In our previous studies, we selected three antagonistic bacteria, KJ1R5, KJ2C12, and KJ9C8 against Phytophthora capsici, the casual agent of Phytophthora blight of pepper. For elucidating production, root colonization, and total microbial activity were investigated. The dual culture assay was accomplished to elucidate existence of antibiotics. In this assay, any antagonistic bacteria did not inhibit growth of six important fungal plant pathogens, suggesting that these antagonists do not produce antibiotics. root surface or rhizosphere soil colonizations were examined with spontaneous rifampicin-resistant mutants equal to antagonistic ability of wild types. KJ2C12 colonized consistently rhizosphere soil while yellowish colonies of KJ1R5 and KJ9C8 well colonized root surfaces and rhizosphere soil. Total microbial activity in pots treated with the antagonistic bacteria was measured using fluorescein diacetate hydrolysis. total microbial activity of three antagonistic bacteria treatments was significantly higher than that of buffer-treated control until 4days after treatment. However, total microbial activity of treatment of three antagonistic bacteria decreased after 7 days. These results indicate that the antagonistic bacteria, KJ1R5 and KJ9C8 colonized and protected roots well against Phytophthora blight of pepper through competition of infection courts, especially competitions.
Endophytic bacterial communities of tidal flat plants antagonistic to oomycete plant pathogens were studied by the isolation of 256 root colonizing endophytic bacteria from surface-disinfected root tissues of six plants ($Rosa$$rugosa$, $Suaeda$$maritima$, $Vitex$$rotundifolia$, $Carex$$scabrifolia$, $Glehnia$$littoralis$ and $Elymus$$mollis$) growing in a tidal flat area of Namhae Island, Korea. To understand the antagonistic potential, an $in$$vitro$ antagonistic assay was performed to characterize and identify strains that were antagonistic to the oomycete plant pathogens $Phytophthora$$capsici$ and $Pythium$$ultimum$ from the total population. Nine percent of the total number of isolated bacteria exhibited in vitro inhibitory activity against target plant pathogenic oomycetes. Taxonomic and phylogenetic placement of the antagonistic bacteria was investigated by analysis of the 16S rRNA gene sequences. The sequence analysis classified the antagonistic strains into four major classes of the domain bacteria ($Firmicutes$, ${\alpha}-Proteobacteria$, ${\gamma}-Proteobacteria$ and $Actinomycetes$) and 10 different genera. Further production of secondary metabolites, hydrolytic enzymes and plant growth promoting traits were determined for the putative new species of antagonistic endophytic bacteria. These new strains could not be identified as known species of ${\alpha}-Proteobacteria$, and so may represent novel bacterial taxa. The unexpected high antagonistic bacterial diversity associated with the tidal flat plants may be indicative of their importance in tidal flat plants as a promising source of novel antimicrobial compounds and biocontrol agents.
This study was conducted to investigate the effect of antagonistic bacteria and pathogenic fungi on growth and yields of white clover(Trifo1iurn repens L.) in continuous cropping soil(CCS) and non-continuous cropping soil(NCCS). The gowth experiment of white clover was conducted at pots in a vinyl house. White clover was established by seeding into pots of 12 cm in diameter and 9 cm in depth containing 1:l mixture of soil and vermiculite with antagonistic bacteria and pathogenic fungi. In dark culture experiment, white clover lived longer in treatment of antagonistic bacteria than in treatment of control, but lived shorter in CCS than in NCCS. Dry weight of white clover was increased by the inoculation of the antagonistic bacteria(p< 0.05), but decreased by the inoculation of the pathogenic fungi(p< 0.05) both CCS and NCCS. In conclusion, bacterization of white clover with antagonistic bacteria enhances the growth and yield of white clover.
