Plant essential oils are defined as fragrant volatile oils extracted from leaves, stems, fruits, flowers, and roots of a plant. Such oils are composed of multiple components and multiple functions. By accumulation of inductive information, various plant essential oils have been studied for using in therapeutic medicine for various diseases. Despite of the apparent advantages of essential oils as a source of therapeutic medicines, plant essential oils have many limitations, including cytotoxic side effects. Therefore, it is necessary to evaluate the toxicity and the mechanisms of cytotoxicity of such oils. In this study, we evaluated the cytotoxicity to human-derived cell lines of 10 plant essential oils provided by National Institute of Forest Science (i.e., Larix kaempferi; Abies holophylla; Zanthoxylum ailanthoides; Pinus parviflora; Tsuga sieboldti; Chamaecyparis pisifera; Cryptomeria japonica; Pinus densiflora; Illicium anisatum; Pinus thunbergii). Cytotoxicity evaluations were accomplished by using CCK-assays and PCR-based cytotoxicity-related marker gene analyses with A549 cell line, and the Detroit551 cell line which are lung and skin cell line. The genes were analyzed included caspase-3 has a role in cell apoptosis, and the other cyclinA, cyclinB, cyclinD, and cyclinE regulated cell cycling for the cell proliferation. By examining the five cytotoxicity-related marker genes by performing real-time PCR and examined the cytostatic gene regulation associated with the various essential oils. The results of this study showed that the degree of cytotoxicity and the cytostatic gene regulation which could give precious information for using the plant essential oil for the clinical usages.
Chifenti, Barbara;Locci, Maria Teresa;Lazzeri, Gloria;Guagnozzi, Mariangela;Dinucci, Dino;Chiellini, Federica;Filice, Maria Elena;Salerno, Maria Giovanna;Battini, Lorella
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제40권1호
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pp.33-37
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2013
Autophagy is a degradation process that acts in response to environmental stressors. Recently, autophagy has been detected in normal term, preeclamptic and intrauterine growth-restricted placentas. The object of this work was to investigate the presence of autophagy in first trimester voluntary interruption of pregnancy placental villi by the expression of autophagy-related proteins, light chain 3 (LC3), and Beclin-1. In first trimester placental villi laser scanning confocal microscopy (LSCM) analysis revealed LC3 and Beclin-1 immunoreactivity prevalently located in villous cytotrophoblasts. Using LSCM, LC3, and Beclin-1 were localized to the cytoplasm of the trophoblast layer in human full-term placentas. Beclin-1 expression and LC3 activation were confirmed by western blotting. These data emphasize that autophagy activation is different among cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts depending on the gestational age and thus we speculate that autophagy might play a prosurvival role throughout human pregnancy.
Coffee is a popular beverage worldwide, and the scale of consumption is growing rapidly. Many studies have shown that increased coffee consumption has various effects on human health, including beneficial effects on liver diseases, clinical type 2 diabetes, and Parkinson's disease. However, the influences of coffee or caffeine (a component of coffee) on the gut microbiota have not been examined in detail. Here, we tested whether caffeine could alter the antimicrobial activity of L. casei against E. coli. Interestingly, we found that treatment with 0.3 mg/mL caffeine increased the antimicrobial activity of L. casei against E. coli. This activity was not associated with the release of lactic acid but did appear to be related to a heat-labile factor present in the L. casei culture supernatant. Our analyses suggest that the putative antimicrobial factor found in the culture supernatant of L. casei treated with caffeine may be bacteriocin. Taken together, our results suggest that caffeine, which is an ingredient of coffee, increases the antimicrobial activity of L. casei against E. coli through the enhanced production of bacteriocin. These findings also suggest that coffee consumption affects the ability of beneficial bacteria to decrease pathogenic bacteria and/or prevent the progression of bacterial infection-associated diseases in the gut.
Oligomers with $\alpha$-aminooxy acids are reported to form very stable turn and helix structures, and they are supposed to be useful peptidomimetics for drug design. A recent report suggested that homochiral oxa-peptides form a strong eight-member-ring structure by a hydrogen bond between adjacent aminooxy-acid residues in a $CDCl_3$ solution. In order to design an $\alpha$-MSH analog with a stable turn conformation, we synthesized four tetramers and one pentamer, based on $\alpha$-MSH sequence, and determined the solution structures of the molecules by two-dimensional NMR spectroscopy and simulated annealing calculations. The solution conformations of the three peptidomimetic molecules (TLV, TDV, and TLL) in DMSO-$d_6$ contain a stable 7-membered-ring structure that is similar to a $\gamma$-turn in normal peptides. Newly-designed tetramer TDF and pentamer PDF have a ball-type rigid structure that is induced by strong hydrogen bonds between adjacent amide protons and carbonyl oxygens. In conclusion, the aminooxy acids, easily prepared from natural or unnatural amino acids, can be employed to prepare peptidomimetic analogues with well-defined turn structures for pharmaceutical interest.
