Rotavirus A (RVA) is recognized as a major etiology responsible for the development of acute gastroenteritis in children worldwide. The purpose of the present study was to perform the molecular characterization of RVA. A total of 323 stool specimens collected from hospitalized children with acute gastroenteritis in Chiang Rai, Thailand, in 2016-2018 were identified for G- and P-genotypes through RT-PCR analysis. RVA was more prevalent in 2017-2018 (37.8%) than in 2016-2017 (23.2%). The seasonal peak of RVA occurred from March to April. G3P[8] was predominant in 2016-2017 (90.6%) and 2017-2018 (58.6%). Other genotypes including G1P[8], G8P[8], G9P[8], and mixed infections were also identified. G3P[8] strains clustered together in the same lineage with other novel human equine-like G3P[8] strains previously identified in multiple countries and presented a genotype 2 constellation (G3-P[8]-I2-R2-C2-M2-A2-N2-T2-E2-H2). Several amino acid differences were observed in the antigenic epitopes of the VP7 and VP8* capsid proteins of the equine-like G3P[8] compared with those of the RVA vaccine strains. The homology modeling of the VP7 and VP8* capsid proteins of the equine-like G3P[8] strains evidently exhibited that these residue differences were present on the surface-exposed area of the capsid structure. The emergence of the equine-like G3P[8] strains in Thailand indicates the rapid spread of strains with human and animal gene segments. Continuous surveillance for RVA is essential to monitor genotypes and genetic diversity, which will provide useful information for selecting rotavirus strains to develop a safe and effective RVA vaccine that is efficacious against multiple genotypes and variants.
In order to use nervous necrosis virus (NNV) virus-like particles (VLPs) as a delivery tool for heterologous antigens or plasmids, we attempted to produce red-spotted grouper nervous necrosis virus (RGNNV) VLPs displaying a partial region of viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) glycoprotein at the surface and VLPs that are harboring DNA vaccine plasmids within the VLP. A peptide encoding 105 amino acids of VHSV glycoprotein was genetically inserted in the loop region of NNV capsid gene, and VLPs expressing the partial part of VHSV glycoprotein were successfully produced. However, in the transmission electron microscope analysis, the shape and size of the partial VHSV glycoprotein-expressing NNV VLPs were irregular and variable, respectively, indicating that the normal assembly of capsid proteins was inhibited by the relatively long foreign peptide (105 aa) on the loop region. To encapsulate by simultaneous transformation with both NNV capsid gene expressing plasmids and DNA vaccine plasmids (having an eGFP expressing cassette under the CMV promoter), NNV VLPs containing plasmids were produced. The encapsulation of plasmids in the NNV VLPs was demonstrated by PCR and cells exposed to the VLPs encapsulating DNA vaccine plasmids showed fluorescence. These results suggest that the encapsulation of plasmids in NNV VLPs can be done with a simple one-step process, excluding the process of disassembly-reassembly of VLPs, and NNV VLPs can be used as a delivery tool for DNA vaccine vectors.
Kim, Kiju;Choi, Jong-Young;Lyoo, Kwang-Soo;Hahn, Tae-Wook
Korean Journal of Veterinary Research
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v.58
no.3
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pp.143-146
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2018
The capsid protein of porcine circovirus type 2 (PCV2) encoded by open reading frame 2 (ORF2) is important for neutralizing activity against PCV2 infection. This study investigated the heterogeneity of the ORF2 gene of PCV2 isolated in Korea during 2016-2017. The results revealed that PCV2d is currently the predominant genotype. Moreover, comparison of ORF2 from 17 PCV2 isolates revealed 88.3-100% homology at the nucleotide (deduced amino acid 86.3-100%) level. Interestingly, 61.5% (8/13) of the PCV2d isolates had glycine at position 210. These data provide a useful information for PCV2 epidemiology in Korea.
Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2002.10a
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pp.118-120
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2002
Genetic materials including DNA plasmid are effective delivery vehicle to express interesting gene efficiently and safely not to generate replication competent virus. Moreover, it has advantages to design a better vector and to simplify manufacturing and storage condition. To understand a possible pathogenic mechanism by a flavivirus, West Nile virus (WNV), WNV genome sequence was aligned to other pathogenic viral genome. Interestingly, WNV capsid (Cp) amino acid sequence has some homology to HIV-l Vpr protein. These proteins induce apoptosis in human cell lines as well as in vivo and cell cycle arrest. Therefore, DNA plasmid carrying apoptosis-inducing and cell cycle arresting viral proteins including a HIV-1 Vpr and a WNV Cp protein can be useful for anti-cancer therapeutic applications. This WNV Cp protein is an early expressed protein which can be a reasonable target antigen (Ag) for vaccine design. Immunization of a DNA construct encoding WNV Cp protein induces a strong Ag-specific humoral and Th1-type immune responses in animal. Therefore, DNA plasmid encoding apoptotic viral proteins can be useful tool for therapeutic and prophylactic applications.
