In order to find therapeutic agents for porcine pneumonia, we screened far antibacterial activities of methanol extracts of 81 higher plants against four pathogenic microorganisms of Heamophilus parasuis, Pasteurella multocida, Actinobacillus pleuropneumonia, and Bordetella bronchiseptica, and found the bark of Cinnamomi cortex showed potent activities. Since this was inexpensive, we purified active compounds from it. The structures of the final active fractions were obtained through an activity-guided fractionation and their antibacterial activities are reported here.
The detection of Bordetella bronchiseptica which is supposed to be an agent of the infectious atrophic rhinitis of swine, is likely to receive more attention in the future as the pork industry comes to realize that eradication of this infection from breeding herds is a practical possibility. Experiments described here were carried out to establish the rapid plate agglutination test for the detection of the infectious atrophic rhinitis of swine in the field using the criteria of antigen preparation, effects on the antigenecity after storing of the antigen and reaction appearing time. Also, the agglutinabilities between the plate and tube method were compared and the degree of pathological lesions were recorded in relation to tube agglutination titers. Obtained results were as follows: 1. No differences were noted in the agglutinabilities on the plate agglutination test between the treatments in antigen preparation-formolized, merthiolate-killed and living organism. 2. The agglutinability of the antigens did not show any significant changes until 10 weeks of storage at 4 C; however, after 10 weeks of storage, non-specific reaction was observed with the HPCD control sera. 3. The results of the plate and tube agglutination tests were not comparable but the effective use of the plate method in Bordetella bronchiseptica eradication programs in pigs especially in the sow is stressed as a screening test.
Swine respiratory diseases have induced severe economic losses in swine industry worldwide. Several methods have been developed and applied to prevent and control the disease. However, those are still problematic in swine industry. Recently, the use of egg yolk antibodies with several advantages was introduced and applied to control diseases in animal as well as human. As the first step of the use of egg yolk antibodies in the control of the swine respiratory diseases, we investigated the immunogens of the causative agensts of the diseases and immune response in egg yolk of hens immunized with them. Bacterial antigens prepared from Bordetella bronchiseptica, Pasteurella multocida 3A and 4D, and Actinobacillus pleuropneumaniae serotype 2 and 5 were analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, Western blot and toxicity test in mice. The antigens were injected into laying hens in order to produce antibodies against them in egg yolk. After chickens were immunized three times in 2 weeks interval, the profile of antibody production was examined by ELISA. The production of antibody in egg yolk was started in 2 weeks after the first injection, reached peak in 6-8 weeks and maintained until 12 weeks. Of two adjuvants used in this study, ISA70 was more effective than aluminum hydroxide gel in enhancing immunogenecity, laying rates and safety in hens. These results suggested that egg yolk antibodies could be a good source for production of antibodies specific to pathogenic bacteria inducing respiratory diseases of swine.
For prevention of atrophic rhinitis of swine by Bordetella bronchiseptica and fowl typhoid by Salmonella gallinarum, bacterial strains showing antimicrobial activity against those pathogenic bacteria were isolated from various samples collected at animal farms. Among 372 bacterial isolates strain TK3 showed the highest antibacterial activity against both pathogens, and was identified as Bacillus amyloliquefaciens by 16S rRNA gene sequence analysis. B. amyloliquefaciens TK3 could inhibit growth of both pathogens by secretion of antibacterial compounds such as siderophore, rhamnolipid and antimicrobial peptide. Production radius of siderophore on Chrome azurol S agar plate by strain TK3 was 0.53 cm after 14 days of incubation, and concentration of siderophore in King's B medium was 1.06 mmol/ml. It also secreted 82.4 mg/L of rhamnolipid, and antimicrobial peptide that completely inhibited growth of both pathogens at concentration of $30{\mu}l/ml$ in LB medium.
