키토산 및 키토산 올리고당의 김치관련 미생물에 대한 항균특성을 검토하였다. 분자량 및 탈아세틸화도가 다른 5종의 키토산을 조제하여 김치에 첨가한 후, 관능검사, pH 및 산도를 검토한 결과, C-4 및 C-5(탈아세틸화도 $92{\sim}99%$, 분자량 $16,700{\sim}32,000)$가 우수한 조직감을 나타내었고 숙성적기로 평가된 대조구의 pH 4.1, 산도 0.50% 시점에서 pH 4.9 및 산도 0.35%를 나타내었다. 한편, C-4 키토산(분자량: 16,000, 탈아세틸화도: 99%)으로부터 $5{\sim}7$량체의 함량이 높은 키토산 올리고당을 조제하고 B. subtilis, B. cereus, Pse. fluorescens, E. coli, Lac. plantarum, Leu. mesenteroides, Lac. brevis, Ent. faecalis에 대하여 항균력을 측정한 바, 3.0% (w/v) 키토산은 $9{\sim}20mm$, 5.0% (w/v) 키토산 올리고당은 $8{\sim}24mm$의 성장억제환을 나타내었으며 키토산의 MIC는 $0.01{\sim}0.05%$ (w/v), 키토산 올리고당의 MIC는 $0.05{\sim}0.2%$로 나타났다. C-4 키토산 및 키토산 올리고당은 또한 초기, 적기 및 후기의 김치 유래 총 microflora에 대해서도 항균력을 나타내었고 특히 적숙기의 microflora에 대해서 가장 강한 항균력을 보였다. 따라서 C-4 및 키토산 올리고당은 김치의 저장성 개선제로서 응용이 가능할 것으로 기대되었다.
천연 고분자인 키토산의 1차 아민기를 아질산나트륨염에 의해 환원 말단에 알데히드기를 갖는 키토산 올리고사카라이드를 얻었으며, 이를 수소화붕소산나트륨으로 환원하여 수산기로 전환하였다. 얻어진 키토산 올리고사카라이드의 평균 중합도는 겔투과 크로마토그라피를 통해 약 2로 나타났으며, 키토산에 비해 친수성 용매에 대한 용해성이 매우 높게 나타났다. 보습효과를 글리세린과 비교 측정한 결과 키토산 올리고사카라이드는 어느 정도 수분을 보유할 수 있는 능력은 있으나 글리세린에 비하여 약한 것으로 나타났다. 피부의 섬유아세포 증식 실험결과1$\times$10-3 ~ 1$\times$10-4%농도에서 115 ~ 125%의 세포증식 효과를 보였다. 키토산 올리고사카라이드에 아실클로라이드를 반응시켜 얻은 N, N-디아실, O-아실 키토산 올리고사카라이드는 액정을 형성하였으며, 높은 결정성을 보였다. 또한 유동파라핀, 에스테르형 오일 성분 등에 대한 용해성이 우수하여 화장품용 유성성분으로서의 가능성을 나타내었다.
Park, Pyo-Jam;Je, Jae-Young;Byun, Hee-Guk;Moon, Sung-Hoon;Kim, Se-Kwon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권2호
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pp.317-323
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2004
This study was performed to investigate the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides against three Gram-negative bacteria and five Gram-positive bacteria. Nine classes of hetero-chitosan oligosaccharides consisted of partially deacetylated chitosans; 90%, 75%, and 50% deacetylated chitosans. Based on molecular weight, they were prepared using an ultrafiltration membrane reactor system. Seventy-five percent deacetylated chitosan showed the highest antimicrobial acitivity as compared with the 90% and 50% deacetylated chitosan, and the activity was dependent on their molecular weights. It was apparent that the growth of Gram-negative bacteria is less inhibited in the presence of the heterochitosans and their oligosaccharides than Gram-positive bacteria. These results revealed that the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides depend on the degree of deacetylation, and their molecular weights.
This study was performed to investigate the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides on the halophilic bacterium, Vibrio parahaemolyticus. Nine classes of hetero-chitosan oligosaccharides were prepared based on their molecular weights, using an ultrafiltration membrane reactor system with chitosanase and celluase, from partially different deacetylated chitosans, 90%, 75%, and 50% deacetylated chitosan, respectively. Thirty-two strains of V. parahaemolyticus were isolated from various marine organisms such as shellfish, shrimps, octopus, and seabirds. Seventy-five percent deacetylated chitosan showed the highest antimicrobial acitivity. The minimal inhibitory concentration (MIC) was 0.5 mg/ml on 14 strains of V. parahaemolyticus, and MIC of the rest strains (18 strains) was 1.0 mg/ml. In addition, MIC of most hetero-chitosan oligosaccharides was 8.0 mg/ml. The results revealed that the antimicrobial effects of hetero-chitosans and their oligosaccharides against V. parahaemolyticus depend on the degree of deacetylation, their molecular weights, and strains tested.
키토산 올리고당이 ACE 저해활성과 SHR의 혈압에 미치는 영향을 검토하였다. 키토산 올리고당은 모두 ACE 저해활성을 나타내었다. ACE 저해활성$(IC_{50})$은 3량체가 $0.9\;{\mu}mole$로 가장 우수하였고 2량체의 경우에는 $2.4\;{\mu}mole$, 그 외의 올리고당은 모두 $>100\;{\mu}mole$였다. 강력한 ACE 저해제인 Captopril(2-D-mercaptopropanoyl-L-proline)의 인체 투여량을 기준으로 3량체 키토산 올리고당 2.14 mg/kg을 SHR에 강제 경구투여한 바, 4시간 경에 8주령 및 21주령 SHR모두 최저혈압을 보였고 이 때의 혈압 강하는 8주령 SHR $27{\pm}4.8\;mmHg$, 21주령 SHR $36{\pm}4.3\;mmHg$로 나타났다. 따라서 3량체 키토산 올리고당은 2량체 키토산 올리고당과 함께 향후 고혈압 치료제로서 응용가능함이 시사되었다.
