It is important to obtain semen with good quality for efficient fertilization and pregnancy. To obtain these semen, various methods have been developed but most of these methods are time consuming and require costly equipment. Therefore, the objective of this research is to investigate the usability of column filtration system as quick and simple method to get sperm with better quality. Ejaculates were obtained from 5 dogs and analyzed with basic quality parameters before each filtration. Sperm concentration was adjusted to $5{\times}10^7/ml$ after dilution. The experimental groups were divided into non-filtered group(control) and filtered groups(glass wool, Sephadex 5% and Sephadex 20%). Ejaculates were filtered through each filter system and assessed by recovery rate of sperm, motility, normal morphology, CFDA/PI stain and plasma membrane integrity(hypo-osmotic swelling test, HOST). The lowest recovery rate of spermatozoa was recorded in glass wool filtration group, followed by 20% Sephadex filtration group(p<0.05). There was no significant difference between control(non-filtered) and 5% Sephadex filtration poop. Also, there was no significant difference of sperm motility assessed under light microscope among experimental groups. Morphological normality of canine spermatozoa was the highest in the glass wool filtration group and the lowest in the 5% Sephadex filtration group with no significant differences versus 20% Sephadex filtration and control group, respectively(p<0.05). Viability of canine sperm assessed by CFCA/PI staining was the highest in the glass wool filtration poop with no significant difference versus the control group, and the lowest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, respectively(p<0.05). HOS values of canine sperm was the highest in the 20% Sephadex filtration group with no significant difference versus 5% Sephadex filtration group, and the lowest in the control poop with no significant difference versus glass wool filtration group, respectively(p<0.05). Therefore, these results indicated that filtration treatment for extended canine sperm would be useful method to get sperm with better quality by trapping the damaged sperm, consequently filter would be physical barrier against injured or immotile sperm.
개 정액의 정장은 정자를 동결 보존하기전 정액에서 제거되어진다. 그러나 근래 개정장이 정자를 냉각하고 동결하는데 유효한 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 그러므로 본 연구에서는 정자를 냉각과 동결하기 전 정장을 정자 희석액에 첨가하여 정장이 정자의 생존성에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 건강한 4마리의 수캐로부터 정액을 채취 혼합한 후 300g에서 10분간 원심분리하여 얻은 상층액을 다시 원심분리하고 상층액을 회수하여 정장으로 사용하였다. 정자의 희석액으로는 Egg yolk-Tris(EYT)를 사용하였다. 다음과 같이 두 가지 실험을 실시하였다. 실험 1: 정장이 0, 20, 40, 80, 100%비율로 포함된 EYT배지에 정자를 희석하여 두 시간 동안 $4^{\circ}C$나 $25^{\circ}C$에서 보관하였다. 정자수는 $2{\times}10^8/ml$로 조정하였다. 실험 2: 전체적으로 9개 실험군으로 구분하여 4개 실험군은 정장이 20, 40, 80, 100%포함된 EYT배지에 각각 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. 나머지 4개의 실험군은 EYT배지에 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 각각 정장이 20, 40, 80, 100%포함된 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. 대조군으로서 정장을 포함하지 않은 EYT배지에 정자를 희석하여 $4^{\circ}C$까지 냉각한 후 EYT+1.2 M glycerol배지로 2차 희석하여 동결하였다. glycerol의 최종농도는 0.6M, 정장의 최종농도는 10, 20, 40, 50%이었으며, 정자수는 $1{\times}10^8/ml$로 조정하였다. 정자를 straw에 충진하고 분당 $25^{\circ}C$의 냉각율과 액체질소를 이용하여 동결하였다. 융해는 $38^{\circ}C$에서 1분간 실시하였다. 정자 운동성, 정자 형질막 보존성(생존력), 정자 첨단체의 보존성을 검사하여 정자의 생존성을 검증하였다. 정자의 운동성은 400배율에서 현미경으로 관찰하였으며 생존력과 첨단체 보존성은 각각 이중형광염색과 Pisum sativum agglutinin을 이용하여 검사하였다. 실험 1의 결과는 보존온도와는 관련없이 희석액에 정장을 첨가하는 것은 정장이 포함되지 않은 희석액과 비교하여 정자의 운동성을 향상시키지 못했다. 실험 2 결과, 동결 전 냉각상태에서 정장을 포함한 EYT+0.6 M glycerol배지에 희석되었던 정자가 정장을 포함하지 않은 EYT+0.6 M glycerol배지보다 높은 진행운동성을 보였다(P<0.05). 그러나, 동결 융해 후 정장을 포함한 EYT+0.6 M glycerol배지에 희석되었던 정자의 생존력은 정장을 포함하지 않은 EYT+0.6 M glycerol배지보다 낮거나 비슷하게 나타났다. 본 실험의 결과를 요약하면 비록 정장이 동결보호제가 포함되지 않은 EYT에 혼합되었을 경우는 냉각되어진 정자의 생존성을 향상시키지는 못했으나 동결보호제가 포함된 EYT에 정장을 혼합한 경우 정장은 정자의 냉각 후 정자의 운동성을 향상시켰다.