돼지의 전염성위축성비염(傳染性萎縮性鼻炎)의 주요한 병원균(病原菌)이라고 생각되는 Bordetella bronchiseptica(이하(以下)B균(菌)) 자연감염돈분리유내균주(自然感染豚分離由來菌株)를 사용하여 mouse 비강내정착성(鼻腔內定着性)에 관(對)한 사균면역(死菌免疫)의 효과(效果)를 검토하고자, 먼저 상변리(相變異)에 따르는 균(菌)의 독역(毒力)과 감염방어성(感染防禦性)을 비교함과 동시에, I 상균불활화예방액(相菌不活化豫防液)의 면역원성(免疫原性)에 관(對)한 기초적인 검토를 실시하였고, 이에 계속하여 생균비강내접종(生菌鼻腔內接種)에 따르는 균(菌)의 정착성(定着性)과 혈중응집(血中凝集) 항체(抗體)의 경시적(經時的)인 추이(推移)를 검토하였다. 얻어진 성적을 요약하면 다음과 같다. 1. B균(菌) I 상균(相菌)(W-1029주(株))의 독역(毒力)은 III 상균(相菌)(H-969주(株))에 비하여 독역(毒力)이 강하였으며, I 상균(相菌)은 감염방어성(感染防禦性)을 보유하고 있었으나 III 상균(相菌)은 감염방어성(感染防禦性)이 전혀 없었다. 2. B균(菌) I 상균사균면역(相菌死菌免疫)에 있어서 formalin과 merthiolate 처리(處理) 및 불활화온도(不活化溫度)($0^{\circ}C$및 $37^{\circ}C$)간(間)에는 현저한 면역원성(免疫原性)의 차이는 인정할 수 없었다. 3. 사균면역(死菌免疫)을 실시한 mouse 군(群)에 생균(生菌)의 경비접종(經鼻接種)에 의하여 경시적(經時的)으로 균(菌)의 호흡기도내(呼吸氣道內)의 정착성(定着性)과 혈중응집항체가(血中凝集抗體價)의 추이(推移)를 보았던 바, 비면역대조군(非免疫對照群)에 비하여 면역군(免疫群)은 현저한 면역효과(免疫效果)를 나타내었으나, 면역군(免疫群)에서 간헐적(間歇的)인 배균(排菌)이 상당기간에 걸쳐 인정되었으며 또한 응집항체가(凝集抗體價)의 상승에 따르는 비강내정착균(鼻腔內定着菌)의 완전소실(完全消失)은 다소 곤난함이 인정되었다. 이상(以上)의 성적(成積)으로 B균사균항원(菌死菌抗原)을 사용하여 고도(高度)의 면역(免疫)을 시킴으로서 비강내(鼻腔內)에 있어서의 B균(菌)의 정착(定着)을 조지(阻止)할 수 있는 가능성(可能性)이 시사(示唆)되나 항체가(抗體價)의 상승(上昇)에 따르는 균(菌)이 비강내(鼻腔內)에서 완전 소실(消失)이 다소 곤난한 점은 본균(本菌)과 호흡기도점막감염(呼吸器道粘膜感染)의 실태(實態)를 시사(示唆)하는 것으로 보아진다.
Kim, Bong-hwan;Tak, Ryun-bin;Cho, Gil-jae;Jang, Hee-kyung
Korean Journal of Veterinary Research
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v.31
no.4
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pp.457-469
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1991
Clinical and bacteriological observations on infectious atrophic rhinitis of swine were conducted in order to obtain some basic information for the clinical and immnnological control of the disease prevailing in the republic. Samples were collected from nasal cavities of 135 4~12 week old pigs from 12 herds and from turbinates of 199 slaughtering pigs from 14 swine herds to investigate the prevalence of Bordetella bronchiseptica and/or Pasteurella multocida in the nasal cavities of the pigs. On the examination of nasal swabs by cultural techniques and of gross lesion of snouts of slaughtering pigs, all the swine herds investigated were found to be affected by atrophic rhinitis and a total of 84 B bronchiseptica and 139 P multocida cultures were isolated from the nasal cavities of the pigs. Of the 199 slaughtering pigs, some 48% revealed gross pathological lesion typical of atrophic rhinitis and the prevalence of B bronchiseptica and P multocida were 27.6% and 46.7%, respectively. Biochemical properties, antimicrobial susceptibilities, serological characteristics and toxigenicity of the isolates of B bronchiseptica and P multocida were investigated.
The immune-stimulating activities of Bordetella bronchiseptica antigens containing dermonecrotoxin (BBD) loaded in chitosan microspheres (CMs) have already been reported in vitro and in vivo with a mouse alveolar macrophage cell line (RAW264.7) and mice. Therefore, this study attempted to demonstrate the successful induction of mucosal immune responses after the intranasal administration of BBD loaded in CMs (BBD-CMs) in colostrum-deprived pigs. The BBD was introduced to the CMs using an ionic gelation process involving tripolyphosphate (TPP). Colostrum-deprived pigs were then directly immunized through intranasal administration of the BBD-CMs. A challenge with a field isolate of B. bronchiseptica was performed ten days following the final immunization. The BBD-specific IgG and IgA titers, evident in the nasal wash and serum from the vaccinated pigs, increased with time (p<0.05). Following the challenge, the clinical signs of infection were about 6-fold lower in the vaccinated pigs compared with the nonvaccinated pigs. The grades for gross morphological changes in the turbinate bones from the vaccinated pigs were also significantly lower than the grades recorded for the nonvaccinated pigs (p<0.001). Therefore, the mucosal and systemic immune responses induced in the current study would seem to indicate that the intranasal administration of BBD-CMs may be an effective vaccine against atrophic rhinitis in pigs.