This study was conducted to investigate the effects of antagonistic bacteria and pathogenic fungi on the growth of tall fescue(Festuca arundinacea Schreb.) in continuous cropping soil(CCS) and non-continuous cropping soil(NCCS). Tall fescue was established by seeding into pots of 11 cm in diameter and 9 cm in depth containing 1 : 1 mixture of soil and vermiculite, and cultivated at pots with antagonistic bacteria and pathogenic fungi in a vinyl house. The bacteria used in this study were Bacillus subtilis and hsants. B. subtilis was isolated and identified kern forage rhizosphere soil and fusants were isolated through cell hsion from B. subtilis and B. thwingiensis. B. subtilis was named as B. subtilis 101 and hsants were named as F-3, F-7 and F-8. In dark culture experiment, tall fescue inoculated with the antagonistic bacteria lived longer than that of control in both CCS and NCCS. However, tall fescue of CCS lived shorter than that of NCCS. Dry weight of tall fescue inoculated with the antagonistic bacteria was higher than that of tall fescue inoculated with pathogenic hngi in both CCS and NCCS(P< 0.05), and the antagonistic bacteria showed positive effects on the growth of tall fescue. However, Dry weight of tall fescue was decreased by the inoculation of the pathogenic b g i in both CCS and NCCS(P< 0.05).
Lee, Yong Se;Ho Young Lee;Chang Ho Lee;Hee Sung Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제5권6호
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pp.346-352
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1995
For isolation of antibiotic-producing bacteria antagonistic to Fusarium oxysporum, a total of 327 microorganisms were screened from sesame-growing soils collected at various locations in Korea by the modified Herr's triple-agar-Iayer technique. Among the 36 bacterial isolates further screened by the dual culture test on tryptic soy agar, 10 were tested to show their antagonistic activity against 14 plant pathogenic fungi. Bacterial culture filtrates were shown either to inhibit some phytopathogenic fungal growth or to suppress F. oxysporum infection of sesame plants maintained in the green house. An isolate, B23, with the most prominent antagonistic activity was identified as Bacillus subtilis.
In order to screen the antagonistic bacteria which inhibit the growth of the apple pathogen, Penicillum expansum, we isolated an effective bacterial strain and investigated into the antifungal activity of the antagonist and it's identification. The eleven strains of bacteria which strongly inhibited P. expansum were isolated from the nature, and the best antagonistic bacterial strain designated as CH142, was selected. The antagonistic strain CH142 was identified to be the genus Bacillus subtilis based on morphological and biochemical characterization. The CH142 showed 55.9% of antifungal activity against the growth of P. expansum. By the treatment of the culture broth and the heat treated culture filtrate of it, the B. subtilis CH142 showed 90% and 15% of antifungal activity, respectively.
한국식물병리학회 1994년도 Proceedings of International Symposium on BIOLOGICAL CONTROL OF PLANT DISEASES Korean Society of Plant Pathology
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pp.50-61
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1994
Biological control of important fungal diseases such as Phytophthora blight of red pepper, gary mold rot of vegetables, and powdery mildew of many crops was attempted using an antagonistic bacterium, Bacillus sp. AC-1 in greenhouses and fields. The antagonistic bacterium isolated from the rhizosphere soils of healthy red pepper plant was very effective in the inhibition of mycelial growth of plant pathogenic fungi in vitro including Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, Pyricularia oryzae, Botrytis cinerea, Valsa mali, Fusarium oxysporum, Pythium ultimum, Alternari mali, Helminthosporium oryzae, and Colletotrichum gloeosporioides. Culture filtrate of antagonistic Bacillus sp. AC-1 applied to pot soils infested with Phytophthora capsici suppressed the disease occurrence better than metalaxyl application did until 37 days after treatment in greenhouse tests. Treatments of the bacterial suspension on red pepper plants also reduced the incidence of Phytophthora blight in greenhouse tests. In farmers' commercial production fields, however, the controlling efficacy of the antagonistic bacteria was variable depending on field locations. Gray mold rot of chinese chives and lettuce caused by Botrytis cinerea was also controlled effectively in field tests by the application of Bacillus sp. AC-1 with control values of 79.7% and 72.8%, respectively. Spraying of the bacterial suspension inhibited development of powdery mildew of many crops such as cucumber, tobacco, melon, and rose effectively in greenhouse and field tests. The control efficacy of the bacterial suspension was almost same as that of Fenarimol used as a chemical standard. Further experiments for developing a commercial product from the antagonistic bacteria and for elucidating antagonistic mechanism against plant pathogenic fungi are in progress.
