, whey protein isolate, and isolated soy protein was 100, 0.4, 0.2, 0.04, 0, and 0%, respectively. In the spike test of egg white powder in milk replacer, commercial sausage, and in-house sausage, the assay recoveries ($mean{\pm}SD$) were $129{\pm}13.7%$, $73.9{\pm}12.5%$, and $65.5{\pm}13.6%$, respectively. When egg white in a commercial crab meat analog and sausage was determined by ciELISA, the assay recovery was found to be 108% and 127%, respectively. The combined results of this study indicate that this novel ciELISA for OM detection could be applied for the quantification of hen's egg proteins in processed foods.

• 한국작물학회지
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• 제43권4호
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• pp.228-233
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• 1998

Seed storage proteins have been used for studying biochemical genetics and end-use quality aspects. We conducted enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and one-dimensional SDS-PAGE (1D SDS-PAGE) to evaluate different cereal crop species and Korean wheat lines for rye secalin proteins. The antisecalin antibody showed consistent specificity for rye secalin with little cross-reactivity to gliadins. Immunological cross-reactivities measured by the ELISA technique using competition assay showed significant differences of absorbance among rye, triticale, wheat-rye translocated wheat and non-translocated wheat. The absorbance values were lowest in rye followed by triticale, translocated wheat and non-translocated wheat. The ELISA for discrimination of wheat-rye translocation on the basis of antigen-antibody reactivity showed that none of the Korean wheat lines possessed 1RS and secalin proteins. The competitive ELISA experiment demonstrated specific determination for secalin that was originated from rye chromosomal parts. The result of 1D SDS-PAGE for identifying rye secalin subunits showed all three rye specific secalin protein subunits (75 KDa, 45 KDa, and 40 KDa) for rye and triticale, and 1RS specific secalins (45 KDa and 40 KDa) for 1AL/1RS and 1BL/1RS translocated wheats. All Korean wheats were lacking 1RS of rye chromosome and secalin.

• 한국환경과학회:학술대회논문집
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• 한국환경과학회 2003년도 International Symposium on Clean Environment
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• pp.99-102
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• 2003

The different methods such as HPLC, indirect- and direct-ELISA were employed for the analysis of microtoxins and the results of each method were compared in terms of the detection limit and accurary. Three toxins, microcystin-RR, -LR and -YR were clearly separated by HPLC using 0.05 M methanol and phosphate buffer used as a solvent system. The calibration curves for the toxins were linear in the range of 5 ng to 50 ng. The standard curves for the immunoassay of microcystin obtained by direct and indirect ELISA are compared. The linear responses of inhibitions of binding by microcystin in the direct and indirect competitive ELISA were in the range of 10 ng to 1000 ng and 50 pg to 160 pg, respectively. Distribution of microtoxins at 11 sites in the Nakdong river and several lakes in Korea was also studied. The most dominant microcystin variant in the test sites was found to be microcystin-RR.

• 한국동물학회지
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• 제38권3호
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• pp.382-387
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• 1995

항-AFP 단일 클론 항체를 생산한 다음, 이를 이용한 noncompetitive ELISA 방법으로 정상인과 간암 및 그 밖의 간질환 환자의 혈청내 AFP농도를 측정해 본 결과 간암진단 방법으로는 혈청 AFP농도 측정이 필수적임이 확인되었다. 또한 간암 및 그 밖의 간질환 환자의 조직에 대한 항-AFP-항체의 반응성을 immunperoxidase 방법과 indirect immunofluorescence 방법으로 검정해 본 결과, 간암조직세포 및 일부 간질환 조직세포에서 항-AFP-항체에 대해 양성반응을 나타내었다. 그러나 그 반응성의 정도는 간암조직세포에서 보다 간암조직 주위의 비신생 간세퐁서 더욱 높았다. 그러므로 간암 진단에 있어서 AFP항원을 면역조직화학적으로 검정하는 방법은 적합하지 않았다.

• 한국동물위생학회지
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• 제33권2호
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• pp.121-128
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• 2010

Brucellosis is a serious zoonosis, recognized worldwide. It primarily affects animals, which act as reservoirs for human infection as well as being of economic significance to the agri-food industry. Bangladesh has been reported as an endemic area for brucellosis. So a cross sectional study was conducted to determine the seroprevalence and potential risk factors of brucellosis in cattle in Dinajpur and Mymensingh districts of Bangladesh. A total of 182 cattle were examined by Rose Bengal Plate Test (RBPT) between September 2008 and October 2009. Then Positive, doubtful, and negative samples were further confirmed with slow agglutination test (SAT) and both indirect and competitive enzyme linked immunosorbent assay (iELISA and cELISA). A questionnaire was used to collect epidemiological information of the animals. The overall animal-level prevalence was 3.30%. Brucellosis seroprevalence was higher (4.76% by cELISA) in cattle above 48 months than those under 48 months. Female showed higher seroprevalence (10.67%) than male (6.25%). Higher seroprevalence was also found in cattle bred naturally (20.0%) than artificially (8.77%) and cattle that aborted or with previous abortion record (22.22%) showed higher seroprevalence than non-aborted (7.69%). The sensitivity of RBT and SAT was found 100% as compared to cELISA standard test, whereas specificity of RBT (95.35%) was higher than that of SAT (94.32%).

