This study was carried out to obtain the information for growth characteristics of crown gall tumor and hairy root transformed by Agrobacterium spp,. on the media with phytohormones, casein hydrolysate and activated charoal. Crown gall tumors and hairly roots were formed respectively on potato tuber discs infected by tumerfaciens A ch 5 and A.rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. PCR analysis of Rol C and Vir C gene fragments confirmed that crown gall root was prompted on the medium containing 2,4-D 2mg/l with casein hydrolysate lg/l. The survival ration of crown gall tumor callus derived from potato increased on medium containing the activated charcoal 0.5∼0.2mg/l because of the prevention, on the other hand, hairly roots were necrosis on the same medium. Callus derived from hairly root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2.4-d 2mg/L and casein hydrolysate lg/l.
This study was carried out to obtain the information for growth characteristics of crown gall tumor and hairy root transformed by Agrobacterium spp,. on the media with phytohormones, casein hydrolysate and activated charoal. Crown gall tumors and hairly roots were formed respectively on potato tuber discs infected by tumerfaciens A ch 5 and A.rhizogenes ATCC15834. These tumors and roots could be grown on the phytohormone free media. PCR analysis of Rol C and Vir C gene fragments confirmed that crown gall root was prompted on the medium containing 2,4-D 2mg/l with casein hydrolysate lg/l. The survival ration of crown gall tumor callus derived from potato increased on medium containing the activated charcoal 0.5∼0.2mg/l because of the prevention, on the other hand, hairly roots were necrosis on the same medium. Callus derived from hairly root were excellently grown for a short time by suspension culture on liquid medium containing 2.4-d 2mg/L and casein hydrolysate lg/l.
벼 약배양 배지에 첨가되는 배지응고제의 종류와 농도가 캘러스형성 및 식물체재분화에 미치는 영향을 구명하기 위하여 실험한 결과는 다음과 같다. 배지응고제인 Bacto agar(Difco, 04140-01), Agrose(Sigma, Type 1) 0.4% 처리에서 각각 39%, 55%의 캘러스형성율을 보였으나 농도가 높아질수록 캘러스 형성율이 현저하게 감소하였다. Gelrite(Kelco, 143364)의 0.2~0.8%처리에서는 농도에 따른 차이가 인정되지 않았으며 0.6% 처리에서 44%의 캘러스 형성율을 보였다. 고농도 배지응고제 처리에서 형성된 캘러스는 생장이 늦은 반면 작고 단단하며 백색에 가까운 배발생적인 특성을 보였다. 식물체재분화율은 고농도 배지응고제 처리에서 형성된 캘러스에서 양호하였으며, 또한 고농도 배지응고제가 첨가된 식물체분화배지에서 높았다. 저농도 배지응고제 처리에서 형성된 약치상후 60일된 캘러스는 식물체 재분화율이 급격히 감소하였다. 치상된 약에 대한 최종적인 식물체분화 효율을 향상시키기 위해서는 0.6∼0.8% Gelrite 첨가배지에서 형성된 캘러스를 1.6% Bacto agar 및 Agarose 또는 0.8% Gelrite 식물체분화배지에 이식할 것을 추천한다.
This study was conducted to evaluate the effect of thidazuron(TDZ) on shoot proliferation and growth from axillary buds of 20-years-old Corylopsis coreana. Shoots proliferation was effectively achieved on WPM(Woody Plant Medium) supplemented with 0.03∼0.1mg/L TDZ. The highest shoot number(6.5$\pm$0.7) was obtained on 0.1mg/L TDZ treatment. On the TDZ medium shoots formed as clusters less than 1cm in height and therefore needed to subculture on GA$_{3}$ containing medium to induce elongation. In consecutive cultures, phenolic compounds were excreted at the proximal part of the explants and inhibited growth of the explants. Growth inhibition by the compounds was overcome using liquid and paper bridge culture system. About 60% of the elongated shoots rooted on half- strength MS medium containing IBA. Generally, IBA was mire effective on in vitro rooting than NAA with optimal range of 0.5mg/L to 1.0mg/L. Rooted plantlets were transferred in an artificial soil(vermculite) and acclimatized in high humidity greenhouse condition. Survival rate differed greatly depending on rooting types of the explants. Two types of rooting were observed. The first type was direct rooting from the explants. The second type was callus formation followed by rooting from the callus. The explants showing the 1st type rooting survived can be multiplicated in vitro by TDZ treatment followed by elongation with GA$_{3}$ and rooting with IBA.
4주 배양된 애기장대의 엽육조직으로부터 원형질체를 분리하여 2.0mg/L NAA, 0.5mg/L BAP및 9% mannitol이 포함된 MS 액체배지에서 $25^{\circ}C$, 암조건에서 배양하였다. 원형질체 유래 microcolonies를 dehydration시켜 배양하였을 때 non-dehydration에 비해 7배의 높은 캘러스 유도율을 나타내었다. Dehydrated microcolonies들 중에서 50개의 캘러스를 선별하여 0.05 mg/L NAA, 7mg/L 2-iP가 첨가된 MS배지에서 광조건으로 배양하였을 때 점차적으로 녹화되기 시작하였으며 배양 4주 후부터 전체적으로 녹화된 SF캘러스에서 green spots이 형성되었다 Shoot형성률은 식물생장조절물질의 종류에 따라 3.5%~56%로 나타났다. 재분화된 shoot는 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 MS배지에서 뿌리를 유도하였으며 이들을 토양에 이식하여 완전한 재분화 식물체를 얻을 수 있었다. Shoot 형성과정을 조직학적인 측면에서 관찰한 결과, 배양초기에는 신장된 무정형의 세포가 대부분이었으나 배양이 진전됨에 따라 주위 세포들과 구별이 뚜렷한 도관요소 (tracheary element)와 분열조직군 (meristemoid)이 형성되면서 shoot primodia가 shoot로 발달되는 것을 관찰할 수 있었다. 재분화 식물체는 형태적으로 normal type이 78%이고 abnormal type이 22%였다.
