Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2018.10a
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pp.127-127
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2018
Probiotics are microorganisms that have beneficial effects on the health of the host. The health promoting effect by probiotics influences suppressing harmful bacteria, prevention of constipation, blood cholesterol reduction and regulation of blood pressure. Prebiotics are used to promote the growth or activity of microorganisms. Synbiotics, which are a mixture of probiotics and prebiotics, synergize in the intestines by complementing each other. Synbiotics not only improves the viability of the probiotics while passing through the gastrointestinal tract, maintain intestinal homeostasis, but also regulate balance of harmful and useful bacterial growth. Glycine max Merr (GMM) has been widely used in Asian countries to treat cancer, obesity, oxidative stress and imbalanced immune diseases. In addition, it has been reported that dietary fiber-rich grains promote bowel movements and prevent constipation. In this study, we investigated the viability of LactobacillIus buchneri (L.buchneri) strains, known as lactic acid bacteria under conditions of gastric fluid and intestinal fluid to determine the suitability of L.buchneri as probiotics. The adhesion ability of L.buchneri to caco-2 cells was also confirmed. The present studies showed that GMM extract promoted the growth and activity of L.buchneri strains as prebiotics. Also, this results suggested that the mixture of L.buchneri and GMM extract can helps maintain intestinal health and healthy body as synbiotics and health functional food material.
The authors studied the viability and pH of Lactobacillus casei which was isolated from the Yakult in terms of its storage temperature time(days). The following results have been obtained: (1) The viability test to Lactobacillus casei under storage in 4$\circ$C temperature condition in 35 days, has shown that the original population of $4.0\times 10^8$ organisms was decreased to $0.1\times 10^8$, under storage in 10$\circ$C temperature the organisms to $0.08\times 10^8$, in room temperature the organisms to $0.009\times 10^8$, and in 35$\circ$C temperature the organisms to $0.0009\times 10^8$. The correlation coefficient of storage period (days) and number of bacterial viability were significant as r=0.956(p<0.01) in 4$\circ$C, r=-0.999 (p<0.01) in 100C, r=0.975(p<0.01) in room temperature and r=-0.923(p<0.01) in 35$\circ$C. (2) The pH test to Lactobacillus casei unde.r storage in 4$\circ$C temperature condition for 35 days has shown that the original pH of 3.54 were acidified to 3.35, under storage in 10$\circ$C temperature the pH were acidified to 3.20, in room temperature the pH were acidified to 3.15, and in 35$\circ$C temperature the pH were acidified to 3.0. The correlation coefficient of variation of pH between storage period (days) and temperature were significant as r=-0.972(p<0.01) in 4$\circ$C, r=-0.922 (p<0.01) in 10$\circ$C, r=-0.963 (p<0.01) in room temperature and r=-0.953 in 35$\circ$C.
VBNC (Viable but nonculturable) state is an adaptive response of cells in adverse environments, which lead cell not grow on routine nutrient agar. In this study, we induced VBNC in Escherichia coli using copper and verify the characterization of it. After treatment of copper, we didn't detect any cells via plate cultivation, namely, colony forming unit (CFU) was zero. However, we identified the existence of VBNC by staining live cells with Live/Dead BacLight bacterial viability kit and counting them through flow cytometry. Then we isolated genomic DNA and RNA from VBNC-induced cells and analyzed the stability of them. Degradation of RNA is more severe than that of DNA and RNA is degraded as specific fragments. In addition, we showed the morphology of VBNC cell by Bio-Transmission Electron Microscope (Bio-TEM). VBNC cell showed impaired periplasmic space and inner and outer membrane were separated and the amount of cytosol were significantly decreased.
