환경호르몬 비스페놀 A가 Xiphophorus maculatus의 생식에 미치는 영향을 알아보기 위하여 수컷을 100 ppb, 200 ppb, 400 ppb, 800 ppb의 농도에 3개월간 노출시킨 후 정상의 암컷과 교배시켜 치어수를 계수하여 수컷의 수정능력을 확인하였고, 치어를 6개월 동안 비스페놀 A에 노출시켜 치어의 암수비율, 기형율, 사망률 및 형태학적으로 정자형성과정을 조사하였다. 3개월간 비스페놀 A에 노출시킨 수컷과 정상인 암컷을 교배시켜 얻은 치어수는 정상대조군에서 평균 $19.00{\pm}3.02$마리였으나 비스페놀 A의 농도가 증가함에 따라서 치어수는 100 ppb에서 $11.50{\pm}2.22$마리, 200 ppb에서 $6.40{\pm}2.76$마리, 400 ppb에서 $5.70{\pm}1.34$마리 및 800 ppb에서 $3.70{\pm}2.11$마리로 감소하는 경향을 보였다. 치어의 암수비율은 비스페놀 A의 농도와 전혀 상관이 없었고 기형과 사망률은 0%였다. 노출시킨 지 6개월 후 정자형성과정은 800 ppb에서도 정상적으로 일어나고 있었다. 이상과 같이 비스페놀 A는 성전환, 수컷의 비율감소, 기형 및 사망에는 전혀 영향을 주지 않았고 단지 출생 개체수에만 영향을 주었다.
본 논문에서는 경제적이며 일회용 센서칩으로 제작 가능한 스크린프린팅한 탄소칩 전극[screen printed carbon electrode(SPCE)]에 다중벽 탄소 나노 튜브, 전도성고분자 및 티로시나아제를 융합하여 제작된 나노복합체를 도포한 센서를 개발하고 이를 내분비 저하 물질이면서, 비만, 당뇨병 및 심혈관질환 등의 만성질환 및 성조숙증, 여성 생식 질환, 불임 등과 관련성이 입증된 비스페놀A 농도 분석에 적용하고자 하였다. 다중벽 탄소 나노 튜브를 산화시켜 음전하를 띠게 한 후 양전하를 띠는 전도성고분자인 polydiallyldimethylammonium (PDDA)로 감싸준 후 용액의 pH를 조절하여 음전하를 띠게 한 티로시나아제를 첨가하여 최종적으로 산화된 다중벽 탄소 나노 튜브-PDDA-티로시나아제 나노복합체를 형성하였다. 상기 나노복합체를 물리적으로 흡착시킨 센서칩 표면을 비스페놀A 용액에 접촉시키고, 비스페놀A가 티로시나아제와 2단계의 효소-기질반응을 할 수 있는 충분한 시간(3분)을 주면, 생성물[4,4'-isopropylidenebis(1,2-benzoquinone)]이 생성된다. 이 때 순환전압전류법과 시차펄스전압전류법을 이용하여 생성물[4,4'-isopropylidenebis(1,2-benzoquinone)]을 환원(-0.08V vs. Ag/AgCl)하였을 때 얻어진 전류값 변화를 측정하여 비스페놀A의 농도를 정량적으로 분석하였다. 추가적으로 개발한 센서 전극표면에 비스페놀A와 유사한 비스페놀S 방해물질을 비스페놀A와 함께 접촉하였을 때 비스페놀A에 대한 우수한 선택성을 확인하였다. 최종적으로 제작한 센서를 실험실에서 제작한 환경 시료안에 비스페놀A의 농도를 분석하는 데 적용함으로써 실제 현장에서 활용될 수 있는 가능성을 시사하였다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.118.2-119
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2003
This study was undertaken to assess overall effects of bisphenol A, a monomer widely used in manufacturing polycarbonate plastics or epoxy resin, exposure on immune system of mice. For in vitro evaluation, serial concentration of SPA was added into culture of various immune cells from normal female ICR mice, and for in vivo or ex vivo assessment, mice were orally exposed to BPA dissolved in olive oil as doses of 500, 1000, 2000 mg/g b.w. for acute expose or 100, 500, 1000 mg/kg/day b.w. 5days a week for subacute exposure. (omitted)
내분비계 장애물질로 잘 알려진 bisphenol A (BPA)를 단일탄소원으로 이용하여 균체성장을 나타내는 미생물 87주를 공단주변의 토양, 폐수 혹은 활성슬러지로부터 분리하였다. 분리된 균주 중 균체성장이 우수한 균주 8중을 2차 분리하였으며, 이 중 BPA분해효율이 뛰어난 3종의 균주를 BPA분해미생물로 최종 선별하였다. 최종 선별된 3종의 균주를 16s rDNA의 부분적 염기서열 및 형태학적, 생리학적 특성조사를 통해 Serratia maycescens 1901, S, marcescens 1902 그리고 Pseudomanas putida 1401로 동정되었다. BPA분해능은 HPLC분석을 통해 배양액중의 잔존 BPA 농도로 측정하였으며, 최종 선별된 3종의 균주를 대상으로 BPA가 100 mg/1흑은 500 mg/l의 농도로 포함된 최소 무기염 배지(PAS) 및 비타민을 포함하는 PAS인 PAV 배지에서 배양하여 BPA 분해능을 조사한 결과 20-40%의 분해효율을 나타내었다. 이들 균주의 균체성장은 PAS 배지에서 보다 PAV배지에서 우수하였다. S. marcescens 1901은 저농도(100 mg/l) BPA에서 분해효율이 다른 2종의 균주보다 우수하였고, S. marcescens 1902와 P. putida 1401은 고농도(500 mg/l)에서 BPA분해효율이 높았다. 선별된 3균주의 순수배양과 흔합배양에 의한 BPA분해효율을 비교한 결과, 유의한 차이는 나타나지 않았다.
