The cycloinulooligosaccharide fructanotransferase(CFTase) gene (cft) from Paenibacillus polymyxa was subcloned into the E. coli-yeast shuttle vector, pYES2.0 (GALI promoter). The constructed plasmid, pYGCFT (9.9 kb) was introduced into S. cerevisiae SEY2102 cell and then the yeast transformant was selected on the synthetic defined media lacking uracil Based on the cyclofructan(CF) spots on thin-layer chromatogram, the gene under the control of GALI promoter was successfully expressed in the yeast transformant. The recombinant CFTase was not secreted into the medium and was predominantly localized in the periplasmic space. CF was started to be produced after 3h of enzymatic reaction with inulin. The pH and temperature optimum for the CF production from inulin was pH 8.0 and 45$^{\circ}C$, respectively. Enzyme activity was stably maintained up to the pH of 10.0. The examination of the inulin sources revealed that a dahlia tuber and Jerusalem artichoke were the best for the production of CF.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.29
no.2
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pp.214-223
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2012
This study was carried out to investigate the feeding effects of microcapsulated inulin (MI) from Jerusalem artichoke (Helianthus tuberosus L.) on blood lipid, fatty acid composition and cholesterol of egg in laying hens. Hyline brown layers of 25 weeks old were subjected to one of the following treatments for 4 weeks: a control group without MI, 800 ppm, 900 ppm, and 1,000 ppm. Compared with control group, levels of triacylglyceride and cholesterol in blood and egg cholesterol decreased significantly in groups MI groups. Egg saturated fatty acid was lower in MI groups than control group but not unsaturated fatty acid was significantly high in MI groups as compared to the group without MI. The results suggest that the addition of microcapsulated inulin to a laying hens' diet can improve egg quality by reducing blood lipids.
Drought is more concerned to be a huge problem for agriculture as it affects plant growth and yield. Endophytic bacteria act as plant growth promoting bacteria that have roles for improving plant growth under stress conditions. The properties of four strains of endophytic bacteria were determined under water deficit medium with 20% polyethylene glycol. Bacillus aquimaris strain 3.13 showed high 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) deaminase production; Micrococcus luteus strain 4.43 produced indole acetic acid (IAA). Exopolysaccharide production was high in Bacillus methylotrophicus strain 5.18 while Bacillus sp. strain 5.2 did not show major properties for drought response. Inoculation of endophytic bacteria into plants, strain 3.13 and 4.43 increased height, shoot and root weight, root length, root diameter, root volume, root area and root surface of Jerusalem artichoke grown under water limitation, clearly shown in water supply at 1/3 of available water. These increases were caused by bacteria ACC deaminase and IAA production; moreover, strain 4.43 boosted leaf area and chlorophyll levels, leading to increased photosynthesis under drought at 60 days of planting. The harvest index was high in the treatment with strain 4.43 and 3.13 under 1/3 of available water, promoting tuber numbers and tuber weight. Inulin content was unchanged in the control between well-watered and drought conditions. In comparison, inulin levels were higher in the endophytic bacteria treatment under both conditions, although yields dipped under drought. Thus, the endophytic bacteria promoted in plant growth and yield under drought; they had outstanding function in the enhancement of inulin content under well-watered condition.
The inulinase gene (INU1) from Kluyveromyces marxianus NCYC2887 was overexpressed by using the GAL10 promotor in a ${\Delta}ga180$ strain of Saccharomyces cerevisiae. The inulinase gene lacking the original signal sequence was fused in-frame to a mating factor ${\alpha}$ signal sequence for secretory expression. Use of the ${\Delta}ga180$ strain allowed for the galactose-free induction of inulinase expression using a glucose-only medium. Shake-flask cultivation in YPD medium produced 34.6 U/ml of the recombinant inulinase, which was approximately 13-fold higher than that produced by K. marxianus NCYC2887. It was found that the use of the ${\Delta}ga180$ strain improved the expression of inulinase in the recombinant S. cerevisiae in both aerobic and anaerobic conditions by about 2.9- and 1.7-fold, respectively. A 5-l fed-batch fermentation using YPD medium was performed under aerobic condition with glucose feeding, which resulted in the inulinase production of 31.7 U/ml at the $OD_{600}$ of 67. Ethanol fermentation of dried powder of Jerusalem artichoke, an inulin-rich biomass, was also performed using the recombinant S. cerevisiae expressing INU1 and K. marxianus NCYC2887. Fermentation in a 5-l scale fermentor was carried out at an aeration rate of 0.2 vvm, an agitation rate of 300 rpm, and with the pH controlled at 5.0. The temperature was maintained at $30^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$, respectively, for the recombinant S. cerevisiae and K. marxianus. The maximum productivities of ethanol were 59.0 and 53.5 g/l, respectively.
Peroxidase from Jerusalem artichoke tubers, which might be related to browning reaction, was purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-cellulose and Sephacryl S-200 chromatography. The optimum pH of the purified peroxidase was 5.0 and relatively stable at pH $5.0{\sim}6.0$ using substrate of p-phenylenediamine and $H_2O_2$. D-values for thermal inactivation at 60, 70 and $80^{\circ}C$ were 86, 45 and 33 sec, respectively. Activation energy was 4,111 J/mole. The enzyme showed the most sensitive specificity of substrate for p-phenylenediamine. The compounds such as 1mM potassium cyanide, 10mM sodium diethyldithiocarbamate, L-ascorbic acid, sodium hydrosulfite and L-cysteine inhibited completely while 1mM of $Ca^{2+}\;and\;Cu^{2+}$ activated the purified peroxidase.
