• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제10권1호
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• pp.103-106
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• 2000

Bacillus cereus KCTC 3674 excretes at least two kinds of extracellular proteases into the growth medium. Two major bands of the protease activity with molecular weights of approximately 100 and 38 kDa were obtained after gelatin-SDS-PAGE. The protease with a molecular weight of 38kDa was identified as an extracellular neutral (metallo-) protease. The neutral protease was quite thermostabile but labile to alkaline pH. On the contrary, the 100-kDa protease was thermolabile but stable to alkaline pH. The production of 38-kDa neutral protease was strongly affected by temperature, oxygen, carbonylcyanied m-chlorophenylhydrazone(CCCP) that was defined as a protonophofre, and cerulenin which inhibited lipid synthesis and caused changes in the membrane composition. On the other hand, the production of the 100-kDa protease was strongly affected by only temperature and cerulenin. Quinacrine (0.2 mM), which inhibits the penicillinase-releasing proteases of Bacillus licheniformis, had no effect, whatsoever, on the production of extracellular proteases in B.cereus KCTC 3674.

• KSBB Journal
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• 제27권3호
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• pp.172-176
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• 2012

In this study, microalgae Arthrospira platensis (A. platensis) mutants induced by ethyl methane sulfonate (EMS) and further selection for resistance of cerulenin, a potent inhibitor of fatty acid synthase, were characterized. The mutants selected by $2{\mu}M$, $5{\mu}M$ and $10{\mu}M$ of cerulenin were designated EC2, EC5 and EC10, respectively. Under normal growth conditions, the mutants and parental strain exhibited similar growth pattern. The mutants of A. platensis showed enhanced lipid accumulation and phycobiliproteins (phycoerythrin, phycocyanin). The lipid content of mutants EC2 and EC5 was about 4.4 and 4.8-fold higher than wild type. The phycoerythrin and phycocyanin content of mutants EC2 and EC5 was increased about 1.5 and 6.9-fold and 1.4 and 3.8-fold, respectively, compared to the wild type. The chlorophyll and carotenoid content of mutants was slightly increased. The high lipid and pigment contents exhibited by A. platensis mutants would make an excellent candidate for the production of commercially interesting biologically active compounds.

• Animal cells and systems
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• 제15권1호
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• pp.1-8
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• 2011

Perturbation of metabolism with increased expression of lipogenic enzymes is a common characteristic of human cancers, including prostate cancer. In the present work the overexpression of stearoyl-CoA desaturase (SCD) in LNCaP cells led to increased mRNA levels of fatty acid synthase (FAS) and acetyl-CoA-carboxylase-a, whereas micro RNA-mediated silencing of SCD inhibited the expression of these lipogenic genes in LNCaP cells. Treatment with the FAS-specific inhibitor cerulenin inhibited SCD induction of LNCaP cell proliferation. In addition, a transient transfection assay revealed the capability of cerulenin to suppress SCD and dihydrotestosterone induction of androgen receptor transcriptional activity. Furthermore, overexpression of SCD in LNCaP cells produced marked resistance to ceramide-induced cell death with reduced poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage. In contrast, silencing of SCD expression increased Bax protein in LNCaP cells. Furthermore, addition of ceramide to SCD knockdown LNCaP cells increased cell death and caspase-3 activity with drastic increase of PARP cleavage. Together, the data indicate that SCD may provide resistance of prostate cancer cells to ceramide-induced cell death.

