본 논문에서는 Thalictrum rugosum 식물세포의 회분식 배양에 있어서 동역학적 특성들을 연구하였다. 본 실험에서 alkaloid의 생성은 일반적인 2차대사 산물의 생성 특성과 달리 세포성장에 비례함이 확인되었다. 세포 성장기의 비증식속도는 $0.20~0.25\;day\;^{-1}이었으며 FW / DCW 비가 배양상태를 나타내는 중요한 인자임을 알수 있었다. Cell yield는 0.36g cells/g sugar이었으며 berberine은 139mg/L까지 생성되었고 그중 120mg/L는 세포내에 존재하였다. 이를 specific content로 계산하면 dry cell weight의 1.10%가 된다. 세포 성장기에서 비증식속도와 당농도간의 관계는 Monod kinetics로 잘 기술될 수 있었다.
A mathematical model using local thermodynamic equilibrium isotherms for adsorption in encapsulated adsorbent is proposed in order to optimize the design parameters in situ bioproduct separation process. The model accurately follows the experimental data on the adsorption of berberine, secondary metabolite produced in Thaictrum rugosum plant cell culture. The adsorption rate on encapsulated adsorbent is compared with that on alginate-entrapped adsorbent. The result shows that the higher loading capacity in encapsulated adsorbent is mainly due to the increase in the maximum solid phase concentration. Based on the adsorption rate and loading capacity, the encapsulated adsorbent would be more useful than the entrapped adsorbent when used in situ bioproduct separation process. Design parameters in situ bioproduct separation process, such as the size of the capsule, membrane thickness, the ratio of capsule volume to bulk volume, the ratio of single capsule volume to total capsule volume and the adsorbent content in the capsule, are evaluated by using the model. The ratio of single capsule volume to total capsule volume is the most effective parameter for adsorption of berberine on encapsulated adsorbent.
한약재 70종의 메탄올 추출물을 이용하여 4종의 Staphylococcus epidermidis와 S. aureus에 대한 항균효과를 조사한 결과 모든 공시균주에 대하여 항균성을 나타내는 한약재는 황련, 소목, 오배자, 대황과 단삼으로 조사되었다. 이 중 우수한 항균성을 나타낸 오배자와 황련을 물, 에탄올, 메탄올과 에틸아세테이트를 추출 용매로 하여 추출물을 제조하고 항균성을 조사한 결과 황련 열수 추출물에서 가장 우수한 항균성을 확인할 수 있었다. 황련의 항균성은 berberine에 의한 것으로 가정하고 열수 추출물 중 berberine의 함량을 조사한 결과 13.88%로 조사되었다. Berberine에 의한 항균성과 다른 항생제와의 항균성을 비교하기 위하여 berberine chloride와 3종의 항생제를 이용하여 조사한 결과 600 mg/l 이상의 berberine chloride 농도에서 KCCM 35494 S. epidermidis에 대한 항균성만 나타내었으며 다른 공시균주에 대한 항균성은 확인되지 않았다. 이에 본 연구에 사용한 공시균주에 대한 C. japonica 열수 추출물의 항균성은 고 농도의 berberine 또는 다른 물질에 의한 것으로 판단할 수 있었으며 이 물질에 대한 연구가 필요할 것으로 판단되었다.