Cho, Kyungwon;Lee, Si Young;Chang, Beom-Seok;Um, Heung-Sik;Lee, Jae-Kwan
Journal of Periodontal and Implant Science
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v.45
no.2
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pp.38-45
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2015
Purpose: The purpose of this study was to evaluate the effect of photodynamic therapy (PDT) using erythrosine and a green light emitting diode (LED) light source on biofilms of Aggregatibacter actinomycetemcomitans attached to resorbable blasted media (RBM) and sandblasted, large-grit, acid-etched (SLA) titanium surfaces in vitro. Methods: RBM and SLA disks were subdivided into four groups, including one control group and three test groups (referred to as E0, E30, E60), in order to evaluate the effect of PDT on each surface. The E0 group was put into $500{\mu}L$ of $20{\mu}M$ erythrosine for 60 seconds without irradiation, the E30 group was put into erythrosine for 60 seconds and was then irradiated with a LED for 30 seconds, and the E60 group was put into erythrosine for 60 seconds and then irradiated with a LED for 60 seconds. After PDT, sonication was performed in order to detach the bacteria, the plates were incubated under anaerobic conditions on brucella blood agar plates for 72 hours at $37^{\circ}C$, and the number of colony-forming units (CFUs) was determined. Results: Significant differences were found between the control group and the E30 and E60 groups (P<0.05). A significantly lower quantity of CFU/mL was found in the E30 and E60 groups on both titanium disk surfaces. In confocal scanning laser microscopy images, increased bacterial death was observed when disks were irradiated for a longer period of time. Conclusions: These findings suggest that PDT using erythrosine and a green LED is effective in reducing the viability of A. actinomycetemcomitans attached to surface-modified titanium in vitro.
Kwon, Gicheol;Heo, Bohye;Kwon, Mi Jin;Kim, Insu;Chu, Jaeryang;Kim, Byung-Yong;Kim, Byoung-Kook;Park, Sung Sun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.31
no.4
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pp.592-600
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2021
Probiotics can be processed into a powder, tablet, or capsule form for easy intake. They are exposed to frequent stresses not only during complex processing steps, but also in the human body after intake. For this reason, various coating agents that promote probiotic bacterial stability in the intestinal environment have been developed. Silk fibroin (SF) is a material used in a variety of fields from drug delivery systems to enzyme immobilization and has potential as a coating agent for probiotics. In this study, we investigated this potential by coating probiotic strains with 0.1% or 1% water-soluble calcium (WSC), 1% SF, and 10% trehalose. Under simulated gastrointestinal conditions, cell viability, cell surface hydrophobicity, and cell adhesion to intestinal epithelial cells were then measured. The survival ratio after freeze-drying was highest upon addition of 0.1% WSC. The probiotic bacteria coated with SF showed improved survival by more than 10.0% under simulated gastric conditions and 4.8% under simulated intestinal conditions. Moreover, the cell adhesion to intestinal epithelial cells was elevated by 1.0-36.0%. Our results indicate that SF has positive effects on enhancing the survival and adhesion capacity of bacterial strains under environmental stresses, thus demonstrating its potential as a suitable coating agent to stabilize probiotics throughout processing, packaging, storage and consumption.
LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ and alamarBlue$^{(R)}$ are fluorescent materials used for the enumeration of live and dead bacteria. LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ is generally used for confocal microscopy applications to differentiate live from dead bacteria in a biofilm or planktonic state. AlamarBlue$^{(R)}$ has also been used widely to assay live and dead bacteria in a planktonic state. Whilst these materials are successfully utilized in experiments to discriminate live from dead bacteria for several species of bacteria, the application of these techniques to oral bacteria is limited to the use of LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ in biofilm studies. In our present study, we assessed whether these two methods could enumerate live and dead oral bacterial species in a planktonic state. We tested the reagents on Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Enterococcus faecalis and found that only LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ could differentiate live from dead cells for all five of these oral strains. AlamarBlue$^{(R)}$ was not effective in this regard for P. gingivalis or A. actinomycetemcomitans. In addition, the differentiation of live and dead bacterial cells by alamarBlue$^{(R)}$ could not be performed for concentrations lower than $2{\times}10^6$ cells/ml. Our data thus indicate that LIVE/DEAD$^{(R)}$ BacLight$^{TM}$ is a more effective reagent for this analysis.
Infections are caused due to the infiltration of tissue or organ space by infectious bacterial agents, among which Staphylococcus aureus bacteria are clinically most relevant. While current treatment modalities are in general quite effective, several bacterial strains exhibit high resistance to them, leading to complications and additional surgeries, thereby increasing the patient morbidity rates. Titanium dioxide is a celebrated photoactive material and has been utilized extensively in antibacterial functions, making it a leading infection mitigating agent. In view of the property amelioration in materials via nanofication, free-standing titania nanofibers (pure and nominally doped) and nanocoatings (on Ti and Ti6Al4V implants) were fabricated and evaluated to assess their efficacy to mitigate the viability and growth of S. aureus upon brief (30 s) activation by a portable hand-held infrared laser. In order to gauge the effect of exposure and its correlation with the antibacterial activities, both isolated (only titania substrate) and simultaneous (substrate submerged in the bacterial suspension) activations were performed. The bactericidal efficacy of the IR-activated $TiO_2$ nanocoatings was also tested against E. coli biofilms. Toxicity study was conducted to assess any potential harm to the tissue cells in the presence of photoactivated materials. These investigations showed that the photoactivated titania nanofibers caused greater than 97% bacterial necrosis of S. aureus. In the case of titania-coated Ti-implant surrogates, the bactericidal efficacy exceeded 90% in the case of pre-activation and was 100% in the case of simultaneous-activation. In addition to their high bactericidal efficacy against S. aureus, the benignity of titania nanofibers and nanocoatings towards tissue cells during in-vivo exposure was also demonstrated, making them safe for use in implant devices.
