본 연구는 당근에서 추출한 당근당단백질(carrot glycoprotein, 이하 CG라 명함)의 물리화학적인 특성을 조사하기위하여 수행되었다. 천연 식물성 원료인 당근에서 CG를 제조하여 물리화학적인 특성을 분석하였다. 영양성분 조성을 분석한 결과 CG는 당단백질로서 2.35%의 탄수화물과 94.2%의 단백질로 구성되어있는 것으로 나타났다. 아미노산 조성분석 결과 CG는 콜라겐 펩타이드의 특징인 hydroxyproline과 glycine은 소량 검출되었으며, 포도당과 지방 대사에 관여하는 glutamicacid와 asparticacid가 높게 검출되었다. 또한 열량 분석결과 100 g의 CG는 342.1 kcal의 열량을 지니고 있는 것으로 나타났다. CG의 분자량 분석 결과에서는 594 Da 이하의 평균분자량 분포를 나타내는 특성을 가지고 있는 것을 알 수 있었다.
본 실험은 사료내 아미노산 균형과 라이신 함량이 성장기 브로일러의 에너지 대사 중 Heat production(HP)과 질소 대사에 어떤 영향을 미치는 규명하기 위해 실시하였다. 실험1은 여러 단계의 조단백 함량과, 제1제한 아미노산으로써 일정 농도의 라이신 함량으로 만들어진 사료로 테스트하였다. 실험2에서는 이와 반대로 일정한 조단백 함량과 각기 다른 수준의 라이신을 함유한 사료들을 사용하였다. Thermoregulatory demand에 따른 영향을 최소화하기 위해 실험3은 이전 실험들(20 $^{\circ}C$)보다 높은 온도인 30 $^{\circ}C$에서 시행되었다. 에너지 및 질소 대사 실험은 컴퓨터로 제어되는 multi-chamber calorimeter system을 사용하여 조사하였으며 사료의 단백질 및 라이신 조성에 따른 닭의 HP를 측정하였다. 또한 이를 통해 나온 결과들은 에너지 대사 컴퓨터 시뮬레이션 모델을 통한 예측치와 비교하였다. 다양한 단백질 함량과 일정한 라이신 함량의 사료를 통한 실험에서 단백질 함량이 증가함에 따라 질소 섭취에서는 75 %의 증가가 나타났다. 이것은 질소 배출에 있어서 150 %의 증가를 가져왔으나 이에 따른 HP에 유의적인 차이는 보이지 않았다. 다양한 라이신 함량과 일정한 단백질 함량의 사료를 사용한 실험2에서는 최저 라이신과 최고 라이신 처리구 간에 3배의 증체량의 차이를 보여주었다. HP에 있어서는 라이신 증가에 따라 유의적으로 증가하는 경향을 보였으나 체중 보정치에 있어서는 유의차가 사라졌다. 실험1과 실험2, 두 실험의 시뮬레이션을 통한 HP 계산치에 있어서도 처리구들 간에 차이를 보이지 않았다. 30 $^{\circ}C$에서 실시된 실험3에서는 실험2와 동일하게 라이신 함량 증가에 따라 HP가 유의적으로 증가하였으나 그 경향은 이전 실험보다 크게 나타났다. 결과를 종합 할 때, 총 HP의 발생은 사료의 단백질 함량보다는 제한 아미노산 농도와 더욱 관련이 깊으며, 아미노산 불균형에 따른 질소 배출로 인해 발생하는 energy cost가 차지하는 비율은 높지 않은 것으로 사료된다. 또한 질소 축적율에서 볼 때, 사료내 아미노산 균형이 체내 질소 이용효율과 밀접한 관련이 있음을 확인하였다.