본 연구의 목적은 예로부터 약재로 사용되어 온 황백의 대표적인 지표물질 berberine 및 palmatine의 동시 분석법을 개발 및 검증하고 지표물질들의 항산화 효능을 평가하여 해당 물질들에 대한 기초자료를 제공하고자 하였다. 표준물질들의 동시 분석법은 특이성, 직선성, 정확성, 정밀성, 검출한계 및 정량한계를 측정하여 신뢰성을 검증하였으며, 지표물질들의 항산화 활성은 FRAP 활성, reducing power 및 아질산염 소거능 실험으로 측정하였다. HPLC-PDA를 이용하여 berberine과 palmatine의 혼합용액을 분석하였을 때, 두 물질이 간섭 없이 선택적으로 분리되었음을 확인하였다. Berberine 및 palmatine의 검량선의 상관계수 값은 모두 0.9999로 우수한 직선성을 보여 분석에 적합함을 알 수 있었고 정확성과 정밀성은 농도를 알고 있는 황백 시료에 인위적으로 저농도, 중농도, 고농도의 표준물질 혼합용액을 첨가하여 계산하였다. 정밀성과 정확성은 일간실험 및 일내실험으로 확인하였다. Berberine의 일간 및 일내 정밀성은 1.27-1.93%, 0.12-0.56%의 수준으로 나타났고, palmatine의 일간 및 일내 정밀성은 0.19-2.89%, 0.36-1.52%로 % 이하의 우수한 정밀성을 나타냈으며, berberine의 일간 및 일내 정확성은 98.43-100.73%, 99.56-101.45%로 나타났고 palmatine의 일간 및 일내 정확성은 93.20-100.60%, 92.39-97.10%로 나타났다. Berberine과 palmatine의 검출한계는 각각 0.32 µg/mL, 0.35 µg/mL로 확인되었고 정량한계는 0.97 µg/mL, 1.06 µg/mL로 확인되었다. 분석법 검증결과, 확립된 분석법은 특이성, 직선성, 정밀성, 정확성, 검출한계 및 정량한계가 모두 우수한 분석법임을 검증할 수 있었다. 항산화 활성은 FRAP 활성, reducing power 및 berberine과 palmatine 모두 농도 의존적으로 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과를 종합하여 볼 때 황백은 추후 항산화에 도움을 주는 소재로의 적용 및 항염증 효과로 인한 피부 기능개선 제품의 소재로서 활용도가 넓을 것으로 사료되며, 황백 내에 존재하는 항산화물질인 berberine 및 palmatine의 동시분석법을 통하여 성분의 함량을 분석하여 효능을 확인할 수 있을 것으로 사료된다.
황련(C. japonica)의 추출물을 이용하여 사과겹무늬병, 사관탄저병 및 사과푸른곰팡이병에 대한 항균활성을 검정함과 동시에 활성물질을 분리하여 안정성이 있는 천연식물성 농약으로서의 개발 가능성을 검토하고자 시험했던 바, 그 결과를 요약하면 공시균에 대한 황련의 조추출액 $EC_{50}$은 $400{\sim}500{\mu}g/mL$이고 TLC, HPLC 분석을 통한 생리활성물질은 berberine으로 동정되었고 그 함유율은 81.14%였다.
A study was carried out to investigate the possibility of acclimation of Coptis japonica Makino in Korea. Coptis japonica could be grown within 4 years as a medicinal crude drug if it is cultivated in the area of mountain facing north(300m above sea level) with 70% light interception and appropriate soil texture. It is to be noted that the propagation of the plant is more important than the yield of berberine because the berberine contents do not change in different conditions. The results were as follows; 1. The germination rates of the seeds by covering with the pine tree leaves were the highest and averaged 63%. 2. The germination rates of dry seeds were not affected in spite of low temperature and $GA_3$ treatment. 3. The germination rates of the seeds stored in moistured sand were averaged 85%, but in dry state, they were not germinated. 4. The number of leaves and fresh weight of Coptis japonica from the area of mountain facing north were increased significantly. 5. The growth and fresh weight of Coptis japonica were reduced in clay. 6. The best growth was obtained under 70% light interception. It is possible to intercrop between evergreen trees. 7. The foliage dressing did not affect the growth. 8. The number of leaves and fresh weight were increased from the 3rd year, and the average weight of rhizomes was 5.7g in 4th year. 9. The berberine contents of the rhizomes of Coptis japonica under various treatment conditions ranged from 9 to 10%. Coptidis Rhizoma from this study and from Korean market showed much higher berberine contents than those from Japanese market.
