Culture conditions for high Sequency somatic embryogenesis and plant regeneration in tissue cultures of sweet potato of two Korean cultivars 'Puyojaerae' and 'Yulmi' are described. Shoot apical meristem explants (height 150 $\mu\textrm{m}$; base: 350 $\mu\textrm{m}$) were cultured on MS medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D. After 6 weeks of culture, greater than 80% of the survived explants produced embryogenic calli. When transferred onto MS medium with 0.1 mg/L each of 2,4-D and kinetin, the calli gave rise to somatic embryos at frequencies of 71% ('Puyojaerae') and 63% ('Yulmi'), respectively: When somatic embryos at various developmental stages measured in length were transversely cut into two halves and cultured on MS medium with 1 mg/L 2,L-D, the upper halves produced secondary embryos more frequently than the lower ones, and halves of somatic embryos less than 1 mm in length had a higher competence for secondary embryo formation than longer ones of either cultivar. However 'Puyojaerae' somatic embryo halves showed a higher frequency of secondary embryo formation than 'Yulmi' ones on the whole. Upon transfer onto MS basal medium, most of the primary and secondary somatic embryos underwent development into plantlets. The plantlets were transplanted to potting soil and grown to maturity in a phytotron. The overall results suggest that the shoot apical meristem culture system for somatic embryo formation in sweet potato previously established by us (SABRAOJ 21: 93-101) may be applicable regardless of it genotypes.
The effects of sucrose concentration and nitrogen source on shoot growth and in vitro formation of garlic (Allium sativum L. cv Seosan) bulblet were investigated in order to systematize propagation of high quality garlic through a shoot apical meristem culture. Shoot differentiation was not affected by sucrose concentration and nitrogen source, but plantlets which contain medium of NH$_4$- N or NH$_4$ + NO$_3$ were vigorous and healthy in .appearance. Shoot growth was vigorous in changeing of nitrogen source. The best quality of in vitro bulblets was obtained in culture on the medium containing 8% sucrose and NH$_4$ - N, and the formation of bulblet was more effective when plantlets were subjected to cold treatment before use. NH$_4$-N was a major factor for shoot growth and bulblet development, but NO$_3$-N was not and suppressed $K^{+}$absorption. The level of ethylene production was not affected by different nitrogen sources, however this production was enhanced in medium containing a higher concentration of sucrose.e.
Immature zygotic embryos (up to 4mm in length) were cultured on MS medium supplemented with 0.5 to 8mg/L 2,4-D. Up to 87% of them formed somatic embryos on the plumule without producing an intervening callus. The site of somatic embryo formation was confirmed by culturing plumule explants, which consisted of shoot apical meristem domes with 1 or 2 leaf primordia excised from 2-week-old seedlings. When the concentration of 2,4-D was increased over 4 mg/L, the plumule explants produced nonembryogenic calli only, whereas the distal end of the cotyledons directly formed numerous somatic embryos at frequencies of up to 60%. Upon transfer onto MS basal medium,2 out of 15 somatic embryos converted into plantlets. The plantlets were potted to a soil mixture and grown to maturity in a phytotron.
Kim, Hye Jin;Lee, Jong Nam;Lim, Hak Tae;Yeoung, Young Rok
Horticultural Science & Technology
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v.32
no.1
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pp.100-104
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2014
This study was conducted to determine the optimal MS medium strength to improve sprouting rate of apical meristem of strawberry 'Seolhyang' in vitro. Strawberry apical meristems at size (0.2 mm to 0.3 mm) with leaf primordials were cultured on the MS media with four strength levels, ($1/4{\times}$, $1/3{\times}$, $1/2{\times}$, and $1{\times}$) and the sprouting rate and growth characteristics were evaluated after eight weeks after cultivation. Shoot rate of 'Daewang' apical meristems was 93.6%whereas 'Seolhyang' apical meristems were sprouted with 31.6% on $1{\times}$ MS medium strength. Different sprouting rates were observed in 'Seolhyang' apical meristem with 31.6% in $1{\times}$ medium, 75.0% in $1/2{\times}$ medium, and 94.4% in $1/3{\times}$ medium. The sprouting rate was improved with the decrease of medium strength, but the shoot rate in $1/4{\times}$ medium decreased up to 54.5%. Shoot length was 0.9 cm in $1{\times}$ medium, 1.2 cm in $1/2{\times}$ medium, 1.6 cm in $1/3{\times}$ medium, and 1.9 cm in $1/4{\times}$ medium. Shoot length was longer as medium strength decreased and numbers of leaves and roots were not significant differences among the medium strengths. As a result, sprouting rate was highest and plant growth was best in $1/3{\times}$ MS medium compared to the others.