Biotransformation of pharmacologically inactive lactone prodrug simvastatin (SV) into pharmacologically active simvastatin ${\beta}$-hydroxy acid (SVA) exhibits inter-species differences due to variations in amount and activity of esterase enzymes. In this study, we investigated the pharmacokinetics (PK) of SV and its metabolite SVA following oral doses of SV from controlled-release (CR) tablets and immediate-release (IR) tablets in rodent and canine animal models that features different esterase activity. In rat PK study, no SV was detected in plasma for both formulations due to rapid hydrolysis of SV into SVA by plasma esterase. Besides, no significant differences in PK parameters of SV or SVA were observed between both species. In dog PK study, the relative oral bioavailability of CR tablets in terms of SV was 72.3% compared to IR tablets. Regarding formulation differences in dogs, CR tablets exhibited significantly lower $C_{max}$ (p<0.05), and higher $T_{max}$ (p<0.01) and MRT (p<0.01) for both SV and SVA compared to IR tablets. Accordingly, CR tablets of SV with prolonged drug release profiles in both species might be a potential candidate for a more effective delivery of SV with reduced side effects. Besides, similar PK parameters of SV and SVA in both species despite variation in enzyme activities suggested involvement of equally potent biotransformation pathways in these animal species.
Naturally occurring canine transmissible venereal tumors of genital organs in mature and regressive stages from 6 dogs were examined by transmission electron microscope. The tumor cells at the stage of maturation were comprised of large round and ovoid cells with prominent nuclei and nucleoli, a few spindle-shaped cells, and irregularly shaped cells. The mature round cells were characterized by the presence of a central ovoid to irregularly round nucleus with a large eccentric nucleolus, vesicular endoplasmic reticulum, round to oval swollen mitochondria with few cristae, Golgi's apparatus, and plasma membranes with numerous microvilli. As the tumor degenerated, the tumor cells were increased in the number of spindle-shaped, fibroblast-like and irregularly shaped cells, collagen bundles, and mainly lymphocytes, in contrast to those of the stage of maturation. Regressing tumor cells were characterized by the swelling and vacuolation of mitochondria and endoplasmic reticulum, membrane-bound granules, lamellar complex, tubular structures, and dense bundles of collagen. It was suggested that transformation might occur in the course of tumor growth causing morphological change from the round to the fibroblast-like cells, and that there was the evidence of cell-mediated tumor cell lysis by lymphocyte infiltration.