• KSBB Journal
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• 제16권1호
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• pp.87-94
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• 2001

곰팡이 균인 Aspergillus terreus로서 고지혈증인 치료제인 lovastatin을 생산하기 위해 탄소원 조절에 의한 유가식 배양을 통해 lovastatin 생산 발효 조건을 확립하고자 하였다. 또한 발효시 곰팡이의 형태구조가 이차대사산물 생산에 중요함으로 유가식 배양에서의 공급배지농도와 공급속도에 따른 형태 구조의 변화가 생산성과 관련이 있는지를 구명하였다. Glucose 용액을 일정하게 또는 증가시켜 공급하는 방법을 실험하였으며 이 때 펠 의 분포를 비교하였다. Glucose 용액을 일정하게 공급한 경우가 1 mm 이하의 펠 이 더 많이 분포하였으며, lovastatin 생산량도 높았다. Lovastatin 생산에 적절한 펠 의 크기가 1 mm이었다는 연구 결과와 일치하였다. 또한 배양 방법 중 3일간 회분 배양 후 4일째부터 glucose를 일정하게 공급한 경우에서 높은 lovastatin 생산량을 나타내었다. 회분식 발효에서 lovastatin 생산을 위한 물리적 조건 중 교반 속도는 400 rpm으로 조절하였고 pH에 대한 영향을 조사하였다. 그 결과 pH 5.8로 유지하였을 때 lovastatin 생산량은 pH 7.4의 7배 이상인 384 mg/L로서 발효 기간 중 pH 조절이 중요하다는 것을 알 수 있었다. 플라스크에서의 유가식 배양과 회분식 배양결과를 토대로 하여 발효조에서 유가식 배양시 pH 5.8, 400 rpm, 초기 glucose 농도를 30 g/L 로 하여 3일간 회분 배양 후 4일째부터 180 g/L의 glucose 용액을 공급한 결과, 회분식 배양의 lovastatin 생산량보다 1.5배 많은 547 mg/L를 얻었으며, 생산성은 3.25 mg/L $\cdot$ hr였다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제24권7호
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• pp.1043-1051
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• 2017

본 연구는 각 지역의 생막걸리에서 분리된 야생 효모의 다앙한 발효학적 특성을 조사하기 위해 34종을 수집하고 효모를 분리, 동정하였다. 야생효모는 62 균주로 분리되었고, 26S rDNA 염기서열을 분석한 결과, Saccharomyces cerevisiae와 Pichia kudriavzevii로 동정 되었다. 62개의 균주들 중 발효학적 특성이 우수한 균주들을 선발하기 위해 황화수소와 $CO_2$ 생성능, 알코올 내성, 응집성 및 향기 성분 생성능을 분석하였다. 알코올 내성과 $CO_2$ 생성능의 상관성을 확인하기 위해 주성분분석(Principal Components Analysis)을 하였다. PC1 양의 방향에 강하게 부하되는 균주는 YM37, YM31, YM32, YM22로 분석되었으며, 총 0.14-0.18 g/72 h의 $CO_2$ 생성으로 대조군에 비해 높은 발효능을 보였고, 이들 중 YM22를 제외하고 불쾌취인 황화수소를 생성하지 않았다. 또한 이 4개의 균주들은 알코올 내성 15% 이상을 보유하며, 응집성은 0.5-1.0 mL 사이인 flocculation type으로 확인되었다. API 분석 및 cerulenin, TFL 저항성을 실험한 결과, 향기성분 생성능이 좋은 효모는 황화수소와 알코올 내성, 응집성 실험에서 우수한 발효학적 특성을 보인 YM37, YM31, YM32, YM22를 포함한 총 33개로 확인되었다. 이러한 결과를 통해 우리나라 생막걸리에서 분리한 야생 효모의 알코올 발효 및 향미 특성을 확인하였으며, 분리된 야생 효모는 주류 제조의 종균 효모로 이용 가능성을 확인하였다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권18호
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• pp.7617-7623
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• 2014

