Objectives: This study was designed to evaluate the synergistic antibacterial effect of xylitol and ursolic acid (UA) against oral biofilms in vitro. Materials and Methods: S. mutans UA 159 (wild type), S. mutans KCOM 1207, KCOM 1128 and S. sobrinus ATCC 33478 were used. The susceptibility of S. mutans to UA and xylitol was evaluated using a broth microdilution method. Based on the results, combined susceptibility was evaluated using optimal inhibitory combinations (OIC), optimal bactericidal combinations (OBC), and fractional inhibitory concentrations (FIC). The anti-biofilm activity of xylitol and UA on Streptococcus spp. was evaluated by growing cells in 24-well polystyrene microtiter plates for the biofilm assay. Significant mean differences among experimental groups were determined by Fisher's Least Significant Difference (p < 0.05). Results: The synergistic interactions between xylitol and UA were observed against all tested strains, showing the FICs < 1. The combined treatment of xylitol and UA inhibited the biofilm formation significantly and also prevented pH decline to critical value of 5.5 effectively. The biofilm disassembly was substantially influenced by different age of biofilm when exposed to the combined treatment of xylitol and UA. Comparing to the single strain, relatively higher concentration of xylitol and UA was needed for inhibiting and disassembling biofilm formed by a mixed culture of S. mutans 159 and S. sobrinus 33478. Conclusions: This study demonstrated that xylitol and UA, synergistic inhibitors, can be a potential agent for enhancing the antimicrobial and anti-biofilm efficacy against S. mutans and S. sobrinus in the oral environment.
Lophatheri Herba of Lophatherum gracile Bronghiart(Gramineae) has long been used for treatment of inflammation, fever and edema in Korea. In order to investigate antibacterial activity of the Lophatheri Herba against Streptococcus mutans ATCC27351, paper disc test and pH check were carried out with 80% ethanol extract of Lophatheri Herba(LEX). The LEX showed significant antibacterial activity. And at the dose of 50 mg/kg, LEX showed signifiant inhibition on the paw edema, vascular permeability and myeloperoxidase activity in rat's paw tissue. These results indicate that LEX has antibacterial activity against the Streptococcus mutans and anti-inflammatory effect.
난황 항체 강화를 위하여 켈프밀 $4\%$ 처리구와 계피 $0.3\%$와 박하 $2\%$가 첨가된 특수사료를 급여하고 Streptococcus mutans를 2주 간격의 5회 면역처리를 복합적으로 실시하면서 40주령 산란계를 사양하였다. 면역처리를 하지 않은 처리군에서는 박하 첨가군의 산란율이 높았다. 면역한 후에 발생되는 산란율 저하는 대조구와 계피 첨가군에서 적게 나타났다. 계란의 무게는 면역처리에 따른 효과가 나타나지 않았으나 사료에 따라 차이가 나타났다. 면역처리를 하지 않은 처리구에서 계피, 박하, 켈프밀 모두 총 IgY 함량이 대조구보다 높게 나왔으며, 특히 켈프밀의 경우 대조구에 비해 $5.4\%$ 가량 상승하였다. 면역 한 처리구끼리 각각 비교하여 보면 대조구에 비해서 다른 처리구에서 모두 높았으며, 특히 켈프밀 처리구가 월등히 높아 대조구에 비해 $7.9\%$ 정도의 상승이 있었다. S. mutans로 면역처리된 닭으로부터 얻은 계란에서의 충치균에 대한 특이(specific) 총 IgY 함량을 분석한 결과, 항충치균 IgY는 1차 면역하고 4주정도 후에 나타나기 시작하였다. 마지막 immunization후 5주 이상 경과하더라도 specific IgY의 양이 상당히 높은 수준을 유지하는 것을 볼 수 있었다. 총 실험기간 동안의 specific IgY 함량의 평균을 보면 켈프밀 처리구는 다른 식이에서 보다 훨씬 높은 specific IgY 역가 보여주었고 대조구에 비해 특이 항체가 약 $8.5\%$ 가량 증가되어 켈프밀의 첨가는 면역처리를 통한 특수 IgY 생산에 효과적임을 나타내었다
This study aimed to evaluate in vitro effects of Rheum undulatum L. root on the development of dental caries, especially its effects on viability, dental plaque formation, and glycolytic acid production of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Methanol extract of Rheum undulatum L. root and its fractions were prepared and tested. Among the test extract and fractions, dichloromethane fraction (DF) showed the most active antibacterial activity (inhibition zone: 13-17 mm) against S. mutans and S. sobrinus in a disc diffusion method. Minimal inhibitory concentrations (MICs) of DF against these bacteria ranged from 0.25 to 0.5 mg/mL. Furthermore, DF significantly inhibited the caries-inducing factors of these bacteria. At sub-MIC levels, DF inhibited in vitro dental plaque formation by S. mutans and S. sobrinus ($IC_{50}$= 0.079 and 0.142 mg/mL, respectively), which was caused, in part, by the inhibitory effect on the activity of glucosyltransferases. A significant reduction of glycolytic acid production was found at the concentration as low as 0.032 mg/mL for S. mutans and 0.063 mg/mL for S. sobrinus. The possible bioactive compounds that are inducing in vitro anti-cariogenic activity of DF are unknown. Based on the preliminary phytochemical analysis, the activity of DF may be related to the presence of anthraquinones, cardiac glycosides, coumarines, sterols/terpenes, and phenolics. These results indicate that DF is probably useful for the control of dental plaque formation and subsequent dental caries development.
