Chaetomium sp.배양체를 acetone에 침지하여 추출한 후 n-hexane, $CHCl_3$, EtOAc, n-BuOH 및 물로 분획하였다. 이중 EtOAc 분획을 silica gel 및 HPLC(ODS)를 이용하여 3종의 활성물질 A.C-3, A.C-4 및 A.C-5를 분리하였다. 각 화합물의 화학구조를 NMR 및 MS등의 스펙트럼 데이터와 문헌검색을 통하여 chaetoglobosin 유도체인 chaetoglobosin F, chaetoglobosin C 및 chaetoglobosin E로 동정하였다. A.C-3, A.C-4 및 A.C-5의 논피에 대한 유근신장 저해활성 검정 결과, $IC_{50}$값은 각각 66, 65, $67{\mu}g/ml$이었다.
본 실험에서는 만성위염, 위궤양, 십이지장궤양, 위암발생의 원인균으로 알려진 H. pylori를 저해하는 특이항균물질을 생성하는 균주를 토양에서 분리한 방선균액과 곰팡이 추출액을 대상으로 탐색하여 곰팡이 균주번호 60686을 선별하였다. Jar fermentor로 배양하여 얻은 균체를 acetone 및 EtOAc로 추출하였고, 얻어진 추출액을 silica column chromatography와 LH-20 gel chromatography를 수행하여 활성분획을 농축하였고 HPLC를 사용하여 항균 활성을 나타내는 단일물질 IDA를 분리 정제하였다. 항균 활성물질 IDA의 구조를 MS, NMR 분석등을 통해 추정한 결과 곰팡이의 2차 대사산물인 cytochalasan의 전형적 구조를 갖는 분자식 $C_{32}H_{36}N_2O_5$의 chaetoglobosin A라는 물질로 판명되었다. 항균물질 IDA의 항균력을 paper disk법으로 실험한 결과 그람양성 균주중에서는 S. aureus SG 511, 285와 503 3주에서만 항균력을 보였고, 그람음성 균주중에서는 H. pylori 4주에서만 항균력을 보였으나 동일농도 처리시 H. pylori에 대한 항균력이 S. aureus에 비해 우수한 항균효과를 가진다고 판단되었다.
As a part of the integrated disease system in greenhouse, an antifungal fungus(AF1) was isolated from greenhouse soil. It exhibited strong inhibitory activites against Pythium ultimum, Phytophtora capsici, Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, and Fusarium oxysporum based on dual culture on 1/5 strength of potato dextrose agar between antagonistic fungus and several plant pathogens. The antagonistic fungus was identified as Chaetomium cochliodes, based on morphological characteristics; the body of the perithecium bears straight or slightly wavy, unbranched hairs, whilst the apex bears a group of spirally coiled hairs. To investigate antagonistic principles, antifungal compound was extracted and fractionated by different solvent systems. An antifungal compound was isolated as pure crystal from is culture filtrate using organic solvent extraction and column chromatography, followed by preparative thin layer chromatography. The chemical structure of the purified antifungal compound was identified as chaetoglobosin A based on the data obtained form $^1H-NMR$, $^{13}C-NMR$, DEPT 90, 135, $^1H-^1H$ COSY, $^1H-^{13}C$ COSY and EI/MS. $ED_{50}$ values of the chaetoglobosin A against P. ultimum, P. capsici, R. solani, B. cinerea and F. oxysporum were 1.98, 4.01, 4.16, 2.67 and 35.14 ppm, respectively.
In the course of screening for the substances suppressing bleb formation of K562 cell induced by phorbol 12, 13-dibutyrate (PDBu), an inhibitor, chaetoglobosin A (CgA) was isolated from a cultured broth of unidentified fungus. CgA showed a strong inhibitory activity with the $IC_{50}$ value of 60 pM against bleb formation on K562 cells induced by PDBu, but it did not inhibit the activity of protein kinase C (PKC) in vitro. The inhibitory activity of CgA might be due to the modulation of actin filaments on the cell membrane. CgA exhibited strong cytotoxicity against various human cancer cell lines.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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