The antigenic proteins of Lymphocystis disease virus (LCDV) from tumors of olive flounder, Paralichthys olivaceus, are described following characterization by mass spectrometry. In SDS-PAGE, predominant protein bands were observed at 114, 88, 70, 54, 52, 47, 42 and 24 kDa. Western blot analysis showed that antisera reacted strongly at molecular weights of 114, 67 and 54 kDa, and reacted weakly at molecular weights of 74, 70, 36, 24 and 22 kDa. In the identification of LCDV antigenic proteins by matrix-assisted laser desorption ionization (MALDI) TOF mass spectrometry, 10 of 14 excised bands consisted mostly of proteins with amino acid sequences that matched LCDV-C (lymphocystis disease virus isolate China) ORFs. Strong antigens with molecular weights of 114, 67 and 54 kDa were identified as LDVICp236 (chromosome segregation ATPase), LDVICp033 (membrane bound metallopeptidase) and LDVICp157 (hypothetical protein), respectively. Minor antigens with molecular weights of 70, 36, 24 and 22 kDa proteins were identified as LDVICp160 (acetyl-coA hydrolase), LDVICp213 (hypothetical protein), LDVICp039 (hypothetical protein) and LDVICp213 (hypothetical protein). However, the major capsid protein (LDVICp043) did not react with the polyclonal antibody.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.15
no.8
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pp.5412-5418
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2014
The red seabream iridovirus (RSIV), which belongs to the iridoviridae, causes infectious fish diseases in many Asian countries, leading to considerable economic losses to the aquaculture industry. Using the yeast surface display (YSD) technique, a new experimental system was recently developed for the detection and identification of a variety of marine viruses. In this study, a coat protein gene of RSIV was synthesized based on the nucleotide sequence database and subcloned into the yeast expression vector, pCTCON2. The expression of viral coat proteins in the yeast strain, EBY100, was detected by flow cytometry and Western blot analysis. Finally, they were isolated from the yeast surface through a treatment with ${\beta}$-mercaptoethanol. The data suggests that the YSD system can be a useful method for acquiring coating proteins of marine viruses.
Jun activation domain-binding protein 1 (Jab1) is involved in various cellular mechanisms including development in Drosophila and mouse, cell cycle control and signal transduction pathways. Recent studies also determined that Jab1 functions as a nuclear exporter and inducer of cytoplasmic degradation for several proteins including p53, p27, capsid of West Nile virus, and Smad4/7 proteins. In particular, p53 is shown to bind to and to be exported into the cytoplasm by Jab1, which helps to maintain low levels of p53 under normal conditions. This review was undertaken in an effort to understand the biological significance of the homeostasis of p53 as maintained in the presence of Jab1. Based on our observations, we have provided potential mechanistic hypotheses for the nuclear export of p53 in coordination with Jab1 and the role of other factors in these processes.
The complete nucleotide sequences of both RNA of an isolated Barley mild mosaic virus (BaMMV) from Iksan, Korea, have been determined. RNA1 was 7273 nucleotides long and encodes for a polyprotein of 2261 amino acids, which contains the eight putative functional proteins. RNA2 was 3520 nucleotides long and encodes for a polyprotein of 894 amino acids, which contains two functional proteins. Results of multiple sequence alignment showed 92.9% similarity with Na1 isolate, followed by Sil, UK(F), Asl1, Remis M and UK(M) isolates, respectively. Comparison of the BaMMV-Iks polyproteins with the corresponding proteins of BaMMV-Na1 isolates showed 95% amino acid sequence identity. The phylogenetic analysis revealed that Iks isolate was closely related to Na1 strain and have a common origin.
Lymphocystis disease virus (LCDV) was detected from olive flounder Paralichthys olivaceus, painted glass fish Chanda baculis, gourami Trichogaster leeri and rockfish Sebastes schlegeli, and proteins of the viruses were compared. The major capsid protein (MCP) gene-specific primer sets successfully amplified approximately 1300 bp nucleotides from the olive flounder and 600 bp nucleotides from painted glass fish, gourami and rockfish isolates, respectively. In western blotting analysis using anti-LCDV mouse polyclonal serum, major antigenic proteins had 21, 26, 45, 50, 80, 110 and 120 kDa in olive flounder, 26, 47 and 80 kDa in painted glass fish, 26, 46, 80 and 92 kDa in gourami, 26, 44, 49, 80 and 105 in rockfish, respectively. All the marine and freshwater isolates showed only common antigens of approximately 26 kDa and 80 kDa. These results suggest that antigenic protein profiles of LCDVs may vary depending upon fish species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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