Chitin, a poly $\beta$-(1longrightarrow14)-N-acetyl-D-glucosamine, is best known as a cell wall component of fungi and as a skeletal materials of invertebrates. Chitosan is derived from chitin by deacetylation in the presence of alkali. Chitosan has been developed as new physiological materials since it possesses antibacterial activity, hypocholesterolemic activity and antihypertensive action. However, the actions of chitosan in vivo still remain ambiguous as the physiological functional properties because most animal intestines, especially the human gastrointestinal tract, do not possess enzyme such as chitosanase which directly degrade the $\beta$-glucosidic linkage in chitosan, and consequently the unbroken polymers may be poorly absorbed into the human intestine. Therefore, recent studies as chitosan have attracted interest for chitosan oligosaccharides, because the oligosaccharides process not only water-soluble property but also versatile functional properties such as antitumor activity, immune-enhancing effects, enhancement of protective effects against infection with some pathogens in mice and antimicrobial activity (Kingsnorth et al., 1983, Mori et al., 1997). (omitted)
Chitin, a linked polysaccharide composed of 2-acetamido-2-deoxy-$\beta$-D-glucopytanose residues, is distributed widely in nature. It has been utilized on various application field due to the development of chitin derivatives such as chitosan, partial deacetylated chitin, carboxylmethyl chitin, sulfated chitin, and so on. Chitin and chitosan have been recently interested in antitumor and antimicrobial activities, because of a powerful tumor inhibitory effect against experimental mouse tumors. Especially, the oligosaccharides obtained by partial degradation of them exhibited a remarkable antitumor effect against sarcoma 180, MM 48 and Meth Asolid tumors and antimetastatic effect against Lewis lung carcinoma in mice. This review describes on antitumor effects of chitin, chitosan and their oligosaccharides by their mechanism of action involving enhancement of immunological system.
Chitosan, a deacetylated derivative of chitin, is one of the abundant resources, and its biological properties such as antibactierial activity, hypocholesterolemic activity, and hypertensive action are remarked. However, increasing attention has recently been yen to converting chitosan to its oligosaccharides because they possess various functional properties like antitumor activity, immune-enhancing effects, enhancing protective effects against infection with some pathogens in mice, antifungal activity, and antimicrobial activity (Jeon et al., 2001). (omitted)
The present study investigated the antimetastatic property of chitosan oligosaccharides (COS) by evaluating motility, invasion, and the amount and activity of MMP-9 in MDA-MB-231 human breast carcinoma cells. Treatment of MDA-MB-231 cells with increasing concentrations of COS led to a concentration-dependent decrease in cell migration. COS significantly inhibited the invasion of MDA-MB-231 cells through a Matrigel-coated membrane. The treatment of MDA-MB-231 cells with COS reduced the amounts of secreted MMP-9. The activity and amount of MMP-9 protein in MDA-MB-231 cells were decreased by treatment with COS and occurred in a concentration-dependent manner. Our data indicated that COS can serve as a potential novel therapeutic candidate for the treatment of metastatic breast cancer.
키토산 올리고당 생산에 이용 가능한 경제성 있는 키토산 분해 효소를 탐색하였다. Cellulase, ${\beta}-1,4-glucosidase,\;protease$ 및 상업용 효소류를 대상으로 조제 키토산에 대한 분해력을 시험한 결과 Trichoderma viride, T. reesei 유래의 cellulase 및 상업용 효소인 Celluclast (T. reesei 유래 cellulase)가 우수한 키토산 분해능력을 나타내었다. 키토산에 대한 반응성은 T, reesei 유래 cellulase가 T. viride 유래 cellulase 보다 강하였으며 이들의 적정 키토산 분해조건은 pH 5.0이었고 적정 온도는 T. viride 유래 celluclast는 $45^{\circ}C$, T. reesei 유래 cellulase 및 Celluclast는 $55^{\circ}C$로 나타났다. 또한 dose reponse시험에서 이들 효소 모두 enz./chitosan비=0.1이 적절하였으며 T. reesei 유래 효소 및 Celluclast는 키토산 농도가 3%일 때 최대의 활성을 나타내었다. 한편, 상업용 효소인 Celluclast를 이용한 키토산 올리고당의 생산 가능성을 시험하기 위하여 3% 키토산 용액(310cp)에 Celluclast를 1% 첨가하고 $pH\;5.0,\;55^{\circ}C$에서 시간별로 반응시켰을 때, 점도는 초기30분경에 5.51cp로 98% 이상 감소하였으며 50% ethanol 가용물의 수율은 분해 15시간에 70%로 최대를 보였다. 총환원당의 함량은 분해시간이 경과함에 따라 증가하였고 반응 2시간부터 13.5% 내외의 수준을 유지하였다. 올리고당의 조성은 15시간 분해물에서 균일한 분포와 높은 함량을 보였으며 항종 양활성을 나타내는 것으로 알려진 6량체 키토산 올리고당의 생성량은 기존의 산 분해방법의 약 4배에 해당되는 8.0%로 나타났다. 따라서 T. viride 및 T. ressei 유래의 cellulase는 99% 이상의 탈아세틸화도를 가지는 키토산에 대하여 분해활성을 나타내고 특히 T. reesei유래의 상업용효소는 지금까지 효소가격이 너무 높아 활용되지 못한 chitosanase를 대신하여 키토산 올리고당을 경제성 높게 생산하는 데 이용될 수 있을 것으로 기대되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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