The human liver cDNA clone UDPGTh2, encoding a liver UDP-glucuronosyltransferase (UDPGT) was isolated from a .gamma. gt 11 cDNA library by hybridization to mouse transferase cDNA clone, UDPGTm1. UDPGTh2 encoded a 529 amino acid protein with an amino terminus membrane-insertion signal peptide and a carboxyl terminus membrane-spanning region. There were three potential asparagine-linked glycosylation sites at residues 67, 68, and 315. In order to obtain UDPGTh2 protein encoded from cloned human liver UDP-glucuronosyltransferase cDNA, the clone was inserted into the pSVL vector (pUDPGTh2) and expressed in COS 1 cells. The presence of a transferase with Mr-52,000 in transfected cells cultured in the presence of $[^{35}S]$ methionine was shown by immunocomplexed products with goat antimouse transferase IgG and protein A-Sepharose and analysis by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and autoradiography. The expressed UDPGT was a glycoprotein as indicated by electrophoretic mobility shift in Mr-3,000-4,000 when expressed in the presence of tunicamycin. The extent of glycosylation was difficult to assess, although one could assume that glycosyl structures incorporated at the level of endoplasmic reticulum were always the core oligosaccharides. Thus, it is likely that at least two moieties inserted can account for the shift of Mr-3,000-4,000. This study demonstrates the cDNA and deduced amino acid sequence of human liver UDP-glucuronosyltransferase cDNA, UDPGTh2.
Acetylation of lysine residues within the aminoterminal domains of the core histones plays a critical role in chromatin assemhly as well as in regulation of gene expression. To study the biochemical function of histone acetylation, we have cloned a cDNA encoding the catalytic subunit of human histone acetyltransferase, Hat1. Analysis of the predicted amino acid sequence of human Hat1 revealed an open reading frame of 419 amino acids with a calculated molecular mass of 49.5 kDa and an isoelectric point of 5.5. The amino acid sequence of human Hat1 is homologous to those of known and putative Hat1 proteins from various species throughout the entire open reading frame. The recombinant human Hat1 protein expressed in bacteria possesses histone H4 acetyltransferase activity in vitro. Both RbAp46 and RbAp48, which participate in various processes of histone metabolism, enhance the histone acetyltransferase activity of the recombinant human Hat1, indicating that they are both able to functionally interact with the human Hat1 in vitro.
The taste-active and nutritional components of Thai native, broilers, black-boned, and spent hen chickens were analyzed. The amounts of tasty amino acids especially glutamic acid were the highest in Thai native chicken. The black-boned chicken had the highest arginine content, related to the least amount of consumer satisfaction. Concerning nutritional quality, choline, and taurine were deemed important for brain function. The black-boned chicken showed the highest choline and taurine contents, unlike that of the spent hens. In contrast, broilers presented the highest betaine content, which might be attributed to their lipid metabolism. L-carnitine content was abundant in black-boned and Thai native chickens. Moreover, the amounts of essential amino acids were high in Thai native chicken. In conclusion, black-boned chicken proved to be an excellent nutritional source for health-conscience consumers, whereas the Thai native chickens were flavourful and delicious.
Three strains which accumulated large quantities of L-hlutamic acid as the chief product of metabolism in the presence of glucose and inorhanic ammonium salt under the aerobic condition sere newly isolated. These strains have the general characters as follows: Gram-positive, short fod-shaped, non-sporulating, non-motile, and facultative anaerobe. A change of cell shates was not almost observed in their life cycles and neither a phenomenon of cell-elongation nor a pleomorphism was recognized in any cases. Together with rigid stability in Gram-stain, these characters as above indicated evidences that newly isolates would belong to genus Brevibacterium clearly differentiated from genus Corynebacterium. At the same time the newly isolates, in addition to nutritional requirement of biotin and thiamine, showed the distinctive character of requirement of special amino acid such as histidine or cysteine for their considerable growth. These physiological characters including nitrates reduction, reaction on milk, and slow formation of acid from sugar also were useful in confirming that these bacteria would be Brevibacterium ammoniagenes.
In this study we cloned and characterized a novel lipid-accumulating gene, the oxidized low-density lipoprotein receptor 1 (OLR1), which is associated with lipogenesis. We analyzed the gene structure and detected the mRNA transcriptional expression levels in pig adipose tissues at different months of age (MA) and in different economic types (lean type and obese type) using real-time fluorescence quantitative PCR. OLR1 expression profile in different tissues of pig was analyzed. Finally, we studied the correlation between OLR1 and lipid metabolism related genes including peroxisome proliferator-activated $receptor{\gamma}2$ ($PPAR{\gamma}2$), fatty acid synthetase (FAS), triacylglycerol hydrolase (TGH), CAAT/enhancer binding protein $\alpha$ ($C/EBP{\alpha}$) and sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c). Results indicated that the OLR1 gene of the pig exhibited the highest homology with the cattle (84%), and the lowest with the mouse (27%). The signal peptide located from amino acid 38 to 60 and the domain from amino acid 144 to 256 were shared by the C-type lectin family. The expression level of OLR1 in pig lung was exceedingly higher than other tested tissues (p<0.01). In pig adipose tissue, the expression level of OLR1 mRNA increased significantly with growth (p<0.01). The expression level of OLR1 mRNA in obese-type pigs was significantly higher than that of lean-type pigs of the same monthly age (p<0.05). In adipose tissue, the expression of OLR1 correlated with $PPAR{\gamma}2$, FAS and SREBP-1c, but not TGH or C/EBP${\alpha}$. In conclusion, OLR1 was highly associated with fat deposition and its transcription, as suggested by high correlations, was possibly regulated by $PPAR{\gamma}2$ and SREBP-1c.