Developmental anomalies in the plumule meristem of peanut (Arachis hypogaea L.) somatic embryos resulted in poor shoot differentiation and reduced plant recovery. Existing meristems with caulogenic potential have never been tested for embryogenesis in peanut. The present experiment was designed to test the mature zygotic embryo axis derived plumule with three meristems for somatic embryogenesis. Embryogenic masses and embryos developed from the caulogenic meristems in the axils. Exposure of 2 weeks in primary medium with $90.5{\mu}M$ 2,4-D suppressed the shoot tip differentiation temporarily which then regained the ability to form the shoot on withdrawal of 2,4-D. Exposure of 4 weeks in primary medium with $90.5{\mu}M$ 2,4-D suppressed the shoot tip differentiation irreversibly. No shoot formation was noted from the tips in any of the cultures which were in secondary medium with $13.6{\mu}M$ 2,4-D. Development of somatic embryos directly from axillary meristems was confirmed histologically. Conversion frequency of these embryos was 11%. Thus, in this report, we describe a method to obtain somatic embryos from the determined organogenic buds of the axillary meristem, by culturing the nodal explant vertically on embryo induction medium. It also displays the possibility of obtaining both embryogenic and organogenic potential in two parts of the same explant simultaneously. The possibility of extending this approach for genetic transformation in in vivo system through direct DNA delivery or Agrobacterium injection in meristems can also be explored. Using Agrobacterium rhizogenes, we have demonstrated the possibility of gene transfer in the axillary meristems of seed-derived plumule explant.
This study was conducted to investigate somatic embryogenesis capacity using callus derived from bud meristems in sweetpotato. Shoot apical meristem explants $(height:150{\mu}m;base:\;350{\mu}m)$were cultured on MS medium supplemented with 1 mg/L 2/4-D. Embryogenic callus were observed in five cultivars when their shoot apices were cultured on MS medium supplements with 1 mg/L 2,4-D. After 6 weeks of culture, greater than 80% of the survived explants produced embryogenic calli and the calli gave rise to somatic embryos at frequencies of 72% (Yulmi), 60% (Shinhwangmi), 78% (Geonmi), 70% (KoKei 14), 40% (Sinjami). The regenerated plants developed into whole plantlets after they were transferred onto the fresh hormon-free MS medium of 74% (Yulmi), 82% (Shinhwangmi), 86% (Geonmi), 74% (Kokei 14), 41% (Sinjami) respectively.
Sweet potato is a crop vegetatively propagated by vine cuttings, an ineffective method for maintaining pathogene-free stock plants. As an alternative method, single-node cultures of virus-free plantlets derived from apical meristem in sweet potato (cv. Yulmi) was examined. Effective pH range, sugar concentration and nodal order were investigated to establish an in vitro mass propagation system with high quality virus-free stock plantlets to farmhouse. Although the plantlets grew at wide range of pH, the most effective pH of the medium was 4.8 in single-node cultures. High sugar concentration of 60∼80 g/L resulted in increased growth response in shoot length, root length, number of node, leaf area and fresh and dry weight of shoot and root, whereas reducing sugar contents below 6% was showed reduced growth response. The first node including meristem tip was the best for the rapid growth of plantlets and the other nodes also showed a very similar growth response. Uniform plantlet can be obtained massively at the same time by culture of single node except for the first node including meristem tip. In conclusion, the most effective pH range and sugar concentration of medium for the growth of plantlets via single-node cultures was 4.8, 60∼80 g/L respectively. The first node was the best for the rapid propagation of plantlets in nodal order.
This study was carried out to establish a reproducible culture system for callus formation and adventitious shoot development from young stem segments of Vigna radinta, and histological work for orgin of callus tissue and adventitious shoot. Induction of callus from young stem explants of Vigna radiata was very effective on MS inorganic salts supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L kinetin. For the adventitious shoot regeneration from the callus tissues, the hormone combination of 0.75 mg/L NAA, 1.5 mg/L kinetin and MS salts resulted in about 21% efficiency. Histological examination showed that callus tissues originated from out-growths by callus cambium rings with do novo meristematic activities, which were localized at the outside of the vascular cambium. Adventitious shoots were developed from shoot apical meristem originated from the surface of callus masses. The shoot apical meristem produced leaf primordium, which then became leaf.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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