Saponins are glycosidic compounds present in many plant foods. They are characterized by their ability to lyse cell membranes due to their surface-active properties. Saponins are believed to interact primarily with cholesterol in the cell membrane. In this study, the interaction of soybean(SS) with cell membrane was investigated using erythrocytes as a model. Mechanisms of interaction was also investigated by measuring their binding capacity with different membrane lipid fractions. Throughout the study, gypsophilla saponin(GS) and quillaja saponin(QS) were used to evaluate the membranolytic activity of soybean saponins. All saponins released hemoglobin in a concentration-dependent manner. SS induced 40% hemolysis at the concentration of 400 ppm, however there was no increase in hemoglobin release above 400ppm concentration. 5ppm of GS and 8 ppm of QS hemolyzed 100% of erythrocytes. Isolation of SS fractions by thin layer chromatography revealed that only one non-polar saponin possesses strong hemolytic activity. When saponins were incubated decreased the release of cholesterol. When the hemolytic activity of saponins was measured in the presence of other major membrane lipid components, sphingomyelin significantly reduced the hemolytic activity of SS, while cholesterol reduced the activity of QS. GS showed high affinity to other component(s) in the incubation media as well as lipids. These results suggest that the membranolytic activity of saponins are related to their specific chemical structure, which determines the interaction behavior between saponins and different membrane components, and thereby influence the biological activity.
Vascular endothelial growth factor (VEGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) are the most important angiogenic molecules associated with tumor-induced neovascularization. This study was carried out to investigate inhibitory effect of extracts from root of Rehmannia glutinosa LIBOSCHITZ (Rehmannia Radix and Rehmannia Radix Preparata) on endothelial cell proliferation. The methanol extracts from the medicinal herb were fractionated into n-hexane, ethyl acetate, n-butanol and aqueous fractions. Among the four fractions, the n-butanol fraction from R. Radix on exhibited highly effective inhibition (${\approx}79%$ inhibition) on the binding of KDR/Flk-1-Fc to immobilized $VEGF_{165}$ and then ethyl acetate fraction from R. Radix (${\approx}45%$ inhibition) at the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. The n-butanol fraction efficiently blocked the VEGF- and bFGF-induced HUVEC proliferation in a dose-dependent manner, but did not affect the growth of HT1080 human fibrosarcoma cells. The n-butanol fraction more efficiently blocked the binding of KDR/Flk-1-Fc to immobilized $VEGF_{165}$ and VEGF- and bFGF-induced human umbilical vein endothelial cell proliferation than the fraction from R. Radix Preparata. Our results suggest that Rehmannia Radix may be used as a candidate for developing anti-angiogenic agent.
Lee Jeong Ho;Baek Seung Hwa;Lim Jin A;Chun Hyun Ja;Lee Ki Nam
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.5
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pp.1288-1292
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2003
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Houttuynia cordata T/sub HUNB/ extracts on A549 (lung cancer), MDA-MB231 (breast cancer), SNU-C4 (colon cancer) and B16 (mouse melanoma) cell lines. We have determined by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) assay. The 150 ㎍/㎖ concentration of methanol extract (63.81 %) of Houttuynia cordata T/sub HUNB/ was shown significantly antitoxic activity on A549 cell lines. The order of cytotoxicity fractions of methanol from Houttuynia cordata T/sub HUNB/ extracts against cancer cell lines in vitro is as follows : hexane fraction layer > chloroform fraction layer > ethyl acetate fraction layer > buthanol fraction layer > water fraction layer. These results suggest that the hexane fraction of methanol extract from Houttuynia cordata T/sub HUNB/ extract may be a valuable choice for the development of antitumor agents.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.1
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pp.260-264
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2004
The effects of bioactive fractions from Brachyglottis monroi on biological activity were investigated. this bioactive subfraction 6-5 is the most cytotoxic to P388 murine leukaemia cell lines. A comparison of IC/sub 50/ values of these subfraction in cancer cell lines showed that their susceptibility to these subfractions decreased in the following order; Fr. 6-5 > Fr. 6-3 > Fr. 6-6 > Fr. 6-1 > Fr. 6-2 > Fr. 6-4 by the MTT method. Silica gel flash column chromatography concentrated the cytotoxic activity in subfraction 6-5 which eluted with 30% and 40% ethyl acetate : hexane gave a major bioactive (51 mg, P388 IC/sub 50/ 8,286 ng/mL at 7.5 ㎍/disc).