During 2 years from Octorber 1992 to April 1994, prevalence of general respiratory diseases and atrophic rhinitis in the pig herds located in the Western Chungnam was investigated, and isolation of B. bronchiseptica was attempted for the pigs manifested with the clinical signs of atrophic rhinitis(AR). The isolates were characterized and identified in aspects of biochemical properties, antigenicity, drug sensitivity and pathogenicity. The results obtained through the experiments are summarized as follows; 1. During 2 years of investigation, the overall prevalence of the general respiratory diseases in the pi8 herds in Western Chungnam was 35.3%, consisting of 35.1% in the pig farms and 38.8% in a slaughter house. The prevalence by age groups accounts for 9.2% in adults, 44.7% in rearings and 25.3% in sucklings. By farm size, The highest prevalence of 56.5% was observed in the smallest farm with 1 to 200 heads. 2. The prevalence of clinical cases of artrophic rhinitis was recorded by 12.7% in the group that is the sows and piglets vaccinated, 28.9% in the group that is the sows only vaccinated and 39.8% in the group of the non-vaccinated groups. In the slaughter house, 53(24.8%) of 214 pigs examined exhibit the AR lesions. 3. A total of 189 strains of B. bronchiseptica were isolated from the pig herds. Isolation rates were 12.6% in the group that is the sows and piglets vaccinated, 34.1% in the group that is the sows only vaccinated and 45.7% in the group of the non-vaccinated groups. Isolation rate in the specimen from the slaughter house was 93( 43.5% ) of 214 pigs examined. Of the AR-non-vaccinated group, the piglets aged bet- ween 61 to 90 days revealed the highest isolation rate of 58.5%. 4. The titers of antibody against B. bronchiseptica were measured by tube agglutination test. The group that is the sow and piglet-vaccinated showed the highest titer of 640-2, 560 in sow and 640longrightarrow5, 120 in piglet. The group that is the sows only-vaccinated revealed 640-2, 560 in sows and 640-1, 280 in piglets. Both of the vaccinated groups showed 100% positive reaction. The group of the non-vaccinated sho-wed relatively lower titer of 0-1, 280 in both of sows and piglets. The positive rate of the sera obtained from the slaughter house was 53.3% with the antibody titer of 0-1, 280. 5. Biochemical and serological properities of 189 isolates were very similar to those of the reference B. bronchiseptical phase I type, indicating that most of isolates are B. bronchiseptica phase I type. 6. In antimicrobial drug susceptibility, 87.3% of 189 isolates was susceptible to chloramphenicol, 79.9%, to amikacin, 64.6%, to cephalothin and less than 35.4% to others. 7. In agar-gel immunodiffusion and SDS-PAGE analysis, the isolates presented the identical antigenicity and protein profiles to the reference standard strains. 8. The whole cells and bacterial filtrates of the isolates were inoculated to guinea pigs and mice. The isolates showed the hish pathogenicity and dermonecrotoxiciy.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.15
no.6
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pp.323-330
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1979
Epidemiological and etiological studies were carried out on infectious atrophic. rhinitis of swine (AR) at Suncheon district in Jeonnam during from July to October in 1978, and trials for the elimination of Bordetella bronchiseptica (B. bronchiseptica) fr
Atrophic rhinitis (AR) is the one of important respiratory diseases and causes severe economic losses in pig industry. Severe attempts have been made to reduce the economic losses by preventing the disease. One of the methods is the spraying of antibiotics into nasal cavity of piglets. Recently, the efficacy of the spraying with kanamycin and gentamicin was reduced in the Korean swine industry. Therefore, the preventive methods have been required to be changed based on the antimicrobial susceptibility profiles of causative agents of swine AR. Based on the current situations of this disease, Bordetella (B.) bronchiseptica and Pasteurella (P.) multocida 4D were isolated from pigs with clinical signs of AR. The isolation rates of B. bronchiseptica and P. multocida 4D were 58.5% and 32.9%, respectively. In the antimicrobial susceptibility test, the bacteria were resistant to kanamycin and gentamicin which have been used as the spraying agents, but they were susceptible to amikacin. A new spraying agent was developed using amikacin using ${\beta}$-glucan and yakbaltag as supplementary agents. Field efficacy of the agent was carried out with different schedule. The results from this study suggested that the newly developed spraying agents might be helpful to prevent AR in swine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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