The genome of Hantaan virus, the prototype of the hantavirus genus, is composed of three segmented, single stranded negative sense RNA genome. The 5' and 3' termini of the Hantaan virus RNA genome contain noncoding regions (NCRs) that are highly conserved and complementary to form panhandle structures. There are some reports that these NCRs seems to control gene expression and viral replication in influenza virus and vesicular stomatitis virus. In this study, we examined whether NCRs in Hantaan virus playa role in expression of the viral nucleocapsid protein (Np) and foreign (luciferase) gene. The 5' and/or 3' NCR-deleted mutants were constructed and analysed. The Np expression of 5' NCR-deleted clone was similar to that of the clone containing full S genome. In the case of 3' NCR-deleted clone, it showed 40% reduction. To investigate the role of NCR in foreign gene expression, the clones which are replaced ORF of Hantaan viral Np gene with that of luciferase gene were constructed. The results were similar to those of the experiments using Np gene. These results suggest that 3' NCR is more important than 5' NCR in protein expression. To find out a critical region of 3' NCR in protein expression, several clones with a deleted part of 3' NCR were constructed and analyzed. The deletion of the conserved region in 3' NCR showed $20{\sim}30%$ decrease in Np expression. However there were no change in luciferase activities between clones with or without non-conserved region of 3' NCR. These results suggest that the 3' NCR of Hantaan virus S genome, especially conserved region in 3' NCR, plays an important role in the expression of Hantaan viral Np and foreign genes.
Kim, Eun-Jung;Nam, Jae-Hwan;Park, Yong-Kenun;Cho, Hae-Wol
The Journal of Korean Society of Virology
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v.27
no.2
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pp.197-207
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1997
To investigate the NS4 region of JEV, NS4 cDNA of K94P05 (JEV strain isolated from Korea in 1994) was amplified by RT-PCR and analyzed by sequencing PCR product. Genomic size of NS4 was 1212bp and nucleotide sequence was compared with that of other JEV strains. Nucleotide homology between JaOAr582 and K94P05 was 91.1% and that between Beijing and K94P05 was 89.8%, respectively. But the nucleotide sequence of E region of JaOAr582 and K94P05 showed 97.0% homology and that of Beijing and K94P05 did 95.8% homology. NS4 protein was expressed as a form of fusion protein by a prokaryotic expression system. The induced fusion product showed a lower molecular weight than predicted size and remained insoluble. The NS4 protein might be cleavaged by E. coli protease. Concluding above results, high hydrophobicity of the NS4 protein supported the fact that this protein played a role as a membrane component and the poor nucleotide sequence conservativity among JEV strains suggested that this region might be important to adapt each viral growth environment.
Arthropod-borne viruses (Arboviruses) are transmitted by arthropods such as Culicoides biting midges and cause abortion, stillbirth, and congenital malformation in ruminants, apparently leading to economic losses to farmers. To monitor the distribution of Culicoides and to determine their relationship with different environmental conditions (temperature, humidity, wind speed, and altitude of the farms) on 5 cattle farms, Culicoides were collected during summer season (May-September) in 2016 and 2017, and analyzed for identification of species and detection of arboviruses. About 35% of the Culicoides were collected in July and the collection rate increased with increase in temperature and humidity. The higher altitude where the farms were located, the more Culicoides were collected on inside than outside. In antigen test of Culicoides against 5 arboviruses, only Chuzan virus (CHUV) (2.63%) was detected in 2016. The Akabane virus (AKAV), CHUV, Ibaraki virus and Bovine ephemeral fever virus (BEFV) had a positive rate of less than 1.8% in 2017. In antigen test of bovine whole blood, AKAV (12.96%) and BEFV (0.96%) were positive in only one of the farms. As a result of serum neutralization test, antibodies against AKAV were generally measured in all the farms. These results suggest that vaccination before the season in which the Culicoides are active is probably best to prevent arbovirus infections.
In recent years, large scale damages from arbovirus infections by mosquitoes have been reported worldwide due to factors such as change in global climate, increased overseas travel, and increased logistics movement between countries. Among them, Zika virus and dengue virus belonging to genus Flavivirus are representative. In this study, we performed in-depth analyses of the envelope (E) protein that perform essential functions for host infection of Zika virus and dengue virus based on bioinformatics databases. The domain analysis of E protein was performed to determine the type, location, and function, and homology analysis for each domain. From these results, EDIII showing low homology was identified. The homology and immunogenicity of each peptide constituting EDIII were analyzed and three-dimensional structures were modeled. Furthermore, we discussed their biological meaning and how they could be used.