벼의 약배양 배지 내에 콜히친 첨가에 의한 염색체 배가 방법을 확립하기 위하여, 콜히친의 농도를 0.001∼0.1 mg/L까지 조절하여 약배양하였을 때 콜히친의 농도가 증가할수록 캘러스 형성률과 식물체 분화율은 점점 감소하였으며, 그 감소폭은 농도가 증가됨에 따라 점점 커지는 경향이었다. 자포니카 3품종과 통일형 1품종을 콜히친이 첨가되지 않은 배지에 약배양하였을 때 반수체의 출현빈도가 50%이상 높게 나타난 반면, 이배체는 40% 이하의 낮은 발생빈도를 나타내었다. 그러나 0.001 mg/L의 콜히친이 약배양 배지에 첨가될 경우 품종에 따라 다소간의 차이는 있으나, 반수체의 출현빈도는 상대적으로 감소되고 이배체의 발생 비율이 54.3∼60%로 증가하였다.
A specific deleted version of ARABIDOPSIS RESPONSE REGULATOR1 (ARR1) lacking the signal receiver domain (1.152 amino acids)-coding sequence, referred to as $ARR1{\Delta}DDK$, was amplified using Arabidopsis thaliana cDNA prepared from adult leaves and transferred into the genome of Nicotiana tabacum cv. Samsun under the transcriptional control of a ${\beta}$-estradiol-inducible expression system. The ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ affected the morphology of transgenic seedlings and their segments in vitro. In the presence of an inducer, ${\beta}$-estradiol, ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ induced only the formation of soft, pseudo-bulbous tissue in the root tip region of intact seedlings, which appeared similar to callus generated on a hypocotyl segment in the presence of 2,4-D and 6-benzyladenine (BA), both at $1\;{\mu}M$. Those callus tissues on the root tip region could not generate shoots unless $1\;{\mu}M$ BA was supplied. In segment culture, ectopic expression of $ARR1{\Delta}DDK$ induced calluslike tissue around the cut-end of cotyledon and hypocotyl segments with occasional shoot formation, suggesting that the expression of $ARR1{\Delta}DDK$ could substitute for the effects of cytokinin on these segments. Additionally, treatment with only ${\beta}$-estradiol induced NtWUS, a WUS ortholog in tobacco, which was detected during the process of callus tissue formation in the root tip region and also in cotyledon or hypocotyl segments. These findings suggest that the NtWUS might be associated in the transdifferentiation process caused by the functional regulation of $ARR1{\Delta}DDK$ in transgenic tobacco seedlings.
Park, Gyu-Hwan;Kim, Dai-Hee;Kim, Jin-Ho;Choi, Yong-Hwa;Oh, Jung-Youl;Kwon, Yong-Sham;Kim, Myung-Min
Journal of Life Science
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제12권1호
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pp.19-21
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2002
The pathway of embryos formed anther culture in herbaceous peony was influenced by addition of 2,4-D. MS medium with 2,4-Dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) alone did not arise direct embryogenesis, but was proliferate callus. Embryos through calli were produced on medium containing 0.2 mg/1 zeatin or without growth regulators. Direct embryogenesis was obtained from MS basal medium. However, after the anthers were cultured on medium with 0.1 mg/1 2,4-D, 3 g/1 AC, 30 g/1 sucrose, 2 g/1 gelrite for 40 days. Its efficiency (32.3 %) was markedly improved when anthers cultured on medium without 2,4-D. Embryo morphology was also affected by the 2,4-D used in medium. The induction of normal embryos with two cotyledons was higher in the embryos formed through direct embryogenesis than those formed callus. The embryos formed from calli were mainly showed abnormal embryo with one, three, four cotyledons or hors and bowling pin type.
The $F_1$ hybrid Red Coat is one of the most highly sought after cultivars of tomato in Australia and yields up to 7.5 $\cal{kg/plant}$. An experiment was conducted to de-termine the optimal strength and type of growth medium and sucrose concentration for shoot organogenesis of the Red Coat cultivar using cotyledonary explants. Two basal growth media, viz. MS and Gamborg' s $B_5$ at 0, 1/4, 1/2, full or double strength along with sucrose concentrations of 0, 0.5, 1.5, 3 or $5\%$, were evaluated using 25 replications. The main effects of treatment and their mutual interactions were evaluated for the proportion of explants that produced callus and/or shoots, number of shoots produced per explant, callus diameter and shoot height. The explants failed to produce shoots in the absence of mineral nutrient. Only a small proportion of the explants ($6\%$ with $B_5\;and\;3\%$ with MS) regenerated shoots in the absence of sucrose. Lower sucrose concentrations ($0.5-1.5\%$) along with full strength media were optimal for most of the traits studied. The $B_5$ medium outperformed MS medium for shoot organogenesis. For all the traits examined, significant differences in main effects (P < 0.05) and two-way interactions were detected, but no three-way interactions (medium type $\times$ medium concentration $\times$ sucrose concentration) were observed. Sucrose was found essential for the development of chlorophyll. Chlorophyll content increased with an increase in sucrose concentration up to $3\%$ and decreased at $5\%$ sucrose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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