A bacterial strain producing a novel endo-inulinase, hydrolysing inulin into oligosaccharides was isolated from soil and identified as Arthrobacter sp. S37 The enzyme production was induced by inulin and jerusalem artichoke extract. The maximum enzyme production was obtained with medium containing 1.5% jerusalem artichoke extract, 1.0% yeast extract, $0.5%\;NaNO_3,\;0.05%\;MgSO_4{\cdot}7H_2O,\;0.05%\;KCl,\;0.0016%\;FeCl_3{\cdot}6H_2O\;and\;0.05%\;KH_2PO_4$. The optimum temperature and pH for the enzyme production were $30^{\circ}C$ and 8.0, respectively. Under the optimum condition, the enzyme activity in the culture broth reached at maximum, 10.8 units/ml after cultivation for 24 hours.
This study investigated the changes of antioxidant activity and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory effect of Jerusalem artichoke (Helianthus tuberosus) 100% methanol extracts by various heat treatment. The contents of total phenolic and flavonoid compounds in methanol extract tended to increased gradually with the rise of temperature to 180$^{\circ}C$. The maximum yield of gallic acid (51.52 ${\pm}$ 2.17mg/g extract weight) and quercetin (13.39 ${\pm}$ 0.03mg/g extract weight) were obtained with extraction temperature of 180$^{\circ}C$ for 120min. In addition, the improving extraction efficiency resulted in the increased biological activities, such as electronic donation ability (EDA, 90.36${\pm}$ 0.57%), reducing power (Abs 1.14) and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory effect (92.14 ${\pm}$ 1.14%). Overall, the results of this study indicate that the optimum conditions for the extraction process were an extraction temperature at 180$^{\circ}C$ for 120 min, and will provide the basis for future research on the improving extraction yield of phenolic and flavonoid compounds.
The investigations of specific growth rate, specific alcohol production rate, cell yield, alcohol yield of K. marxianus LG were performed according to the sugar concentrations, 50, 80, 110, 190, and 250g/l of extracted solution of Jerusalem Artichoke. The functipnal relationship between specific growth rate, specific alcohol production rate, and alcohol concentrations were devoted study to. In case of low concentration of alcohol, the fuctions were linear relationships. But in the region of high concentration of alcohol, they expressed the exponential relationships. The growth rate of K. marxianus was prohibited at higher than 50g/l of alcohol concentrations regardless of concentration of residual sugar. Cell and alcohol yield showed the maximum values around 25g/l of alcohol concentraton without being related to initial sugar concentrations.
Junsopa, Chutsuda;Saksirirat, Weerasak;Saepaisan, Suwita;Songsri, Patcharin;Kesmala, Thawan;Shew, Barbara B.;Jogloy, Sanun
The Plant Pathology Journal
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v.37
no.5
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pp.428-436
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2021
Stem rot is a serious disease in Jerusalem artichoke (JA). To reduce the impact of this disease on yield and quality farmers often use fungicides, but this control method can be expensive and leave chemical residues. The objective of this study was to evaluate the efficacy of two biological control agents, Trichoderma harzianum T9 and Bacillus firmus BSR032 for control of Sclerotium rolfsii under field conditions. Four accessions of JA (HEL246, HEL65, JA47, and JA12) were treated or notreated with T. harzianum T9 and B. firmus BSR032 in a 4 × 2 × 2 factorial experiment in two fields (environments), one unfertilized and one fertilized. Plants were inoculated with S. rolfsii and disease was evaluated at 3-day intervals for 46 days. T. harzianum T9 and B. firmus BSR032 reduced disease incidence by 48% and 49%, respectively, whereas T. harzianum T9 + B. firmus BSR032 reduced disease incidence by 37%. The efficacy of T. harzianum T9 and B. firmus BSR032 for control of S. rolfsii was dependent on environments and genotypes. The expression of host plant resistance also depended on the environment. However, HEL246 showed consistently low disease incidence and severity index in both environments (fertilized and unfertilized). Individually, T. harzianum T9, B. firmus BSR032, or host plant resistance control stem rot caused by S. rolfsii in JA. However, no combination of these treatments provided more effective control than each alone.
Lee, Sang Ku;Jung, Chung Ryul;Han, Kyung Sook;Park, Bueyong
Korean journal of applied entomology
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v.61
no.2
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pp.293-297
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2022
Korean thistle (Cirsium setidens Nakai), also called Gondre, is an edible perennial herbaceous plant. A new occurrence of aphids has been confirmed on Korean thistle, which is expected to damage crops. The control effect of organic materials was tested to develop an eco-friendly control method for aphid. Pyrethrins+paraffinic oils exhibited a 98% control effect, pyrethrins+matrine+pyroligneous acid showed a 95% control effect, and azadirachtin+rotenone was found to have a 75% control effect. Pyrethrins appear to be the most effective; no damage (phytotoxticity) was caused with organic materials spraying.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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