본 연구에서는 도라지 추출물의 항균활성을 밝히고자 S. mutans와 C. albicans에 대한 영향을 조사하였다. 또한 항염활성을 알아보고자 Raw 264.7 세포에서 추출물 농도에 따른 NO 생성 저해율을 조사하였다. 연구 재료는 국내산 100% 도라지분말을 구입하여 사용하였으며, 실험균주로는 S. mutans KCTC 3065 와 C. albicans KCTC 7965를 사용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 도라지 추출물의 농도가 높을수록 S. mutans의 성장 억제율이 현저히 높아졌다. 도라지 추출물의 농도가 높을수록 C. albicans의 성장 억제율이 현저히 높아졌다. Raw 264.7세포에서 추출물을 10, $20{\mu}g/ml$의 농도로 첨가하였을 때 각각 29.2, 26.1%의 NO 생성 저해율이 나타났다. 이는 도라지가 항균 및 항염물질로서 활용 가능함을 의미한다.
Park, Bog-Im;You, Yong-Ouk;Mo, Ji-Su;An, So-Youn;Choi, Na-Young;Kim, Kang-Ju
International Journal of Oral Biology
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제42권1호
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pp.25-31
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2017
Dental caries is the most common chronic disease in the dental field. Streptococcus mutans (S. mutans) is the most important bacteria in the formation of dental plaque and dental caries. In a previous study, we confirmed that the essential oil of Chrysanthemum boreale has antibacterial activity against S. mutans. Alpha-pinene is one of the major chemical components of Chrysanthemum boreale essential oil. In the present study, we investigated the inhibitory effects of ${\alpha}-pinene$ on cariogenic properties such as growth, acid production, biofilm formation, and bactericidal activity on S. mutans. Alpha-pinene at a concentration range of 0.25-0.5 mg/mL significantly inhibited the growth of S. mutans and acid production of S. mutans. Biofilm formation was significantly inhibited at > 0.0625 mg/mL ${\alpha}-pinene$, similar to the data from scanning electronic microscopy. Under confocal laser scanning microscopy, the bacterial viability was decreased by ${\alpha}-pinene$ in a dose-dependent manner. These results suggested that ${\alpha}-pinene$ may be a useful agent for inhibiting the cariogenic properties of S. mutans.
생약제제 중에서 귤피는 항산화작용, 순환기계 질병의 예방, 항염증, 항알레르기, 항균, 항바이러스, 지질 저하 작용, 면역 증강작용, 모세혈관 강화작용 등이 있는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 귤피 추출물이 치아우식 원인균으로 알려진 S. mutans에 미치는 항균효과와 GTase활성에 미치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 추출물을 5, 10, 20 mg/ml의 농도로 배지에 첨가한 후 S. mutans의 성장억제효과를 확인한 결과, 농도가 높을수록 colony의 수가 현저히 줄어드는 것을 관찰 할 수 있었다. 8 시간 후 측정하였을때 5 mg/ml에서 92%, 10 mg/ml에서 95%, 20 mg/ml 에서 99%의 높은 성장억제율을 나타내었다. 또한 추출물의 GTase 활성 저해율을 측정한 결과, 추출물의 농도가 높아질수록 저해율이 급격히 증가하는 것으로 나타났으며, 5 mg/ml에서는 42%의 강한 활성 저해 효과를 보였다.
