The Biolog redox technology was carried out for evaluation of acidification effect on microbial communities at each stage of pH gradient microcosm. While the number of heterotrophic bacterial population and activities of extracellular enzyme decreased as the pH decreased, the number of total bacteria in the microcosm was not affected. The average color development of sample at each pH-gradient showed a sigmoidal curve, and at higher pH, more overall color development appeared in Biolog plates. Average color development value in Biolog plates was stabilized at 50 hours as an optimum incubation time. The color production in the Biolog plates was caused by cell density at above pH 5.0, but by cell activity below pH 4.0. Principal component analysis of color responses revealed distinctive patterns among the pH-gradient microcosm samples.
Disulfiram is a drug used to treat alcohol dependence. Recent studies have shown that disulfiram also has anti-cancer effects. Considering that many anti-cancer agents have side effects, including immunosuppression, it is important to check if disulfiram has some cytotoxicity to immune cells. In this study, mouse spleen cells were treated with disulfiram and the metabolic activity was measured. Disulfiram increased the cell death of spleen cells according to annexin V-FITC/PI staining analysis. In addition, disulfiram decreased the mitochondrial membrane potential of spleen cells. The toxicity of disulfiram was concentration dependent. Interestingly, disulfiram affected the population of lymphocytes and the subset of spleen cells was altered. This study provides clinicians and researchers with valuable information regarding the toxicity of disulfiram to mouse spleen cells, particularly lymphocytes.
Gene for lactose catabolism in Lactobacillus casei SW-M1 was encoded by a 60Kb metabolic plasmid. A derivative of only 10kb, pPlac 15 of recombinant plasmid, was constructed by introducing into pBR322 and was cloned into E. coli using restriction endonuclease Pst I. A 10kb insery DNA in plasmid pBR322 was identified as a gene encoded phospho-$\beta$-galactosidase by the determination of enzyme activity. Phospho-$\beta$-galactosidase was apparently expressed in E. coli. The enzyme activities of cell-free extract from transformant E. coli HB101 carrying pPLac 15 DNA were not different from that of L. casei as a donor strain on the basis of enzyme properites. However, specific activity of phospho-$\beta$-galactosidase in the cloned strain with Lac $Y^{-}$ phenotype of E. coli HB101 was lower than that in L. casei strain.
Kim, Hyun-Ju;Yoon, Hye-Jin;Lee, Dong-Kyo;Jin, Xian;Che, Xiangguo;Choi, Je-Yong
BMB Reports
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제54권5호
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pp.266-271
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2021
Estrogen-related receptor γ (ERRγ), a member of the orphan nuclear receptor family, is a key mediator in cellular metabolic processes and energy homeostasis. Therefore, ERRγ has become an attractive target for treating diverse metabolic disorders. We recently reported that ERRγ acts as a negative regulator of osteoclastogenesis induced by receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL). In the present study, we explored the effects of an ERRγ-specific modulator, GSK5182, on ERRγ-regulated osteoclast differentiation and survival. Interestingly, GSK5182 increased ERRγ protein levels much as does GSK4716, which is an ERRγ agonist. GSK5182 inhibited osteoclast generation from bone-marrow-derived macrophages without affecting cytotoxicity. GSK5182 also attenuated RANKL-mediated expression of cFos and nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1 (NFATc1), pivotal transcription factors for osteoclastogenesis. Arrested osteoclast differentiation was associated with reduced RANK expression, but not with the M-CSF receptor, c-Fms. GSK5182 strongly blocked the phosphorylation of IκBα, c-Jun N-terminal kinase, and extracellular signal-regulated kinase in response to RANKL. GSK5182 also suppressed NF-κB promoter activity in a dose-dependent manner. In addition to osteoclastogenesis, GSK5182 accelerated osteoclast apoptosis by caspase-3 activation. Together, these results suggest that GSK5182, a synthetic ERRγ modulator, may have potential in treating disorders related to bone resorption.
