It is clear that the construction of large insert DNA libraries is important for map-based gene cloning, the assembly of physical maps, and simple screening for specific genomic sequences. The bacterial artificial chromosome (BAC) system is likely to be an important tool for map-based cloning of genes since BAC libraries can be constructed simply and analyzed more efficiently than yeast artificial chromosome (YAC) libraries. BACs have significantly expanded the size of fragments from eukaryotic genomes that can be cloned in Escherichia coli as plasmid molecules. To facilitate the isolation of molecular-biologically important genes in Ashbya gossypii, we constructed Ashbya chromosome-specific BAC libraries using pBeloBAC11 and pBACwich vectors with an average insert size of 100 kb, which is equivalent to 19.8X genomic coverage. pBACwich was developed to streamline map-based cloning by providing a tool to integrate large DNA fragments into specific sites in chromosomes. These chromosome-specific libraries have provided a useful tool for the further characterization of the Ashbya genome including positional cloning and genome sequencing.
Human breast milk is a potential source of bacteria for the development of the intestinal microbiota of infants. Several species within the genera Lactobacillus and Bifidobacterium were demonstrated to shape the gut microbiota of infants. In this study, the bacterial diversity was investigated in the breast milk and feces of a mother-infant pair, and probiotic candidates were identified. Importantly, the novel L. gasseri EJL and B. breve JTL strains were isolated from breast milk and infant feces samples, respectively; their completed genome was resolved using de novo sequencing. In addition, the bacterial composition in the infant's feces at 1 week revealed the prevalence of Bifidobacterium and Streptococcus; a higher diversity was observed after 3 weeks. In particular, the abundance of Akkermansia was sharply increased at 7 weeks, further increasing thereafter, up to 15 weeks. Our results suggest that human breast milk and infant's feces are a source of probiotic candidates.
Isolation of pollutant-degrading bacteria is important in bioaugmentation, one of the methods for biological degradation of environmental contaminants. We focused on the magnetic activated sludge (MAS) process as a culture method that efficiently concentrates degrading bacteria, and cultured activated sludge with 1,4-dioxane as a model pollutant. After 860 days of operation, MLVSS, which indicates the amount of sludge, increased from 390 mg/L to 10,000 mg/L, and the removal rate of organic matter including 1,4-dioxane, tetrahydrofuran, and glucose in the artificial wastewater reached up to 97%. Based on these results, the MAS process was successfully used to acclimate activated sludge with 1,4-dioxane. Bacterial flora analysis in the MAS showed that bacteria of the genus Pseudonocardia, already reported as 1,4-dioxane degrading bacteria, play an important role in the degradation of this pollutant. The MAS process is a suitable culture method for acclimation of environmental pollutants, and the findings indicate that it can be used as an enrichment unit for pollutant-degrading bacteria.
During an investigation of unrecorded prokaryotic species in Korea, six unrecorded bacterial strains were isolated from soil samples collected from Uljin-gun. Based on a similarity search using the 16S rRNA gene sequence of the isolated strains and the construction of the neighbor-joining phylogenetic tree, five strains were identified to the genus Pseudomonas of the family Pseudomonadaceae, while one strain was identified as a species belonging to the genus Paenibacillus of the family Paenibacillaceae. The details of these unreported species, including gram staining reaction, colony and cell morphology, basic biochemical characteristics, strain ID, and isolation source, are described in the description of the strains.
This study was conducted to determine the microorganisms inhabitating in sow genital organs and their anti-microbial drug susceptibility During the period between February, 1991 and November 1991, 128 sow genital organs were sampled at six abattoirs. Gross pathological examination and bacterial isolation and identification were performed from the genital organ. In addition, antimicrobial drug susceptibility for the major organisms isolated were examined. 1. Among the bateria isolated from normal genital organs, E. coli(30.7%) Stahylococcus spp.(29.4%), Corynebarterium pyogenes(C. pyogenes) (14.7%), Streptococcus spp.(13.3%) were most freqently isolated, whereas the genera of Klebsiella, Actinobacillus, and Serratia were detected less freqently. 2. Among the bacteria isolated from abnormal genital organs, C. pyogenes,(37.7%), Stahylococcus spp.(30.2%), Proteus spp. (26.4%) , Pasteurella spp. (18.9%) , Steptococcus spp. (9.4%) were most freqently isolated whereas the genera of Pseudomonas, Serratia and Klebsiella were detected less freqently. 3. From sow genital organs showing lesion of endometritis and purulent endometritis C. pyogenes were most freqently isolated, the isolation rate being 67.7% and followed by Stahylococcus spp., E. coli, Proteus spp., Steptococcus spp. and Pasteurella spp. in the order. 4. Antimicrobial drug susceptibility of the major organisms showed that all the isolates were susceptible to cephalothin, ampicillin, chloramphenicol and sulfamethoxazole / trimethoprim, but resistant to penicillin and streptomycin.