Wang, Xiaochen;Yang, Hongyu;Zhou, Wei;Liu, Jun;Xu, Ning
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권8호
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pp.1288-1298
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2019
Bacterial ATP synthases drive ATP synthesis by a rotary mechanism, and play a vital role in physiology and cell metabolism. Corynebacterium glutamicum is well known as an industrial workhorse for amino acid production, and its ATP synthase operon contains eight structural genes and two adjacent genes, cg1360 and cg1361. So far, the physiological functions of Cg1360 (GenBank CAF19908) and Cg1361 (GenBank CAF19909) remain unclear. Here, we showed that Cg1360 was a hydrophobic protein with four transmembrane helices (TMHs), while no TMH was found in Cg1361. Deletion of cg1360, but not cg1361, led to significantly reduced cell growth using glucose and acetic acid as carbon sources, reduced F1 portions in the membrane, reduced ATP-driven proton-pumping activity and ATPase activity, suggesting that Cg1360 plays an important role in ATP synthase function. The intracellular ATP concentration in the ${\Delta}cg1360$ mutant was decreased to 72% of the wild type, while the NADH and NADPH levels in the ${\Delta}cg1360$ mutant were increased by 29% and 26%, respectively. However, the ${\Delta}cg1361$ mutant exhibited comparable intracellular ATP, NADH and NADPH levels with the wild-type strain. Moreover, the effect of cg1360 deletion on L-valine production was examined in the L-valine-producing V-10 strain. The final production of L-valine in the $V-10-{\Delta}cg1360$ mutant reached $9.2{\pm}0.3g/l$ in shake flasks, which was 14% higher than that of the V-10 strain. Thus, Cg1360 can be used as an effective engineering target by altering energy metabolism for the enhancement of amino acid production in C. glutamicum.
Objective: The objective of this study was to investigate the phylogenetic and expression analysis of the angiopoietin-like (ANGPTL) gene family and their role in lipid metabolism in pigs. Methods: In this study, the amino acid sequence analysis, phylogenetic analysis, and chromosome adjacent gene analysis were performed to identify the ANGPTL gene family in pigs. According to the body weight data from 60 Jinhua pigs, different tissues of 6 pigs with average body weight were used to determine the expression profile of ANGPTL1-8. The ileum, subcutaneous fat, and liver of 8 pigs with distinct fatness were selected to analyze the gene expression of ANGPTL3, ANGPTL4, and ANGPTL8. Results: The sequence length of ANGPTLs in pigs was between 1,186 and 1,991 bp, and the pig ANGPTL family members shared common features with human homologous genes, including the high similarity of the amino acid sequence and chromosome flanking genes. Amino acid sequence analysis showed that ANGPTL1-7 had a highly conserved domain except for ANGPTL8. Phylogenetic analysis showed that each ANGPTL homologous gene shared a common origin. Quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction analysis showed that ANGPTL family members had different expression patterns in different tissues. ANGPTL3 and ANGPTL8 were mainly expressed in the liver, while ANGPTL4 was expressed in many other tissues, such as the intestine and subcutaneous fat. The expression levels of ANGPTL3 in the liver and ANGPTL4 in the liver, intestine and subcutaneous fat of Jinhua pigs with low propensity for adipogenesis were significantly higher than those of high propensity for adipogenesis. Conclusion: These results increase our knowledge about the biological role of the ANGPTL family in this important economic species, it will also help to better understand the role of ANGPTL3, ANGPTL4, and ANGPTL8 in lipid metabolism of pigs, and provide innovative ideas for developing strategies to improve meat quality of pigs.
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