Over the a few decades, the incidences of obesity and associated metabolic syndrome diseases have been increased dramatically and resulted in a global health crisis. Recent findings suggest endocrine disrupting chemicals (EDCs) as an obesogen, because they disrupt normal development and homeostatic controls over adipogenesis and energy balance in obesity. Furthermore, risk of cardiovascular disease and mortality is elevated among those who were obese during childhood. Thus, we focused on etiology of obesity in children and performed biological monitoring of bisphenol A (BPA), which is a broadly exposed EDC in environment. Study subjects were age and sex-matched obese and normal children in Seoul (N=52; age, $8.67{\pm}1.46$ years). Exposure levels of BPA were analyzed with HPLC/FLD as a conjugated form in urine. As results, ranges of urinary BPA were 0~54.38 ${\mu}g/g$ creatinine (median, 4.57 ${\mu}g/g$ creatinine). Levels of urinary BPA were 1.7 fold higher in the obese children than those in the controls (medians of obese and control children, 7.31 and 4.25 ${\mu}g/g$ creatinine, respectively, p=0.22). In the near future, enlarge scaled studies should be performed to confirm the risk of BPA for obesity.
In order to investigate the effects of bisphenol A (BPA) on cell mediated immune reaction in vitro we examined the allogenic mixed lymphocyte reaction (MLR), splenocytes proliferation (SP) to T cell mitogens and IFN-${\gamma}\;production$. Splenocytes of Balb/c mice ($1.5{\times}10^5$ cells/well) were co-cultured with different numbers of mitomycin C-treated mature dentritic cells (DCs) in presence of BPA (25, 50, 100 ${\mu}M$) and $[^{3}H]$thymidine incorporation (cpm) was measured by scintilation counting. Splenocytes ($2{\times}10^6$ cells/well) were cultured with mitogens, Con A ($2\;{\mu}g/ml$), PHA ($5\;{\mu}g/ml$) and IL-2 ($0.1\;{\mu}g/ml$), or PMA ($5\;{\mu}g/ml$) and INO ($1\;{\mu}g/ml$) in presence of BPA (1, 10, 25, 50, 100 ${\mu}M$) and SP was assessed by MTT assay. $IFN-{\gamma}$ levels in culture supernant were determined by ELISA. At low concentration, BPA slightly increased MLR, SP and $IFN-{\gamma}$ levels, but at higher concentration it showed significant inhibitory effects on these immunological parameters. These results indicate that BPA is able to alternate cell-mediated immune reaction.