Dae Sik Haam;Dong-Yeop Shin;Hak Yong Lee;Young Mi Park;Byeong-Soo Kim;Myung-Sunny Kim;Hye Jeong Yang;Na-Rae Shin
Journal of Food and Nutrition Research
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제10권1호
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pp.32-40
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2022
Diabetes is a chronic metabolic disease with a high prevalence worldwide. Beet (Beta vulgaris) is a plant that is widely used in many countries and has various biological activities. In this study, we aimed to evaluate the antidiabetic effect of a B. vulgaris mixture (BM). In the in vitro evaluation, we measured the inhibitory activities of α-amylase and α-glucosidase, performed the oral starch tolerance test (OATT) and oral sucrose tolerance test (OSTT) in Sprague Dawley (SD) rats, and evaluated the clinical symptoms, oral glucose tolerance test (OGTT), number of blood cells, and insulin resistance in db/db mice. BM showed an inhibitory effect against α-amylase and α-glucosidase activity and decreased the blood glucose increased in the OATT and OSTT. In the diabetes mouse model, BM alleviated the general symptoms of diabetes and OGTT results showed a decrease in the increased blood sugar level. Regarding diabetes-related tissue weight, BM decreased the reduced pancreatic weight and showed an effect on diabetes-related factors of blood. Histological analysis indicated that BM decreased insulin concentration, insulin resistance, and insulin secretion ability in serum, and increased insulin concentration in the islets of Langerhans. These results demonstrate that BM has an antidiabetic effect through the regulation of glycolytic enzymes and β cell activity in the pancreas.
Purpose: Muscle mitochondria play a key role in regulating fatty acid and glucose metabolism. Dysfunction of muscle mitochondria is associated with metabolic diseases such as obesity and type 2 diabetes. Isorhamnetin (ISOR), also known as 3-O-methylquercetin, a quercetin metabolite, is a naturally occurring flavonoid in many plants. This study evaluated the effects of ISOR on the regulation of the mitochondrial function of C2C12 muscle cells. Methods: C2C12 muscle cells were differentiated for 5 days, and then treated in various concentrations of ISOR. Cytotoxicity was determined by assessing cell viability using the water-soluble tetrazolium salt-8 assay principle at different concentrations of ISOR and time points. Levels of the mitochondrial DNA (mtDNA) content and gene expression were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. The citrate synthase (CS) activity was quantified by the enzymatic method. Results: ISOR at a concentration of 10 µM did not show any cytotoxic effects. ISOR increased the mtDNA copy number in a time- or dose-dependent manner. The messenger RNA levels of genes involved in mitochondrial function, such as peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α, and uncoupling protein 3 were significantly stimulated by the ISOR treatment. The CS activity was also significantly increased in a time- or dose-dependent manner. Conclusion: These results suggest that ISOR enhances the regulation of mitochondrial function, which was at least partially mediated via the stimulation of the mtDNA replication, mitochondrial gene expression, and CS activity in C2C12 muscle cells. Therefore, ISOR may be useful as a potential food ingredient to prevent metabolic diseases-associated muscle mitochondrial dysfunction.
Cis-diamminedichloroplatinum II (cisplatin), an effective antitumor agent, induces acute renal failure by unknown mechanisms. To investigate direct toxic effects of cisplatin in the renal proximal tubular transport system, OK cell line was selected as a cell model and $Na^+/H^+$ antiport activity was evaluated during a course of cisplatin treatment. The cells grown to confluence were treated with cisplatin for 1 hour, washed, and incubated for up to 48 hours. At appropriate intervals, cells were examined for $Na^+/H^+$ antiport activity by measuring the recovery of intracellular pH (pHi) after acid loading. Cisplatin of less than 50 ${\mu}M$ induced no significant changes in cell viability in 24 hours, but it decreased the viability markedly after 48 hours. In cells exposed to 50 ${\mu}M$ cisplatin for 24 hours, the $Na^+-dependent$ pHi recovery (i.e., $Na^+/H^+$ antiport) was drastically inhibited with no changes in the $Na^+-independent$ recovery. Kinetic analysis of the $Na^+-dependent$ pHi recovery indicated that the Vmax was reduced, but the apparent Km was not altered. The cellular $Na^+$ and $K^+$ contents determined immediately before the transport measurement appeared to be similar in the control and cisplatin group, thus, the driving force for $Na^+-coupled$ transport was not different. These results indicate that cisplatin exposure impairs the $Na^+/H^+$ antiport capacity in OK cells. It is, therefore, possible that in patients treated with a high dose of cisplatin, proximal tubular mechanism for proton secretion (hence $HCO_3^-$ reabsorption) could be attenuated, leading to a metabolic acidosis (proximal renal tubular acidosis).