Objectives: This study was camed out to examine the effect of five fractions of aqueous extract from Artemisia capillaris THUNB(ACT), on TGF, 1-induced apoptosis, cell viability, cell cycle progression and mRNA expression of apoptosis-related genes in human hepatocyte cell line HepG2. Methods: This study employed Tryphan blue exclusion assay, DNA fragmentation assay, Cpp32 protease activity assay and Quantitative RT-PCR analysis. Results: In the Tryphan blue exclusion assay, the butanol fraction of ACT with $TGF{\beta}$, l showed magnificent (Nice word, ut is it appropriate in a medical abstract\ulcorner) viability and the H2O fraction of ACT with $TGF{\beta}$, l also showed higher viability than only $TGF{\beta}$, l-treated group. DNA fragmentation assay showed that the butanol fraction and the H2O fraction carried inhibitory effects on apoptosis induction, with the butanol fraction displaying greater effects. The Cpp32 protease activity assay showed that the butanol fraction decreased Cpp32 protease activity. The H2O fraction of ACT had no significant effect on the Cpp32 protease activity. Quantitative RT-PCR showed that the butanol fraction suppressed Bax, p 15/INK4B, p21/Waf1, PAI-1 and increased Bcl-2 gene. Conclusions: The data shows that butanol fraction of ACT increases the hepatocyte viability and has the hepatocellular protective effect by the suppression of $TGF{\beta}$, l induced-apoptosis through gene regulation.
The specific growth rate was investigated to find the of(emits of major ginseng components in fractions extracted by several solvents on the growth of Candida parapsilosis. The cell proliferation of C. purapsilosis was inhibited by fraction A(hexane soluble components), while enhanced by fraction B(Et2O soluble components), C(AcOEt soluble components), E and F(dialysis outer and inner extract). The additive stimulant effect of cell proliferation was exerted by fraction D(crude saponinE) and B, C or E.
Choi, Soo Yeon;Kim, Ji Hyun;Lee, Jaemin;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.60
no.2
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pp.141-147
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2017
Radical scavenging effect and protective activity against oxidative stress of Acer okamotoanum were investigated. A. okamotoanum was extracted with methanol (MeOH) and then fractionated with n-BuOH, ethyl acetate (EtOAc), methylene chloride and n-hexane fractions. The MeOH extract and fractions showed strong 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl and superoxide radical scavenging activity. Among the MeOH extract and fractions, the EtOAc fraction showed the strongest radical scavenging activity. In addition, total phenolic and flavonoid contents of EtOAc fraction was higher than other extract and fractions. Furthermore, we investigated the neuroprotective effect of the MeOH extract and fractions from A. okamotoanum against oxidative stress under cellular system using C6 glial cell. The C6 glial cells showed a decrease in cell viability and high production of reactive oxygen species (ROS) by the treatment of amyloid $beta_{25-35}$ ($A{\beta}_{25-35}$). However, with the treatment of the MeOH extract and fractions, it significantly increased the cell viability and inhibited the overproduction of ROS by $A{\beta}_{25-35}$. In particular, the EtOAc fraction led to significantly increase the cell viability and decrease the generation of ROS against oxidative stress by $A{\beta}_{25-35}$. The current study indicated that A. okamotoanum demonstrated antioxidative and neuroprotective effects. In particular, the EtOAc fraction which attributed a strong protective activity against oxidative stress.