다양한 독성물질 및 이들의 대사산물의 효율적인 생물독성 평가시스템이 지속적으로 개발되고 있다. 본 연구에서는 대분비계 교란물질인 endosulfan, bisphenol A, vinclozolin 및 3,5-dichloroaniline을 대상으로 인간 간암세포주, 지렁이, 효모를 이용한 세포독성 및 성장억제 효과를 평가하였다. 인간 간암세포주 독성평가에서는 endosulfan, 3,5-dichloroaniline, bisphenol A의 순으로 독성이 나타났으며, 지렁이 독성평가에서는 endosulfan, bisphenol A, 3,5-dichloroaniline의 순으로 독성이 나타났다. 효모를 이용한 독성평가에서는 3,5-dichloroaniline, endosulfan, bisphenol A의 순으로 독성이 나타나 다른 시스템과는 부분적인 차이가 나타났으며, vinclozolin의 경우 3가지 독성평가 시스템에서 모두 독성이 나타나지 않았다. 이러한 결과는, 동일한 물질을 서로 다른 생물 독성평가 시스템을 사용하여 평가하는 경우, 부분적인 오류가 나타날 수 있음을 암시하고 있으며, 독성 유무 판단은 가능하더라도, 독성 정량평가 및 독성 정도를 비교하는 것은 어렵다는 것을 제시하고 있다. 또한 본 결과는, 다양한 물질 및 이들의 대사산물의 일차적 독성평가에는 지렁이 및 효모시스템이 빠르고 경제적임을 암시하고 있으며, 독성이 인정될 경우 인간세포주 및 동물시험에 의한 검증이 효율적이라고 판단된다.
Background: Bisphenol A (BPA), an endocrine disrupting chemical, has been suspected to pose carcinogenic risks. However, likely mechanisms are obscure and there are difficulties to estimating its real significance for cancer development. Methods: We therefore studied BPA-induced proteomic alterations in immune organs of ICR mice offspring that were prenatally exposed to BPA (15 and 300 mg/L of drinking water). We performed 2D-gel analyses of samples, considering differences in spleen, exposure levels, sex, and ages. Results: From proteomic analyses, we found various proteins were up- or down-regulated by BPA. Among them, SET, a putative oncogene and inhibitor of phosphatase 2A, was significantly down-regulated in a BPA dose-dependent manner. We also confirmed down-regulation of SET in western blot and real time PCR analyses. From gene network analysis, SET is predicted to communicate with other genes including CYP17, which is involved in biosynthesis and metabolism of sex-hormones. Conclusions: This study provided evidence that SET can be applied as a new biomarker for prenatal BPA exposure and suggests a potential new mechanism of action in that BPA may disrupt CYP17 via SET.
Connexins (Cx) are membrane proteins and monomers for forming gap junction (GJ) channels. Cx46 and Cx50 are also known to function as conductive hemichannels. As part of an ongoing effort to find GJ-specific blocker(s), endocrine disruptors were used to examine their effect on Cx46 hemichannels expressed in Xenopus oocytes. Voltage-dependent gating of Cx46 hemichannels was characterized by slowly activating outward currents and relatively fast inward tail currents. Bisphenol A (BPA, 10 nM) reduced outward currents of Cx46 hemichannels up to ~18% of control, and its effect was reversible (n=5). 4-tert-Octylphenol (OP, $1{\mu}M$) reversibly reduced outward hemichannel currents up to ~28% (n=4). However, overall shapes of Cx46 hemichannel current traces (outward and inward currents) were not changed by these drugs. These results suggest that BPA and OP are likely to occupy the pore of Cx46 hemichannels and thus obstruct the ionic fluxes. This finding provides that BPA and OP are potential candidates for GJ channel blockers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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