Airborne bacteria from hog farms may have detrimental impacts on human health, particularly in terms of antibiotic resistance and pathogen zoonosis. Despite human health risks, very little is known about the composition and diversity of airborne bacteria from hog farms and hog-related spray fields. We used pyrosequencing analysis of 16S rRNA genes to compare airborne bacterial communities in a North Carolina hog farm and lagoon spray field. In addition, we isolated and identified antibiotic-resistant bacteria from both air samples. Based on 16S rRNA gene pyrosequence analysis, Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes, and Proteobacteria were the dominant phyla in airborne bacterial communities from both hog farm and spray field sites. Within the Firmicutes genera, Clostridium spp. were more abundant in the hog farm, whereas Staphylococcus spp. were higher in the spray field. The presence of opportunitic pathogens, including several Staphylococcus species and Propionibacterium acnes, was detected in both bioaerosol communities based on phylogenetic analysis. The isolation and identification of antibiotic-resistant bacteria from air samples also showed similar results with dominance of Actinobacteria and Proteobacteria in both hog farm and spray field air. Thus, the existence of opportunistic pathogens and antibiotic resistant bacteria in airborne communities evidences potential health risks to farmers and other residents from swine bioaerosol exposure.
Six stains of plant growth promoting rhizobacteria were selected through germinating seed assay and root colonization assay. Among them, SKU-78 strain induced significant suppression of bacterial wilt disease in tomato and pepper plants. Seed treatment followed by soil drench application with this strain resulted in over 60% reduction of bacterial wilt disease compared with the control. It was suggested that SKU-78 strain activated the host defense systems in plants, based on lack of direct antibiosis against pathogen. According to Bergey's Manual of Systemic Bacteriology and 16S rDNA sequence data, SKU-78 stain was identified as Bacillus sp. SKU-78.
The internal stipe necrosis of cultivated mushrooms (Agaricus bisporus) is caused by the bacterium Ewingella americana, a species of the Enterobacteriaceae. Recently, Ewingella americana was isolated from cultivated white button mushrooms in Korea evidencing symptoms of internal stipe browning. Its symptoms are visible only at harvest, and appear as a variable browning reaction in the center of the stipes. From these lesions, we isolated one bacterial strain (designated CH4). Inoculation of the bacterial isolate into mushroom sporocarps yielded the characteristic browning symptoms that were distinguishable from those of the bacterial soft rot that is well known to mushroom growers. The results of Gram stain, flagellal staining, and biochemical tests identified these isolates as E. americana. This was verified by pathogenicity, physiological and biochemical characteristics, and the results of an analysis of the 16S rRNA gene sequences and the fatty acids profile. This is the first report of the isolation of E. americana from cultivated white button mushrooms in Korea.
Eight strains producing bacterial cellulose (BC) were isolated from rotten fruits and traditionally fermented vinegars. One of the isolated strains from the rotten grape in Gwangju, Korea, maintained a relatively stable BC production in shaking cultures. This isolated strain proved to be Acetobacter xylinum, based on several biochemical and morphological tests. It was shown that the slant-baffled flask was more efficient than the conventional flask for the BC production in shaking cultures. To determine the most suitable carbon and nitrogen sources for the production of BC, various compounds were examined. Fructose was found to be the most effective carbon source with an optimal concentration of 2%. Mixed carbon source (glucose:fructose=1:3) was also better than glucose or fructose alone. Optimal nitrogen source, when basal medium was used, was 10% (v/v) com steep liquor (CSL). When com steep liquor was used with a mixed carbon source (glucose:fructose=1 :3),4% CSL exhibited the best BC production. Based on these results, a defined medium was developed for the BC production by Acetobacter xylinum KJ-1. When this medium was used under optimal culture conditions, the BC production was 7.2 g/1, which was approximately 3 times higher than that with the traditional HS medium.
This study was perfomed to examine the distribution of causative agent of piglets diarrhea in eastern Chonnam province from February 1994 to March 1995. The causative agents of diarrhea were examined by bacterial culture test, parasitological test and serological test against PED, TGE and Rota. The 35 isolated E. coli were tested for antibiotic sensitivity. The results obtained were as follows. 1. The incidence of 81 piglets with diarrhea was most prevalent as 39.5% in the age of 2 to 4 weeks, compare to 34.6% in the age of 5 to 8 weeks and 16.0% under 1 weeks and 9.9 % in the age of 9 to 11 weeks after birth. 2. The incidence of 81 piglets diarrhea showed bacterial diarrhea(75.3%), viral diarrhea (35.8%) and parasitological diarrhea(18.5%). When compared the isolation frequency of each etiological agent, enteropathogenic E. coli was most prevalent as 55.5% in bacterial diarrhea, rotavlrus enteritis as 18.5% in viral diarrhea and trichuriasis as 13.6% in parasitological diarrhea. 3. The complicated infection of piglets was most prevalent as 41.7% in rotavirus enteritis with enteropathogenic E coli in 24 complicated piglets diarrhea. 4. In antibiotic sensitivity test, isolates showed moderatly resistance to Tobramycin, Amikacin, Imipenem, Trimethoprim/Sulfamethoxazole, Gentamicin, Ampicillin but sensitivty to Ticarcillin/K. The 30 E. coli isolate showed multiple drug resistances in 3 different antibiotics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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