Xanthomonas campestris pv. glycines 8ra causes bacterial pustule disease on susceptible soybean leaves and produces a bacteriocin, named glycinecin, against related bacteria such as Xanthomonas campestris pv. vesicatoria. The antimicrobial activity of the glycinecin was effective to most tested Xanthomonas species. X. c. pv. glycines 8ra was able to produce the glycinecin in liquid media as well as solid media. Maximal productivity of glycinecin was obtained at 3$0^{\circ}C$ in the early stationary phase of growth of the X. c. pv. glycines 8ra. The production of glycinecin was not dependent on the initial inoculum level but on cell density. Glycinecin was very sensitive to proteolytic enzymes such as trypsin and proteinase K but resistant to DNase and RNase. The culture supernatant of X. c. pv. glycines 8ra retained some of its antimicrobial activity after 15 min at 6$0^{\circ}C$. It is stable at wide range of pH. The glycinecin showed the bactericidal activity after the adsorption of the glycinecin to the sensitive bacterial cell.
본 연구에서는 Photobacterium phosphoreum의 배양 및 생체발광을 위한 최적 배지의 개발과 장기저장 후 생체발광능의 회복을 위한 최적의 저장 조건을 확립하고자 하였다. P. phosphoreum을 배양하기 위한 배지로 Luria broth(LB) 배지를 변형한 modified LB(mLB) 배지를 개발하였다. mLB 배지는 Luria broth에 1.5%의 NaCl과 3%의 글리세롤을 보정, 첨가한 배지로, 미생물 생장 및 생체 발광량이 Nutrient broth 배지보다 약 25% 가량 높은 수치를 보여주었으며, 생장 대수기에서 생장 휴지기로 넘어갈 때 생체 발광량이 최고치에 달하였다. 30% 글리세롤을 첨가하여 $-20^{\circ}C$$-70^{\circ}C$ 및 액체질소에 3개월간 보관한 후, 배양하여 생장 및 생체 발광량을 조사한 결과에서는 $-20^{\circ}C$ 보관한 시료가 가장 좋은 결과를 보였다. 항 동결제로 5% adonitol을 첨가하여 동결 건조한 시료는 재 배양 시 adonitol를 첨가하지 않은 시료보다 16시간 이상 짧은 생장 유도기를 보여 주었고, 생체 발광량이 최고조에 달하는 시간도 빠르게 나타났다.
Serratia plymuthim A21-4 strongly inhibits the mycelial growth, zoospore formation, and cystospore germination of Phytophthor spp and Pythium species. The bacterial isolate produced antifungal substance and chitinase. The bacteria also enhanced to plant growth remarkably in low nutritional condition. The application of cell suspension of A21-4 to pepper seedlings in greenhouse experiments and soil drenching in farmer's field was proved successfully to control the phythophthora blight of pepper. For the effective control, however, relatively high density of cell number(10$\^$9/cfu/$m\ell$) is required. Density effect was similar in plant growth promoting activity of A21-4. Though this investigation we improved the problem with changes of culture condition of bacteria and some nutritional amendment.
Objective: An experiment was conducted to determine the effects of L-arginine (L-Arg) and N-carbamoylglutamic acid (NCG) on the growth, metabolism, immunity and community of cecal bacterial flora of weanling and young rabbits. Methods: Eighteen normal-grade male weanling Japanese White rabbits (JWR) were selected and randomly divided into 6 groups with or without L-Arg and NCG supplementation. The whole feeding process was divided into weanling stage (day 37 to 65) and young stage (day 66 to 85). The effects of L-Arg and NCG on the growth, metabolism, immunity and development of the ileum and jejunum were compared via nutrient metabolism experiments and histological assessment. The different communities of cecal bacterial flora affected by L-Arg and NCG were assessed using high-throughput sequencing technology and bioinformatics analysis. Results: The addition of L-Arg and NCG enhanced the growth of weanling and young rabbit by increasing the nitrogen metabolism, protein efficiency ratio, and biological value, as well as feed intake and daily weight gain. Both L-Arg and NCG increased the concentration of immunoglobulin A (IgA), IgM, and IgG. NCG was superior to L-Arg in promoting intestinal villus development by increasing villus height, villus height/crypt depth index, and reducing the crypt depth. The effects of L-Arg and NCG on the cecal bacterial flora were mainly concentrated in different genera, including Parabacteroides, Roseburia, dgA-11_gut_group, Alistipes, Bacteroides, and Ruminococcaceae_UCG-005. These bacteria function mainly in amino acid transport and metabolism, energy production and conversion, lipid transport and metabolism, recombination and repair, cell cycle control, cell division, and cell motility. Conclusion: L-Arg and NCG can promote the growth and immunity of weanling and young JWR, as well as effecting the jejunum and ileum villi. L-Arg and NCG have different effects in the promotion of nutrient utilization, relieving inflammation and enhancing adaptability through regulating microbial community.