고추 역병균에 대한 Pseudomonas속 및 Bacillus속 길항미생물을 역병균과 동일한 서식처인 근권에서 분리하고자 4지역의 고추재배지에서 건전고추의 근권토양을 채취하여 선택배지를 사용하여 분리하였다. Pseudomonas속 237개 Bacillus속 260개 총 497개 균주중 327개 균주는 역병균에 대해 거의 활성이 없거나 역병균의 균사생장을 20$\%$ 이하로 억제시켰으나, Pseudomonas속 8균주와 Bacillus속 4균주는 50%이상 역병균의 균사생장을 억제시켰다. 이들 균주의 활성은 V-8 juice agar보다 TSA에서 높았으며, TSA에서 역병균의 균사생장을 60$\%$ 이상 억제시키는 균주를 선발하여 API system을 사용하여 P. cepacia (P0704, P1201), B. polymyxa (B1101) 및 B. subtilis (B1901)로 동정하였다. 이들 균주의 배양여액은 고추역병균의 유주자발아 및 균사생장을 억제시켜 항균성물질을 생성분비하는 균주로 판단되었다. 고추 역병발생 억제효과를 조사한 결과 P0704가 46.7$\%$ 로 가장 높았으며, 나머지 균주는 26.7$\%$ 에서 13.4$\%$ 로 나타났다.
This study takes strawberry-fruits as the test material and discusses the effect of Burkholderia contaminans B-1 on preventing postharvest diseases and inducing resistance-related substances in strawberry-fruits. Soaking and wound inoculating is performed to analyze the inhibitory effects of different treatment solutions on the gray mold of postharvest strawberry-fruits. The count of antagonistic bacteria colonies in the wound is found, and the dynamic growth of antagonistic bacteria and the pathogenic fungus is observed by electron microscopy. The results indicated that, either by soaking/wound-inoculating, the fermentation and suspension of antagonistic bacteria significantly reduced the incidence of postharvest diseases of strawberry-fruits. With wound inoculation, the inhibition rate of antagonist fermentation and suspension ($1{\times}10^{10}cfu/ml$) respectively reached 77.4% and 66.7%. It also led to a significant increase in the activity of resistance-related enzymes, i.e., phenylalanine ammonia lyase (PAL), 4-coumarate coenzyme A ligase (4CL), cinnamate-4-hydroxylase (C4H) and chalcone isomerase (CHI). On 1 d and 2 d post-treatment, the activity of 4CL was respectively 3.78 and 6.1 times of the control, and on 5 d, the activity of PAL was increased by 4.47 times the control. The treatment of antagonistic bacteria delayed the peaking of cinnamyl-alcohol dehydrogenase (CAD) activity and promoted the accumulation of lignin and total phenols. The antagonistic bacteria could be well colonized in the wounds. On 4-5 d post-inoculation, the count of colonies was $10^8$ times of that upon inoculation. Electronmicroscopy indicated that the antagonistic bacteria delayed the germination of pathogenic spores in the wounds, and inhibited further elongations of the mycelia.
한국식물병리학회 1994년도 Proceedings of International Symposium on BIOLOGICAL CONTROL OF PLANT DISEASES Korean Society of Plant Pathology
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pp.75-85
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1994
Biocontrol is playing a more and more important role in plant disease management. Evidences show that there are optimum prospects for people to apply biocontrol approach to control plant disease or to study the mechanism of antagonism.“The study of Antagonistic Protein of Bacillus spp.to Xanthomonas oryzae pv. oryzae”has been worked in our laboratory since 1986. One hundred and thirty antagonistics bacteria were screened out, most of them belonged to Bacillus spp., and showed very strong inhibitive effect to various plant pathogens. Nine antagonistic proteins (peptides) were purified (P11-I, P11-II, B8, B826-I, B826-II, A30-I, A30-II, G35). Two antagonistic protein related DNA fragments (B826-I, A30-II) were cloned and sequenced. B826-I DNA fragment composed by 905 bp, and it contained two ORF encoding 95, and 54 amino acids, respectively. By using Rifr and Kamr as the selective markers, we found the bacteria could colonize on rice leaf for at least 40 days. In greenhouse the antagonistic bacteria showed certain degree of control efficiency.
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