Edwardsiella tarda, a gram (-) pathogen causing edwardsiellosis in farmed fish, was transformed via electroporation with a plasmid expression vector driving the PhiX174 E-lysis gene under the transcriptional control by lambda PR regulatory sequence. The persistent maintenance of the plasmid vector in recombinant E. tarda was found in numerous subculture procedures over up to 6 months without any adverse effect on the original copy number of plasmids. Comparative examination based on semi-quantitative RT-PCR analysis on transcriptional efficiency of E-lysis gene between recombinant E. coli and E. tarda indicated that promoter strength and induction capacity of bacterial ghosts would be retarded in E. tarda as compared to the E. coli. However, the completeness of induction for bacterial ghosts in E. tarda was the same with E. coli, in which at least 99.99% of induction rate was possible and further the viability of recombinant bacteria was completely eliminated by a post-induction procedure including washing and freeze drying lyophilization.
To compare functional Chinese cabbage('Amtak' baechu; F1 hybrid cultivar between Brassica rapa and B. perkinensis, AB) with general Chinese cabbage ('Chunkwang' baechu; general spring cultivar, CB), two kinds of kimchi(ABK and CBK) prepared with AB and CB cultivar were fermented at $10^{\circ}C$ for 10 days. Their fermentative characteristics and anti-proliferative activities against mouse carcinoma cell lines were investigated. General kimchi(CBK) showed mature pH on the $6^{th}$ day of fermentation, whereas functional kimchi(ABK) reached pH on the $9^{th}$ day. CBK also exhibited acidity of mature stage on the $6^{th}$ day, but ABK reached mature acidity on the $9^{th}$ day. Although ABK and CBK were salted in the same condition, ABK had lower salinity than CBK, throughout the fermentation time. The highest total bacterial and lactic bacterial counts of CBK showed on the $8^{th}$ day of fermentation, but ABK showed the highest total bacterial and lactic bacterial counts on the $10^{th}$ day. The texture of ABK was harder than CBK for fermentation time. This seems to be corrleated with the slower fermentation rate of ABK. ABK showed significantly higher anti-proliferative activity (54.6% cell viability of control) in B16BL6 at $1,000{\mu}g/mL$. ABK was also higher in anti-proliferative activity than CBK throughout the fermentation time. However, there was no significant difference in the anti-proliferative activity of ABK between the fermentation times. In conclusion, fermentation of ABK showed a better texture, due to the slow fermentation rate and more anti-proliferative activity against mouse carcinoma cell line than those of CBK.
Purpose: Direct application of atmospheric-pressure plasma jets (APPJs) has been established as an effective method of microbial decontamination. This study aimed to investigate the bactericidal effect of direct application of an APPJ using helium gas (He-APPJ) on Porphyromonas gingivalis biofilms on sandblasted and acid-etched (SLA) titanium discs. Methods: On the SLA discs covered by P. gingivalis biofilms, an APPJ with helium (He) as a discharge gas was applied at 3 different time intervals (0, 3, and 5 minutes). To evaluate the effect of the plasma itself, the He gas-only group was used as the control group. The bactericidal effect of the He-APPJ was determined by the number of colony-forming units. Bacterial viability was observed by confocal laser scanning microscopy (CLSM), and bacterial morphology was examined by scanning electron microscopy (SEM). Results: As the plasma treatment time increased, the amount of P. gingivalis decreased, and the difference was statistically significant. In the SEM images, compared to the control group, the bacterial biofilm structure on SLA discs treated by the He-APPJ for more than 3 minutes was destroyed. In addition, the CLSM images showed consistent results. Even in sites distant from the area of direct He-APPJ exposure, decontamination effects were observed in both SEM and CLSM images. Conclusions: He-APPJ application was effective in removing P. gingivalis biofilm on SLA titanium discs in an in vitro experiment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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