Background: Peptides have diverse and important physiological roles in plants and are ideal markers for species identification. It is unclear whether there are specific peptides in Panax quinquefolius L. (PQ). The aims of this study were to identify Quinetides, a series of diverse posttranslational modified native peptides of the ribonuclease-like storage protein (ginseng major protein), from PQ to explore novel peptide markers and develop a new method to distinguish PQ from Panax ginseng. Methods: We used different fragmentation modes in the LTQ Orbitrap analysis to identify the enriched Quinetide targets of PQ, and we discovered Quinetide markers of PQ and P. ginseng using ultrahigh-performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry analysis. These "peptide markers" were validated by simultaneously monitoring Rf and F11 as standard ginsenosides. Results: We discovered 100 Quinetides of PQ with various post-translational modifications (PTMs), including a series of glycopeptides, all of which originated from the protein ginseng major protein. We effectively distinguished PQ from P. ginseng using new "peptide markers." Four unique peptides (Quinetides TP6 and TP7 as markers of PQ and Quinetides TP8 and TP9 as markers of P. ginseng) and their associated glycosylation products were discovered in PQ and P. ginseng. Conclusion: We provide specific information on PQ peptides and propose the clinical application of peptide markers to distinguish PQ from P. ginseng.
Background: Feline immunodeficiency virus (FIV) causes an acquired immunodeficiency-like syndrome in cats. FIV is latent. No effective treatment has been developed for treatment the infected cats. The first and second generations non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors (NNRTIs) for HIV treatment, nevirapine (NVP) and efavirenz (EFV), and rilpivirine (RPV), were used to investigate the potential of NNRTIs for treatment of FIV infection. Objective: This study aims to use experimental and in silico approaches to investigate the potential of NNRTIs, NVP, EFV, and RPV, for inhibition of FIV reverse transcriptase (FIV-RT). Methods: The FIV-RT and human immunodeficiency virus reverse transcriptase (HIV-RT) were expressed and purified using chromatography approaches. The purified proteins were used to determine the IC50 values with NVP, EFV, and RPV. Surface plasmon resonance (SPR) analysis was used to calculate the binding affinities of NNRTIs to HIV-RT and FIV-RT. The molecular docking and molecular dynamic simulations were used to demonstrate the mechanism of FIV-RT and HIV-RT with first and second generation NNRTI complexes. Results: The IC50 values of NNRTIs NVP, EFV, and RPV against FIV-RT were in comparable ranges to HIV-RT. The SPR analysis showed that NVP, EFV, and RPV could bind to both enzymes. Computational calculation also supports that these NNRTIs can bind with both FIV-RT and HIV-RT. Conclusions: Our results suggest the first and second generation NNRTIs (NVP, EFV, and RPV) could inhibit both FIV-RT and HIV-RT.
Objectives: This study was carried out to analyze the single dose toxicity of ShinEumHur (SEH) pharmacopuncture injected into the muscles of Sprague-Dawley rats. Methods: The SEH pharmacopuncture was made in a clean room at the Korean Pharmacopuncture Institute (K-GMP). After the mixing process with sterile distilled water had been completed, the pH was controlled to between 7.0 and 7.5. All experiments were conducted at Biotoxtech, an institution authorized to perform non-clinical studies under the Good Laboratory Practice (GLP) regulations. Sprague-Dawley rats were chosen for the pilot study. Doses of SEH pharmacopuncture, 0.25, 0.5 and 1.0 mL, were administered to the experimental groups, and a dose of normal saline solution, 1.0 mL, was administered to the control group. We examined the survival rate, weights, clinical signs, mean hematology parameters, mean clinical chemistry, necropsy and histopathological findings. This study was conducted under the approval of the Institutional Animal Ethics Committee. Results: No deaths or abnormalities occurred in any of the four groups. No significant changes in weight, hematological parameters or clinical chemistry between the control group and the experimental groups were observed. To check for abnormalities in organs and tissues, we used microscopy to examine representative histological sections of each specified organ; the results showed no significant differences in any of the organs or tissues. Conclusion: The above findings suggest that treatment with SEH pharmacopuncture is relatively safe. Further studies on this subject are needed to yield more concrete evidence.