• 한국식품과학회지
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• 제24권3호
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• pp.204-208
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• 1992

본 실험은 가공한 육제품에 첨가된 대두단백질(soy protein)을 정량하기 위한 면역분석(Immunoassay)법의 개발을 목적으로 실시하였다. Isolated soy protein(ISP)의 whole buffer extract(WBE) 분획을 SDS 처리 후 토끼에 주사하여 생산된 항혈청의 항체역가를 indirect ELISA법으로 조사하였을 시 1 : 10,000 이상에서도 반응을 나타내었다. 시료의 처리시 SDS의 최종농도가 0.03% 이상에서는 항원-항체 반응이 심각하게 저지되었으나, 0.02% 이하에서는 거의 영향을 미치지 않았다. 본 실험에 사용한 항체는 SDS로 변성된 항원(대두단백질)은 물론 SDS를 투석으로 제거한 재생항원(renatured antigen)과도 반응하였으나 그 정도는 변성항원에 비하여 약간 낮았다. 검정곡선(calibration curve)을 indirect competitive ELISA 법으로 작성하였을 시 ISP를 100 ng/100 ml까지 측정할 수 있는 감도(sensitivity)를 얻었다.

• 한국식품과학회지
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• 제35권2호
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• pp.291-296
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• 2003

된장 및 간장의 chitooligosaccharide(COS) 함량을 높이기 위해 Bacillus subtilis와 Rhizopus oryzae를 접종하여 koji를 만들고 이들 균주들에 의한 된장 및 간장에서 COS 함량변화에 대하여 알아보았다. COSM에 특이적인 항체를 이용하여 competitive direct ELISA(cdELISA)로 COS를 검출하였는데, 검출 감도는 $0.001{\sim}1{\mu}g/mL$이었고, 회수율은 된장 및 간장에서 각각 102%, 115%를 보였다. B. subtilis koji와 R. oryzae koji를 섞어 담근 된장 또는 간장(BR 된장 또는 간장)이 높은 COS 함량을 보였는데, 두 달 숙성에서 된장이 $171{\mu}g/g$, 간장이$29{\mu}g/mL$을 나타내었다. 일본, 국내 시판, 그리고 실험실에서 만든 된장 및 간장의 COS 함량을 비교해 본 결과, BR 시료구가 일본이나 국내 시판용보다 훨씬 높은 함량을 나타내 주어서 본 실험에서 koji 제조시 이용된 Bacillus subtilis와 Rhizopus oryzae 의해 COS의 함량을 높일 수 있는 가능성을 보여주었다.

• 약학회지
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• 제38권3호
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• pp.351-357
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• 1994

The levels of maternal immunity enhancing factor(MIEF), which is an immunomodulatory protein identified from bovine colostrum, were determined by indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for the colostrum and normal milk collected during the first two weeks of lactation. The mean concentration of MIEF in the colostrum of the first day of lactation was $109\;{\mu}g/ml$, and fell from the third day of lactation to $3{\sim}4\;{\mu}g/ml$. The molecular weight of the purified MIEF determined by reducing SDS-PAGE and TSK G2000SW column chromatography was 22,000 and 24,000 daltons, respectively, showing that MIEF is a monomeric peptide in its native form. To examine the capacity of MIEF to induce differentiation of B Lymphocytes, human tonsillar Iymphocytes were cultured in the presence of different concentrations of MIEF, and then antibody secreting cells were enumerated by enzyme-linked immunospot(ELISPOT) assay. When added to cultures of human tonsillar Lymphocytes, MIEF induced differentiation of resting B Iymphocyte to antibody secreting plasma cells as efficiently as LPS.

• 한국식품과학회지
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• 제28권5호
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• pp.953-958
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• 1996

발암성 진균 독소의 하나인 fumonisin을 신속, 간편하게 분석할 수 있는 효소면역측정법 (ELISA)을 개발하고자 하였다. 먼저 Fumonisin $B_1\;(FB_{1})$에 특이적인 항체를 생산하기 위하여 $FB_1$을 keyhole lympet hemocyanin (KLH)에 공유결합시키고 이를 Freund's adjuvant와 함께 토끼에 3차례 피하주사하여 면역하였다. 높은 항체가와 가장 양호한 경합반응을 보인 항혈청으로부터 항체를 정제하였으며, 이 항체의 fumonisin 유사독소에 대한 교차반응은 fumonisin $B_1,\;B_2$및 $B_3$에 대하여 각각 100%, 69% 및 166%이었다. $FB_1$의 검출을 위하여 확립한 직접법 경합ELISA (cdELISA)로 옥수수에 인위적으로 오염시킨 $FB_1$을 정제없이 ELISA로 분석하는 경우, 75% methanol로 시료의 추출 후 완충액으로 1/100 희석하였을 때 양호한 회수율을 보였다. 이 조건하에서 행한 ELISA의 FB₁분석회수율은 $1-30\;{\mu}g/g$의 오염농도범위에서 평균 67%이었으며, 농도별 회수율의 분산은 3.4%로 분석치가 매우 안정하였다. 본 연구에서 개발한 fumonisin 분석용 ELISA system은 수입 및 국내산 농산물로부터 이 독소의 정제없이 손쉽게 다량의 시료를 일차로 분석하는 데 유용할 것으로 판단된다.