The $CHCl_3$, EtOAc, and n-BuOH fractions showed a marked inhibition of 5% fatal bovine serum (FBS)-induced cell proliferation. The $IC_{50}$ values of the chloroform fractions from leaf, stem, and root as well as the n-BuOH and EtOAc fraction from root on cell proliferation were $1.2{\pm}0.4$, $17.2{\pm}6.4$, $81.8{\pm}33.2$, $40.8{\pm}8.0$, and $237.1{\pm}85.6\;{\mu}g/mL$, respectively. On the other hand, the EtOAc fractions, and the $CHCl_3$ fraction significantly inhibited collagen-, arachidonic acid-, U46619-, and thrombin-induced platelet aggregations. The $IC_{50}$ values of EtOAc fraction from leaf, and the $CHCl_3$ and EtOAc fraction from stem were $214.1{\pm}12.2$, $134.3{\pm}2.5$, and $42.6{\pm}7.0\;{\mu}g/mL$ with collagen, $312.4{\pm}7.5$, $158.9{\pm}1.7$, and $82.2{\pm}2.7\;{\mu}g/mL$ with arachidonic acid, $31.1{\pm}2.4$, $48.7{\pm}0.3$, and $29.7{\pm}1.1\;{\mu}g/mL$ with U46619, and $36.7{\pm}2.4$, $69.1{\pm}11.3$, and $34.2{\pm}0.1\;{\mu}g/mL$ with thrombin, respectively. Taken together, these data provide new evidence that fractions from Allium victorialis var. platyphyllum (AVP) are able to inhibit vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation and platelet aggregation, which may be a novel resource for the development of anti-atherothrombotic agents.
Saururus chinensis has long been widely used in oriental folk medicines to treat diseases. In the current study, organic solvent fractions obtained from the main methanolic extract of S chinensis were evaluated for their antioxidative and related physiological activities. The antioxidant activity of the fractions was measured using DPPH free radical scavenging activity, increased in a dose-dependent manner, and the $ED_{50}$ of the ethyl acetate fractions exhibited a value of 12.84 ${\mu}g/ml$ higher than 27.22 ${\mu}g/ml$ compared to the BHT. Also, the cell viability of S. chinensis on $H_2O_2$-induced HDF cell death ($IC_{50}$) showed the highest cell viability of 89.39% in 50 ${\mu}g/ml$ of ethyl acetate fraction and 67.98% of visible cell survival rate in n-butanolic fraction. Meanwhile, all fractions of the S. chinensis extract led to a slight down regulation of the mRNA expression of fibulin-5, which is related to skin elasticity, and the ethyl acetate fraction having high antioxidant activity showed a markedly inhibitory effect on chick embryonic angiogenesis using the CAM assay. These results suggest that the ethyl acetate fraction of S. chinensis extract could be a good material in therapeutic application for antioxidant and related anti-angiogenesis activities.
This study was carried out to evaluate cytotoxic effects of Poncirus trifoliata Raf. extract on lymphocytic leukemia tumor (L1210) cell lines. Disruptions in cell organelles were determined by 3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide (MTT) assay The comparison of Ic50 Values of Poncirus trifoliata Raf. extract in L1210 cell lines showed that their susceptibility to these fractons decreased in the following order: adriamycin > Fr.4> Fr. 6> Fr. 5> Fr. 3> Fr. 1> Fr. 2 by the MTT assay. In order to develop an antumicrobial agent, Poncirus trifoliata Raf. was extracted wit ethanol, and then it was fractionated with several mobile phase. The antitumor activities of fractions of the ethanol soluble extract was investigated. The minimal inhibitory concentrations (MIC) of fractions of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. against microorganisms were also examined. Antimicrobial activities of ampicillin and ketoconazole as references were compared to those of fractions of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. The antimicrobial activities of all fractions from the extract had growth inhibition activities against gram-positive bacteria, gram-negative bacteria and fungi $(MIC\;>\;200{\mu}g/ml)$. These results suggest that fraction 4 of the ethanol soluble extract of Poncirus trifoliata Raf. possessed the most antitumorous agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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