Kim, Dong Hyun;Hong, Young-Jin;Lee, Hoon-Jai;Choi, Bo-Yul;Kim, Chang Hwi;Park, Jae Ock;Kang, Jin Han;Choi, Byung Joon;Kim, Jong Hyun;Ahn, Young Min;Ju, Young Ran;Jeong, Young Eui;Han, Myung Guk
Pediatric Infection and Vaccine
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v.20
no.3
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pp.131-138
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2013
Purpose: This study aimed to study the antibody response of Japanese encephalitis vaccination in children using different kinds of vaccines (inactivated vaccine, live attenuated vaccine or interchanged) and evaluate the effectiveness of the vaccines to provide the basis of efficient immunization schedule of Japanese encephalitis. Methods: Measurement of the neutralization antibody (NTAb) titers following Japanese encephalitis vaccination using different vaccines for 170 children, 2-6 year of age, who visited six university hospitals and are confirmed by immunization records. Results: Among 170 children who were given primary immunization on Japanese encephalitis, 103 children were given inactivated vaccine, 64 children were given live attenuated vaccine and 3 children were given interchangeably. NTAb titers were more than 1:10 in all children of three groups. The geographic mean antibody titer was 322 in inactivated vaccine group and 266 in live attenuated vaccine group. However, there was no significant difference between two groups. In both groups, the NTAb titer showed the peak at 1-4 months after the third immunization and declined. The NTAb titers of three children who were given two kinds of vaccines alternately were 1:135, 1:632, and 1:2511, respectively. Conclusion: According to the results of this study in children younger than 6 years old, there is no significant difference in effectiveness between inactivated and live attenuated vaccines. However, further studies for the changes of antibody titers for a longer period of time on larger population are required.
(1) The non-specific inhibitors (NSI) in normal chicken sera were active against all the tested group A and group B arboviruses, but the group B arbovirus were more sensitive than group A arboviruses. (2) The titres of the NSI were distributed nearly uniformly among chickens from seven different age groups to group A arboviruses. In contrast, the NSI titres to group A arboviruses were found to increase with age. (3) No significant difference could be demonstrated between acetone-ether extraction and kaolin adsorption for removal of the NSI in normal chicken sera. (4) After heating, the NSI titres in chicken sera were increased for both group A and group B arboviruses. (5) After heating the sera at $80^{\circ}C$ and $100^{\circ}C$, kaolin adsorption was less efficient for removing the NSI than it, was in unheated serum. Acetone-ether extraction of the NSI was unimpaired after heating at $80^{\circ}C$ but was less efficient after heating at $100^{\circ}C$. (6) The NSI activity was found mainly in the first peak (IgM) and diffused to a part of second peak (IgG) by fractionation of chicken serum by gel filtration through Sephadex G200. After zonal centrifugation of chicken serum in a linear ten to 40 percent sucrose gradient all of the NSI activities were found on the top of the centrifugal tubes. These properties of large molecular size and low density indicated that the NSI in chicken serum were probably lipoproteins. (7) The natural agglutinins for goose erythrocytes in chicken sera were partially destroyed by acetone-ether extraction but not by kaolin adsorption, and were efficiently adsorbed with ten percent goose erythrocytes. No difference of the NA titre was demonstrated with diluents of different pH. (8) The NA in chicken serum was found to possess the properties of IgM by gel filtration through Sephadex G200 and zonal centrifugation in linear ten to 40 percent sucrose gradient.
Mohammed, Mohammed Nma;Yasmin, Abd Rahaman;Noraniza, Mohd Adzahan;Ramanoon, Siti Zubaidah;Arshad, Siti Suri;Bande, Faruku;Mohammed, Hussni O.
Journal of Veterinary Science
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v.22
no.3
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pp.29.1-29.6
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2021
West Nile virus (WNV), a neurotropic arbovirus, has been detected in mosquitos, birds, wildlife, horses, and humans in Malaysia, but limited information is available on WNV infection in Malaysian pigs. We tested 80 archived swine serum samples for the presence of WNV antibody and West Nile (WN) viral RNA using ID Screen West Nile Competition Multi-species enzyme-linked immunosorbent assay kits and WNV-specific primers in reverse transcription polymerase chain reaction assays, respectively. A WNV seroprevalence of 62.5% (50/80) at 95% confidence interval (51.6%-72.3%) was recorded, with a significantly higher seroprevalence among young pigs (weaner and grower) and pigs from south Malaysia. One sample was positive for Japanese encephalitis virus antibodies; WN viral RNA was not detected in any of the serum samples.