Objective: The mechanism of action of fatty acid synthase (FASN) in drug tolerance of breast cancer cells with epithelial-mesenchymal transition (EMT) features was investigated. Methods: The breast cancer cell line MCF-7-MEK5 with stably occurring EMT and tumour necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) tolerance was used as the experimental model, whereas MCF-7 acted as the control. Tumour cells were implanted into nude mice for in vivo analysis, and cerulenin was used as a FASN inhibitor. RT-PCR, real-time quantitative PCR and Western blot were employed to detect the expression of FASN, TNFR-1, TNFR-2, Wnt-1, ${\beta}$-catenin and cytC at the RNA and protein levels. Results: Compared with MCF-7, TNFR-1 expression in MCF-7-MEK5 was slightly changed, TNFR-2 was decreased, and FASN, Wnt-1, ${\beta}$-catenin and cytC were increased. The expression of Wnt-1 and ${\beta}$-catenin in MCF-7-MEK5 decreased after cerulenin treatment, whereas cytC expression increased. Conclusions: The important function of FASN in the drug tolerance of breast cancer may be due to the following mechanisms: FASN downregulated TNFR-2 expression through lipid rafts to make the cells less sensitive to TNF-${\alpha}$, and simultaneously activated the Wnt-$1/{\beta}$-catenin signalling pathway. Thus, cytC expression increased, which provided cells with anti-apoptotic capacity and induced drug tolerance.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제4권1호
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• pp.59-62
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• 1999

The recombinant bacteria strain DPD2540, containing a fabA::luxCDABE fusion, was used to detect the toxicity of various chemicals in this study. Membrane damaging agents such as phenol, ethanol, and cerulenin induced a rapid bioluminescent response from this strain. Other toxic agents, such as DNA-damaging or oxidative-damaging chemicals, showed a delayed bioluminescent response in which the maximum peak appeared over 150 min after induction. This strain was also tested for measurement of toxicity in field samples such as wastewater and river water effluents.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제43권1호
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• pp.56-64
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• 2015

non-Saccharomyces 효모는 야생효모로서, 다양한 효소를 세포 밖으로 분비하여 와인의 향기 성분 증가에 중요한 영향을 준다고 알려져 있다. 본 연구에서는 한국의 발효식품에서 분리된 효모 1,007주의 세포외 효소 활성을 조사하였다. 그 결과, β-glucosidase 566, glucanase 45, protease 401로 나타났으며, AA decarboxylase 활성 균주는 각 아미노산 별로 His 69, Tyr 306, Phe 171, Trp 23, Lys 197, Leu 198 균주로 나타났다. Cerulenin 과 TFL 내성 균주는 각각 563, 610주로, 15% 에탄올 내성 균주는 307주로 나타났다. 황화수소 생성균은 500주로 조사되었다. AA decarboxylation와 황화수소 저생성 균주 중 유용 효모 12 균주를 선발하여 26S rDNA 염기서열을 분석한 결과, C. tropicalis, H. opuntiae, H. uvarum, P. kudriavzevii, S. cerevisiae, W. anomalus로 각각 동정되었다. 12주의 효모 중 당 내성 우수 균주는 9주이며, 알코올 내성 우수 균주는 5 균주로 나타났다. 알코올 발효능은 Saccharomyces 효모는 8% 이상으로 나타났으며, non-Saccharomyces 효모는 3% 내외로 나타났다.

• 한국식품저장유통학회지
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• 제22권6호
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• pp.908-914
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• 2015

발효식품에서 분리한 효모 482균주의 저온적응성 및 알코올 생성능을 확인하고 ${\beta}$-glucosidase와 cerulenin, TFL저항성을 실험하여 저온적응성이 우수하고 향기성분 활성이 좋은 Y297 균주를 선발하였다. 26s rRNA 염기서열을 분석한 결과, Y297은 Saccharomyces cerevisiae로 동정되었다. 선발된 균주는 $15^{\circ}C$에서는 $25^{\circ}C$에 비해 정지상으로에 도달하는 시간은 오래 걸리지만 보다 많은 균수를 유지하였다. YPD 액체배지에 알코올 농도 10%와 glucose 60% 그리고 NaCl 8%가 포함된 배지에서 내성을 확인할 수 있었다. YPD(glucose 25%)배지에서 배양한 효모의 세포질 단백질을 추출하여 ${\beta}$-glucosidase와 esterase의 활성을 측정한 결과 시판효모보다 우수한 활성을 나타냈다. 이러한 결과를 통해 선발된 Y297는 약주제조에 적합한 종균효모로써의 가능성을 확인할 수 있었다.