Jopock (Jpk) has previously been ascertained that induces both bacterial and mammalian cell death. The Escherichia coli cells expressing Glutathion S-transferase (GST) fused Jpk showed elongated phenotype and inhibited cell growth which led eventual cell death. In an attempt to search the genetic suppressor of the lethal protein Jpk in bacterial cells, we constructed a unidirectional protein expression vector inserting tac promoter next to the C-terminus Jpk in pGEX-Jpk. The function of additional tac promoter was confirmed by substituting lac promoter in Plac-TOPO plasmid. The cells harboring plac- TOPO, which regulates $lacZ{\alpha}$ gene expression under lac promoter, formed blue colonies in 5-bromo-4-3 $indolyo-{\beta}-D-galactoside$ (X-gal) plate. When lac promoter was changed to tac promoter, same results were observed. Since the addition of tac promoter did not affect the toxic effect of Jpk, the pGEX-Jpk-ptac could be a useful vector for the screening of suppressor(s) for Jpk, in which GST-Jpk and a putative Jpk-suppressing protein are coexpressing from two unidirectional tac promoters, which response to the same inducer, $isopropyl-{\beta}-D-thiogalactopyranoside (IPTG)$.
Lysosomes, as a cell organelle type, are safe biological control agents that may be possible replacements for chemical antimicrobial agents because they are simply isolated from egg white. In this study, it was found that the lysosomes isolated from egg white exhibited pH-dependent antimicrobial activity, with the optimal activity found at pH 6.0. The efficiency of lysosomes in inhibiting bacterial growth and activity was evaluated over a 12-h treatment period. Seven different microorganisms were used as bacterial strains, and the lysosomes showed a significant antimicrobial effect against all strains. In addition, the antimicrobial activity was maintained for 100 days, and there did not appear to be any resistance of E. coli to the lysosomal activity up to the eighth culture. However, the lysosomes did not affect the viability of mammalian cells, suggesting the biocompatibility of lysosomes. These highly effective lysosomes have a bright future in the application of novel antimicrobial sources as a cell organelle type.
Saad, N.;Urdaci, M.;Vignoles, C.;Chaignepain, S.;Tallon, R.;Schmitter, J.M.;Bressollier, P.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권12호
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pp.1635-1643
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2009
The aim of this study was to provide new insight into the mechanism whereby the housekeeping enzyme glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) locates to cell walls of Lactobacillus plantarum 299v. After purification, cytosolic and cell wall GAPDH (cw-GAPDH) forms were characterized and shown to be identical homotetrameric active enzymes. GAPDH concentration on cell walls was growth-time dependent. Free GAPDH was not observed on the culture supernatant at any time during growth, and provoked cell lysis was not concomitant with any reassociation of GAPDH onto the cell surface. Hence, with the possibility of cw-GAPDH resulting from autolysis being unlikely, entrapment of intracellular GAPDH on the cell wall after a passive efflux through altered plasma membrane was investigated. Flow cytometry was used to assess L. plantarum 299v membrane permeabilization after labeling with propidium iodide (PI). By combining PI uptake and cw-GAPDH activity measurements, we demonstrate here that the increase in cw-GAPDH concentration from the early exponential phase to the late stationary phase is closely related to an increase in plasma membrane permeability during growth. Moreover, we observed that increases in both plasma membrane permeability and cw-GAPDH activity were delayed when glucose was added during L. plantarum 299v growth. Using a double labeling of L. plantarum 299v cells with anti-GAPDH antibodies and propidium iodide, we established unambiguously that cells with impaired membrane manifest five times more cw-GAPDH than unaltered cells. Our results show that plasma membrane permeability appears to be closely related to the efflux of GAPDH on the bacterial cell surface, offering new insight into the understanding of the cell wall location of this enzyme.