본 연구는 치아우식증의 주 원인균으로 작용하는 S. mutans에 특이적인 앱타머 및 그 작용 기전에 관한 것으로 더욱 상세하게는 SELEX방법을 이용하여 S. mutans에 특이적인 앱타머를 선별하고, 앱타머와 결합하는 단백질 분자를 정제 및 동정함으로써 S. mutans의 부착에 관련된 기전을 보다 더 명확하게 규명하고자 하였다. 표적분자에 높은 친화도와 선택성으로 결합할 수 있는 특성을 가지는 앱타머는 3차원적인 특이적 구조에 의해 표적물질에 대해 수 nM ~ 수 pM 수준의 높은 결합력과 선택성을 지니고 있으며, 항체와 유사한 특성을 가지는 핵산으로 여겨지고 있다. 또한, 항체에 비해 안정성이 매우 높아 실온 보관이나 운반이 가능하고, 장시간이나 반복사용이 요구되는 진단용으로의 응용이 매우 용이하다. 또한 생체 내 면역거부반응이 거의 일어나지 않는 점 등을 바탕으로 보다 저렴한 앱타머로 대체하려는 시도가 이루어지고 있으며, 이는 치료용으로의 개발연구에 매우 중요한 장점이 될 수 있다. 이를 위하여 39개의 random sequence를 갖는 DNA library를 제조하고, S. mutans를 앱타머 선별의 대상물질로 하여, SELEX 방법을 통하여 선별하고 pCR2.1 cloning vector에 cloning하고, 그 염기서열을 분석하였다. 그 결과 6종의 서로 다른 염기서열을 갖는 앱타머를 선별하였으며, 선별된 앱타머 중 SM-2를 이용하여 앱타머와 직접 결합하는 단백질을 분리, 동정하였다. 위의 결과로부터 선별된 앱타머들은 S. mutans에 선택적으로 결합함을 확인하였고, 이 앱타머는 세균의 당 대사 및 단백질 합성 관련 단백질에 결합함으로서 세균의 부착을 억제 할 수 있음을 확인하였다.
치아우식은 Streptococcus mutans와 S. sobrinus가 주요 원인균이며, 이를 예방하기 위해서 구강 청결제를 사용한다. 그러나 구강청결제의 부작용 및 해로움으로 인하여 소아에게 권장하기에 주위를 요한다. 전기 분해수는 물을 전극을 통해서 전류를 흘려주어 생성되는 용액으로 항균력을 갖는다. 본 연구에서는 전기 분해수를 구강 청결제 대용으로 사용하기 위해서 치아 우식원성 세균 및 바이오 필름에 대한 항균력을 조사하였다. 염화나트륨이 포함된 증류수를 백금전극을 이용하여 전기 분해수를 생성하였다. 전기분해 수소수의 물리화학적 성분을 분석하고 S. mutans 및 S. sobrinus 배양액을 원심분리하여 세균을 얻고 전기 분해수, 알코올 및 불소가 포함된 구강 청결제를 처리하고 살아있는 세균 수를 배양을 통해서 조사하였다. 또한 치아우식균의 바이오 필름을 형성시킨 후, 전기 분해수 및 구강 청결제를 처리하여 바이오 필름 제거능을 크리스탈 바이올렛 염색을 이용하여 분석하고, 바이오 필름 내 살아있는 세균수의 양은 배양을 통하여 분석하였다. 전기분해수는 높은 농도의 자유염소 (free chlorine)을 포함하고 중성 페하를 보였다. 전기 분해수는 유의하게 S. mutans 및 S. sobrinus에 대해서 항균력을 보였으며, 이 세균들의 바이오 필름 제거능 및 바이오 필름 내 세균에 대해서도 항균력을 보였다. 전기 분해수는 부유세균에 대해서 알코올이 포함된 구강청결제보다 약한 항균력을 보였지만, 바이오 필름 세균에 대해서는 더 강한 항균력을 나타냈다. 이러한 결과를 바탕으로 중성 전기 분해수는 치아우식 예방을 위한 기존 구강 청결제의 대체 용액으로 사용이 가능할 것으로 사료된다.
We studied the effect of Bamboo salt-pro on the growth and acid production of S. mutans. The growth of S.mutans was reduced by the presence of the Bamboo salt-pro (1 mg/ml) and NaCl (1 mg/ml) significantly, and the positive control group (1 % of NaF) also exhibited antibacterial activity significantly. Bamboo salt-pro (1 mg/ml) reduced the rate of acid production by S. mutans. Bamboo salt alone did not demonstrate such a reduction in acid production at the concentration of 1 mg/ml. The inhibitory action of Bamboo salt-pro on acid production was found at a concentration of 1 mg/ml, but bamboo salt alone was not at a concentration of 1 mg/ml. In addition, we investigated the anti-inflammatory effect of Bamboo salt-pro on human mast cell line HMC-1. Bamboo salt-pro (0.1 and 0.01 mg/ml) inhibited significantly the secretion of inflammatory cytokine, tumor necrosis factor-a with $59.47{\pm}0.15%$, $51.98{\pm}0.16%$ respectively. Our results suggest that Bamboo salt-pro importantly contributes to the prevention or treatment of periodontitis and other oral diseases and inflammatory diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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