Among a few number of UV-resistant isolated form various environmental sources (10), we made a comparative physio-chemoanalytical study on one of spherical bacteria isolated from air dust, presumably Deinococcus sp. (CM strain 29) with an UV resistant bacterium, Deinococcus radiophilus ATCC 27603 as the reference strain. Our isolate of UV resistant coccus, Deinococcus sp. CM 29 and D. radiophilus ATCC 27603 showed more than 75% matching coefficient in metabolic activity of various substrates. The most predominant cellular fatty acid of both strains was palmitoleic acid (C 16 :1, cis 9), but the detail fatty acid profiles were slightly dissimilar to each other. Cell-bound arange pigment seemed to be an identical chemicals on spectrophotometric analysis. L-ornithine was detected as cell-wall amino acid in both strains. Galactose was detected as cell-wall sugar in D. radiophilus ATCC 27603, whereas glucose in Deinococcus sp. CM 29. G-C molar ratio of both strains was comparable, 63-65%.
The portion of Cuscuta japonica haustorium which lies internal to the host tissues, the endophyte, was examined at the ultrastructural level. The endophyte consisted of mainly small parenchymatous cells and large, slightly elongate cells at the tip. The tip cells were characterized by the presence of large and lobed nucleus, several small vacuoles, dense cytoplasm, abundant rough endoplasmic reticulum, dictyosomes, and mitochondria, and thus suggested to have a high metabolic activity. The shape, arrangement, and cytological characteristics of the parenchymatous and tip cells consisting the endophyte were very similar to those of the dividing cells and idioblasts, respectively, which appeared in the endophyte primordium of the upper haustorium. The tip cells with the thickened-apical wall were observed to grow intrusively through the host cell walls and to engulf the remnants of the degenerated host cells. In the former case intrusive growing cell was regarded to develop into the filamentous cell, the hypha. Plasmodesmata through the cell wall were not observed between host and parasite cells. Some host cells that in contact with the penetrating tip cells of the endophyte, showed the degenerating features such as a loss of cytoplasm, a beaded fashion of small vesicles, and deformation of chloroplasts.
Backgrounds : Androgenetic alopecia is a relatively common disorder, but its precise mechanism is not elucidated. There are two commercial drugs approved by FDA. One(finasteride) has an inhibition activity of 5$\alpha$-reductase(type 2) and the other(minoxidil) has a vasodilation activity. Objectives : A verified herbal remedy for baldness is needed for medicinal treatment or preventing alopecia, which could be demonstrated by alopecia-related in vitro & in vivo tests Methods : On the basis of oriental pharmacognosy, we classified many herbal medicines into four groups (malnutrition, aging, alopecia and gray hair) according to its effect. The mitosis induction of hairy dermal papillae cell and the metabolic inhibition for type 2 $5{\alpha}-reductase$ were tested with five herbal extracts. Also, five herbal extracts were added to the normal essence formulation (HHRHG0202-80) in ranges of 0.1~0.3%, which was applied two-mouse models to validate each hair growing activity in vivo. Results : Stimulation of follicular papillae cell proliferation was observed in treatment of three herbal extracts (Glycyrrhizae radix:159.7%, Corni fructus : 144.7%, and Coicis semen : 136.6%) at a dose of $10\mu\textrm{g}/ml$. Three herbal extracts (Biotae semen. Glycyrrhizae radix and Coicis semen) showed inhibitory activity for $5{\alpha}-reductase$(type 2) at 93.18%, 73.36% and 47.6%, respectively at the same dose. We observed the enhancement of hair growth activity in C57b1/6 mouse and the inhibition of alopecia in AGA mouse after topical administration of the hair essence. Conclusions : Hair essence product, which contains five medicinal plants, would be used for the remedy for male pattern baldness (MPB) and the other alopecia diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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