Objectives : Hwangnyeonhaedok-tang(HNHDT) is the one of well-known traditional herbal formula and has been widely used for the treatment of various diseases in Korea. For the quality improvement of commercial traditional herbal formula, we investigated the quality of prepared HNHDT. Methods: We measured the contents of baicalin, berberine and geniposide in the HNHDT Ex preparations on the market by HPLC and compared with the official notice of ingredients. Results: In 3 preparations of HNHDT covered with the national health insurance(NHI), the content of baicalin was various from 32.83mg to 185.05mg, the total berberine was $12.0{\sim}50.75mg$ and geniposide was $12.57{\sim}44.84mg$. Contents of marker ingredients in NHI Preparations were below the standard and showed a large variation. In 7 non NHI Preparations of HNHDT and the standard(STD) HNHDT manufactured in laboratory, the content of baicalin was $37.16{\sim}115.69mg$, the total berberine was $5.62{\sim}28.43mg$ and geniposide was $10.98{\sim}113.47mg$. But, because composition of non-NHI preparations is different from NHI preparations, every maker's contents were up to the notice for baicalin and berberine. There was newly enforced standard regulations of geniposide in non-NHI preparations, so contents of geniposide was up to that standard only in JI and STD. Conclusions: There was a large variation of contents in the HNHDT Ex preparations on the market and the quality differences were existed between NHI and non-NHI preparations of HNHDT. Further studies for evaluation of efficacy differences and standardization of manufacturing processes are necessary.
This study examined hwangbek dyeability for cotton, silk, and wool from different tree species and origin as well as their berberine and palmatine content. A total of 12 different hwangbek were examined, six purchased directly from different locations of China and six purchased from the Seoul Medicine Market. Hwangbek purchased from China were 3 Kwanhwangbek (Phellodendron amurense Rupr.) from Jilin, Liaoning, Heilongjiang and 3 Chunhwangbek (Phellodendron chinense Schneid.) from Sichuan, Yunnan, and Guangxi. Hwangbek purchased from the Seoul Medicine Market included 3 hwangbek that originated from Korea and 3 hwangbek imported from China. We extracted 2.5g of each hwangbek into 500mL of water for 60 min at $80^{\circ}C$. Dyeing was conducted using the IR dyeing machine for 30min at $55^{\circ}C$ using a 1:100 liquor ratio. Cotton was mordanted using tannic acid followed by potassium antimonyl tartrate trihydrate treatment before dyeing. Berberine and palmatine pigments in hwangbek were identified with the HPLC-DAD-MS instrument and the amount of pigment was quantified using an ion chromatogram. The results indicated that the K/S values of dyed fabrics were highly related to the amount of pigment in hwangbek used for dyeing.
In this study, Aftertreatment properties of PCM/Nylon sheath/core fabrics have been determined. Especially, the relationship between finishing property and content including of PCM ratio. Samples of PCM/Nylon fabrics were monitored, separately, with 2% o.w.f solutions of each of the berberine chloride, cetylpyridinium chloride(CPC), benzyldimethylhexadecyl ammonium chloride(BDHAC) and dodecyltrimetyl ammonium bromide(DTAB). Various temperatures and liquor ratio and pH conditions were also studied to optimize aftertreatment properties. Berberine chloride finished sample showed the good color fastness. Cetylpyridinium chloride(CPC) finished sample showed very effective antibacterial properties against Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumoniae.
The purpose of this study is the separation of biologically active ingredients from Coptidis Rhizoma which has been widely used as one of oriental herbal medicine for body fever. In this study, berberine-type alkaloids were tested on their biological activities in the aspect of antibacterial, antitumor, anti-herpetic and anti-HIV activity. Contents of five major alkaloids for the various origin of Coptidis Rhizoma were assayed by HPLC. As the results, the content of berberine from Coptis chinensis and Coptis japonica were 6.78% and 7.09%, respectively. The contents of coptisine, jatrorrhizine, berberastine from Coptis chinensis were higher than those of Coptis japonica. The amount of palmatine from both species were almost the same. Surprisingly for antitumor experiment, all compounds have been shown remarkable activity, especially against SNU-l(human stomach cancer) cell line. Among the compounds purified through column chromatography, palmatine, coptisine, and jatrorrhizine inhibited the growth of K-562(human chronic myelogenous leukemia) cell line whereas jatrorrhizine has been shown the effective inhibition of A-549 (human lung) cell line at the same time.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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