Heterotopic abdominal homograft of canine heart was carried out in 20 pairs of dogs. Of these 12 cases were subjected as a control and 8 were subjected to immunosuppressive group. The dosage of immunosuppressive agent was 5mg/kg/day of Imuran [Azathioprine] for 3 days preoperatively, 10mg/kg on operative day and 5mg/kg/day postoperatively. For reducing the metabolic demand, the donor heart was preserved in 4degree heparinized saline solution for approximately I4 minutes. In the most of the cases, transplantation was performed with the technique of end-to-side aorto-aortic anastomosis and end-to-side pulmonary artery-inferior vena cava anastomosis at the infrarenal portion. Five out of 20 grafted dogs were survived more than one day. The longest survived 18 days in the control group and survive more than 60 days in the treated group. The survival cases were 3 out of 8[37. 5%] in the group of dogs treated with lmuran and 2`out of 12 [16.6%] in the group of non-treated. A prominent gross findings of the grafted heart was a minimal to moderate degree of dilatation of the heart with or without thrombosis in the cardiac chambers and/or anastomotic site. The case number 10, 15, and 19 showed moderate hypertrophy in grossly. The microscopic findings were as follows; 1. There were early hypersensitive histologic reactions such as interstitial edema, cellular infiltrations and early degenerative changes in the myocardium in the cases of 3 hour survival. 2. In the cases of more than 6 hours survival, organizing thrombosis of myocardial vessels, vasculitis,myocardial necrosis and lymphocyte, plasma cell, round cell infiltrations were noted. In the cases of more than 12 hours survival, the degree of these histologic changes especially in the non-treated group were more intensified than in the treated. 3. In the cases which survived more than one day, so called homograft specific histologic changes were milder in the immunosuppressive group compared with the control. 4. All the host hearts showed no evidence of pathologic findings histologically. Among the homologous canine cardiac transplantation tissue reaction, was milder and suvival time longer in the group treated with immunosuppressive drug.
정액 동결 방법들은 지속적으로 향상되어 왔지만 융해 속도에 대한 연구는 여전히 정립되어 있지 않다. 따라서, 본 연구의 목적은 동결 후 융해 속도가 정액의 기능에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 비글견으로부터 채취된 정액은 동결 보존 후 다른 융해 속도 ($37^{\circ}C$/1분 or $70^{\circ}C$/15초)에서 융해 되었다. 융해 후, 운동성, 생존성, 정상 형태율, 형질막 온전성, phosphatidylserine (PS) translocation, 세포내 $H_2O_2$ 수준을 평가하였다. $70^{\circ}C$에서 융해된 정자는 $37^{\circ}C$에서 융해된 정자에 비해 향상된 정자 운동성, 생존성, 정상 형태율, 세포막 온전성, non-PS translocation을 보였으나(P < 0.05), $70^{\circ}C$와 $37^{\circ}C$에서 융해된 실험군간 세포내 $H_2O_2$ 수준에서 유의적인 차이는 나타나지 않았다(P > 0.05). 결론으로, $70^{\circ}C$에서의 융해는 개 정자 동결 후 정자 기능을 증진시켰으며, 적절한 융해 온도는 동결 정자의 기능을 향상시킬 수 있을 것으로 판단된다.
A case of necrotizing meningoencephalitis was described in a 3-year-old female pug dog. Significant histopathological changes were confined to the brain. Histopathologically, brain lesion of the pug dog was characterized by (1) severe lymphocyte, plasma cell and macrophage infiltration in the meninges and gray and white matter of the cerebral hemisphere, (2) perivascular mononuclear cell cuffing and (3) focal polioencephalomalacia in the gray matter of cerebrum. Replicate sections of the brain and lung were negative for fungal infection, canine distemper and toxoplasmosis on PAS stain and immunohistochemistry, respectively. Based on clinical signs, histopathological and immunohistochemical studies, this case was diagnosed as necrotizing meningoencephalitis in pug dog that had not been preriously described in Korea.