Objectives: This study investigated the aconitine contents analysis of Buja extracts (raw material of Buja, hot water extract of Buja, and hot water extract of Sambu-tang) and the single oral dose toxicity of Sambu-tang-R in six-week-old Sprague-Dawley rats in order to compare the toxicity of Buja extracts.Methods: Aconitine content analysis is that Buja extracts were hold purity test. To detect single oral dose toxicity, six-week-old Sprague-Dawley rats were divided into two groups, a normal control group and a sambutang-R (2,000 mg/kg) group. For 14 days of treatment, clinical signs, body weight, clinical chemistry, necropsy, and histopathology were examined.Results: The aconitine contents of the Buja extracts were Buja-RH (0.1738%), Buja-RD (0.1746%), and Sambu-tang-R (0.0961%). There were no cases of death in either the control group or the experimental group. Nor was there any disorder to the clinical signs or any significant change in body weight in either group. There was no significant change of clinical chemistry or disorder of necropsy findings in either the control or the experimental group. And there was no difference in histopathological findings in comparing the control group with the experimental group.Conclusions: These results suggest that the aconitine content of the hot water extract of Buja was similar to the raw material of Buja, but the hot water extract of Sambu-tang had greatly decreased aconitine content. These results also suggest that a single oral lethal dose of Sambu-tang-R for Sprague-Dawley rats exceeds 2,000 mg/kg for both female and male rats.
Objectives: This study was performed to analyze the toxicity of the test substance, anti-inflammatory pharmacopuncture (AIP), when used as a single intramuscular-dose in 6-week-old, male and female Sprague-Dawley rats and to find the lethal dose. Methods: The experiment was conducted at Biotoxtech according to Good Laboratory Practices. Twenty (20) female and 20 male Spague-Dawley rats were divided into 4 groups of five 5 female and 5 male animals per group. The rats in the three experimental groups received single intramuscular injections with 0.1-$m{\ell}$, 0.5-$m{\ell}$ and 1.0-$m{\ell}$/animal doses of AIP, Groups 2, 3, and 4, respectively, and the control group, Group 1, received a single intramuscular injection with a 1.0-$m{\ell}$ dose of normal saline. Clinical signs were observed and body weight measurements were carried out for 14 days following the injections. At the end of the observation period, hematology, clinical chemistry, histopathological tests and necropsy were performed on the injected parts. Results: No deaths occurred in any of the groups. Also, histopathological tests showed that AIP had no effect on the injected parts in terms of clinical signs, body weight, hematology, clinical chemistry, and necropsy. Conclusions: As a result of single intramuscular-dose tests of the test substance AIP in 4 groups of rats, the lethal dose for both males and females exceeded $1.0m{\ell}$/animal. Therefore, AIP is a relatively safe pharmacopuncture that can be used for treatment, but further studies should be performed.
Singh, V.K.;Pattanaik, Ashok Kumar;Goswami, T.K.;Sharma, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권8호
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pp.1089-1101
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2013
Effects of varied dietary energy densities on immune response and performance of Muzzafarnagari lambs were ascertained in a 180-d study. Animals (n = 24), in three groups, were fed diets providing 100% (100E), 80% (80E) or 70% (70E) of their metabolizable energy requirement. Mean nutrient digestibilities varied significantly among treatments. Nitrogen intake was lower (p<0.01) in the 70E. Nitrogen retention, was reduced (p<0.001) in 80E and 70E vs 100E. The average daily gain (p<0.001) was $47.01{\pm}4.23$, $13.54{\pm}1.72$ and $-16.67{\pm}8.24$ g for 100E, 80E and 70E, respectively. Hemoglobin concentration, haematocrit, total and differential leukocyte counts were lower (p<0.001) for 80E and 70E than for 100E with a similar trend (p<0.05) for serum glucose and total protein. Serum cortisol was reduced (p<0.001) with decreased energy availability. Antibody titre to Brucella abortus S19 showed an initial reduction in 80E and 70E vs 100E. Delayed-type hypersensitivity response was lower (p<0.001) in 80E and 70E vs 100E, accompanying a lower (p<0.001) nitric oxide production by the peripheral lymphocytes. It is concluded that the reduced dietary energy density significantly affects the growth performance and immune response of lambs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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