Purpose: We aimed to study the pattern of liver-injury in children with dengue fever (DF) and validate serum aminotransferase ${\geq}1,000IU/L$ as a marker of severe DF. Methods: Children admitted with DF were included. DF was defined by presence of clinical criteria and positive serological or antigen tests in absence of other etiology. DF severity was graded as dengue without or with warning signs and severe dengue. Liver-injury was defined as alanine aminotransferase (ALT) more than twice the upper limit of normal (boys, 30 IU/L; girls, 21 IU/L). Results: Of 372 children with DF, 144 (38.7%) had liver-injury. Risk of liver-injury and aminotransferase levels increased with DF severity (p<0.001). Recommended ALT and aspartate aminotransferase (AST) cut-off at ${\geq}1,000IU/L$ had sensitivity 4.8% (5/105), specificity 99.3% (265/267) for detection of severe DF. In children with ALT and AST <1,000 IU/L (n=365), the area under receiver operating curves for prediction for severe DF, were 0.651 (95% confidence interval [CI], 0.588-0.714; p<0.001) for ALT and 0.647 (95% CI, 0.582-0.712; p<0.001) for AST. Serum ALT at 376 IU/L and AST at 635 IU/L had sensitivity and specificity comparable to ${\geq}1,000IU/L$ for defining severe DF. Conclusion: Liver-injury is common in DF. The ALT and AST levels increase with DF severity. ALT and AST levels of ${\geq}1,000IU/L$ could be lowered to 376 IU/L and 635 IU/L respectively for defining severe DF.
Yang, Dong-Kun;Park, Yu-Ri;Kwon, Young Do;Kim, Ha-Hyun;Hyun, Bang-Hun
Korean Journal of Veterinary Research
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v.62
no.3
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pp.19.1-19.6
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2022
Japanese encephalitis virus (JEV) and Akabane virus (AKAV) are mosquito-borne viruses that cause encephalitis and reproductive disorders in horses and cattle, respectively. There is no treatment for JEV or AKAV infections in animals. Therefore, we evaluated the antiviral activity of 18-mer amphipathic peptides in the 1b-4/21-C series on JEV and AKAV using Vero cells in vitro and evaluated their effects on JEV in mice. Of 6 peptides, 1b-4/21-C12 had the lowest IC50 of 0.313 against JEV and its use as an antiviral against JEV and AKAV was examined. The IC50 of 1b-4/21-C12 against JEV and AKAV was 0.78 and 1.14 µM, respectively. Mice treated with 5 or 2 mg/kg of 1b-4/21-C12 had 32% and 16% survival rates, respectively, and the surviving mice treated with 1b-4/21-C12 began to gain weight beginning 8 days post challenge with the virulent Nakayama strain. Moreover, 20 µM 1b-4/21-C peptide had no cytotoxic effects on Vero cells. Our in vitro and in vivo results indicate that 1b-4/21-C12 has antiviral activity against enveloped JEV and AKAV and might be useful as a therapeutic substance.
Hantaviruses are etiologic agents of hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) and hantavirus pulmonary syndrome (HPS) in the world. Various hantaviruses were isolated from HFRS patients and several different rodent species in the world. Four hantavirus isolates from Indonesia and three isolates from Thailand among 89 Bandicotas captured in Yogyakarta, east region of Sumatra island, Indonesia and at Chiang Mai in Thailand during 1996 were made through several passages in Vero E6 cells. Viral genome M segment from two Indonesian isolates and three Thailand isolates were amplified using hantavirus generic primers of the M segment and cloned into pCRII vector. The genetic differences were analyzed by comparison of partial sequence of the M segment and antigenic differences were made by IFA. Nucleotide sequence homology of two isolates BC 8, BC 34 from Indonesia and two isolates thai 1322, thai 1330 to Seoul virus was 99% and 96%, respectively, but Thai 1164 was 80%Thai 1164 strain has shown 95% homology to Thai 749 virus. In conclusion it is indicated that two different serotype hantaviruses, Seoul and Thailand, are cocirculating among Bandicota in Thailand, in contrast Seoul serotype virus is circulating in Indonesia.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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