Chun, Ju Lan;Bang, Han Tae;Ji, Sang Yun;Jeong, Jin Young;Kim, Minji;Kim, Byeonghyeon;Lee, Sung Dae;Lee, Yoo Kyung;Reddy, Kondreddy Eswar;Kim, Ki Hyun
Journal of Animal Science and Technology
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제62권1호
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pp.58-63
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2020
The pre-treatment condition affects on the element analysis of inductively coupled plasma (ICP). In this study the pre-treatment condition of ICP has been studied to quantify elements in dog's hair. The hair samples were collected from twelve female Beagles by clipping them into 1 or 2 cm at the back neck. The qualitative and quantitative analysis of elements in hairs were performed by using ICP. By ICP nine elements were qualitatively detected and quantitatively analyzed (Ca, Cu, Fe, K, Mg, Na, P, Se, Zn). The measured amounts of elements were compared between 3 step and 2 step procedures which were with and without the acetone based washing step. The quantitative analysis showed that the concentrations of K, Na, P, and Se were significantly decreased in hair samples with acetone-based washing (p < 0.005 or 0.001) unlike those without the acetone-based washing. It implied that some minerals are lost by the acetone based washing during the sample preparation step. Therefore, the acetone based washing process is not suitable for quantifying elements in dog's hair. In addition, the results of qualitative and quantitative analysis were compared. Although there was a difference in absolute values of elemental contents in hair, the results of qualitative and quantitative analysis were significantly correlated each other. This finding suggested that the results of qualitative analysis can be used to monitor elemental contents in dog's hair.
A 10-year old female Yorkshire terrier with nasal discharge and swelling was referred to the local animal hospital. Abnormal mass of right nasal cavity was detected in physical examination and radiography. According to the radiographs of the head, there was an evidence of bony destruction in right nose. Oronasal fistula was detected in right maxillary canine teeth. After surgical excision, the sample of nasal mass was refereed to Pathology Department of Veterinary Medicine in Jeju National University. Grossly, the enlarged mass was soft and 3 ${\times}$ 3 cm in size. Histopathologically, the neoplastic mass was composed of tubular to tubulopapillary structures which were lined by single to 6~7 layers of cuboidal to ciliated columnar cells. These neoplastic cells showed invasive tendency to adjacent normal parenchyma. They had uniform, round to oval nuclei, cytoplasm with small vacuoles and indistinct cellular margin. The number of mitotic figures was varied in different areas, ranged from 0 to 4 per high power field. Necrotic foci and infiltration of inflammatory cells including neutrophils, lymphocytes, and plasma cells also presented in the mass. Immunohistochemically, the neoplastic cells demonstrated strong positive reaction for cytokeratin (CK) 18 but were negative for CK 7 and 8. Based on the gross, histopathology and immunohistochemistry, this mass was diagnosed as nasal adenocarcinoma originated from respiratory epithelium.
Seo, Min-Gyeong;Park, Seil;Han, Seonyoung;Kim, Ah-Young;Lee, Eun-Joo;Jeong, Kyu-Shik;Hong, Il-Hwa
Journal of Veterinary Science
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제23권4호
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pp.61.1-61.10
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2022
Background: Although there are growing demands for stem cell-based therapy for companion animals in various diseases, a few clinical trials have been reported. Moreover, most of them are the results from only one or a few times of stem cell injection. Objectives: The aim of this study is to describe a long-term treatment with allogeneic adipose-derived stem cells (ASCs) in a dog with rheumatoid arthritis (RA), which is a rare canine disease. Methods: The dog with RA received intravascular injection of allogeneic ASCs derived from two healthy donors once a month for 11 months. To assess therapeutic effects of ASCs, orthopedic examination and clinical evaluation was performed. Cytokines of tumor necrosis factor-α and interleukin-6 in the plasma were measured using ELISA analysis. Results: Despite this repeated and long-term administration of allogeneic ASCs, there were no side effects such as immunorejection responses or cell toxicity. The orthopedic examination score for the dog decreased after ASCs treatment, and the clinical condition of the dog and owner's satisfaction were very good Conclusions: Although ASCs has been suggested as one of the options for RA treatment because of its anti-inflammatory and immunosuppressive functions, it has never been used to treat RA in dogs. The present report describes a case of canine RA treated with allogeneic ASCs for long-term in which the dog showed clinical improvement without adverse effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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