The effects of Haematococcus pluvialis extracellular products on microbial growth and bacteriocin production were investigated to improve bacteriocin synthesis during the growth cycle of Lactobacilli. Lactobacillus pentosus KJ-108, L. plantarum KJ-10311, and L. sakei KJ-2008 were cultured in MRS and enriched medium (ERM) with or without supplement of the extracellular products obtained from a late exponential phase culture of Haematococcus pluvialis in modified Bold's basal medium (MBBM). In both MRS and ERM, the extracellular products strongly enhanced the growth as well as the bacteriocin production of all the lactic acid bacteria tested. The enhancing effect was observed in ERM with pH adjusted at 5 and 6. In addition, some difference in growth effects with the extracellular products of H. pluvialis was observed between pH 5 and 6 in ERM, but no effect was observed in the minimal medium. The final biomass and the final concentration of bacteriocin activity were associated with the cell growth that was promoted by the extracellular products of H. pluvialis, and the enhanced cell growth of the three lactic acid bacterial strains induced the increase of the specific bacteriocin production. Therefore, bacteriocin production and activity were influenced by the addition of the extracellular products of H. pluvialis in the culture medium.
Dietary fiber is an inevitable component in pig diets. In non-ruminants, it may influence many physiological processes in the gastrointestinal tract (GIT) such as transit time as well as nutrient digestion and absorption. Moreover, dietary fiber is also the main substrate of intestinal bacteria. The bacterial community structure is largely susceptible to changes in the fiber content of a pig's diet. Indeed, bacterial composition in the lower GIT will adapt to the supply of high levels of dietary fiber by increased growth of bacteria with cellulolytic, pectinolytic and hemicellulolytic activities such as Ruminococcus spp., Bacteroides spp. and Clostridium spp. Furthermore, there is growing evidence for growth promotion of beneficial bacteria, such as lactobacilli and bifidobacteria, by certain types of dietary fiber in the small intestine of pigs. Studies in rats have shown that both phosphorus (P) and calcium (Ca) play an important role in the fermentative activity and growth of the intestinal microbiota. This can be attributed to the significance of P for the bacterial cell metabolism and to the buffering functions of Ca-phosphate in intestinal digesta. Moreover, under P deficient conditions, ruminal NDF degradation as well as VFA and bacterial ATP production are reduced. Similar studies in pigs are scarce but there is some evidence that dietary fiber may influence the ileal and fecal P digestibility as well as P disappearance in the large intestine, probably due to microbial P requirement for fermentation. On the other hand, fermentation of dietary fiber may improve the availability of minerals such as P and Ca which can be subsequently absorbed and/or utilized by the microbiota of the pig's large intestine.
To study the biodiversity of bacterial species, here we report indigenous prokaryotic species of Korea. A total of 23 bacterial strains affiliated to the class Alphaproteobacteria were isolated from various environmental sources including seaweeds, seawater, fresh water, wetland/marsh, tidal sediment, plant roots, sewage and soil. Considering higher than 98.8% 16S rRNA gene sequence similarities and formation of a well-defined phylogenetic clade with named species, it was confirmed that each strain belonged to the predefined bacterial species of the class Alphaproteobacteria. There is no official report of these 23 species in Korea; 20 species of 16 genera (Mameliella, Yangia, Paracoccus, Ruegeria, Loktanella, Phaeobacter, Dinoroseobacter, Tropicimonas, Lutimaribacter, Litoreibacter, Sulfitobacter, Roseivivax, Labrenzia, Hyphomonas, Maricaulis, Thalassospira) in the order Rhodobacterales and 3 species of a single genus (Brevundimonas) in the order Caulobacterales. Gram-staining, cell morphology, basic biochemical characteristics, isolation sources, optimum temperature, growth media, and strain IDs are detailed in the species description as well as Table 1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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