Lee, Hyun Sook;Jung, Jae In;Kim, Kyeong-Hee;Park, Sang Jae;Kim, Eun Ji
Nutrition Research and Practice
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제14권5호
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pp.463-477
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2020
BACKGROUND/OBJECTIVES: Many studies have suggested that Rhus verniciflua Stokes (RVS) and its extract are anticancer agents. However, RVS had limited use because it contains urushiol, an allergenic toxin. By improving an existing allergen-removal extraction method, we developed a new allergen-free Rhus verniciflua Stokes extract (RVSE) with higher flavonoid content. In this study, we examined whether RVSE inhibits the ability of AGS gastric cancer cells to migrate and invade. MATERIALS/METHODS: The flavonoids content of RVSE was analyzed by HPLC. The effects of RVSE on migration and invasion in AGS cells were analyzed by each assay kit. Matrix metalloproteinase (MMP)-9, plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) and urokinase-type plasminogen activator (uPA) protein expression was analyzed by protein antibody array. The Phosphorylation of signal transducer and activator of transcription (STAT) 3 were assayed by Western blot analysis. RESULTS: RVSE treatment with 0-100 ㎍/mL dose-dependently reduced the ability of AGS cells to migrate and invade. Notably, treatment with RVSE strongly inhibited the expression of MMP-9 and uPA and the phosphorylation of STAT3. In contrast, RVSE treatment dramatically increased the expression of PAI-1. These results indicate that the inhibition of MMP-9 and uPA expression and STAT3 phosphorylation and the stimulation of PAI-1 expression contributed to the decreased migration and invasion of AGS cells treated with RVSE. CONCLUSIONS: These results suggest that RVSE may be used as a natural herbal agent to reduce gastric cancer metastasis.
감마선 조사에 의 한 마늘의 주요 알러젠 단백질인 allivin의 구조적 변화를 관찰하였다. Allivin 용액 (3.0 mg/mL in 0.01 M PBS, UH 7.4)과 생 마늘에 2.5, 5.0, 7.5, 10.0 kGy의 흡수선량을 갖도록 감마선을 조사하였다. 조사 후 용액의 절반을 0.22$\mu\textrm{m}$ filter로 여과하여 준비하였다. 감마선 조사에 의한 allivin의 변화는 UV spectrum과 SDS-PAGE를 사용하여 관찰하였다. 가시적으로 관찰하였을 때, 조사선량이 증가할수록 allivin 용액의 혼탁도가 증가하였으며 ,660 nm 파장에서의 흡광도의 증가로 확인할 수 있었다. 조사 후 여과한 allivin 용액의 UV spectrum 측정에서 혼탁도의 변화가 크게 감소되었으며, 선량이 증가할수록 용해된 단백질의 농도가 소하였다. SDS-PAGE시험에서 감마선 조사된 allivin의 큰 변화는 관찰되지 않았으나, 분자간 응집이 관찰되었다 그러나, 조사 후 여과한 시료에서 는 allivin의 감소가 관찰되었으며, 분자간 응집으로 발생된 끌림도 감소하였다. 생마늘에 대한 전기영동 결과는 차이가 없었다. 이 결과들은 감마선 조사가 수용액 상태에서 allivin의 알러지성을 감소시킬 수 있음을 시사한다.
Breastfeeding has been known as the best feeding practice to prevent allergies including atopic dermatitis (AD) However, the benefit on the prevention of allergic disease is still controversial. The objectives of this study were to examine the rate of sensitization to the protein of eggs, cow's milk and soy in exclusively breastfed infants and to evaluate antigen-antibody reaction between breast milk and serum of AD infant. Data on feeding and food hypersensitivity were obtained for 62 AD infants (32 male, 30 female) aged < 6 month who had visited Samsung Medical Center from September 2001 to May 2003. Food hypersensitivity was determined by measuring specific IgE to egg, cow's milk and soy. Specific IgE levels > 0.7 kU/L by CAP assay (Pharmacia, Uppsala, Sweden) were considered positive. The rates of sensitization in breastfed infants were $41.9\%$ (26/62) to egg, $30.6\%$ (19/62) to milk and $18.0\%$ (11/62) to soy. Immunoblotting analyses were performed using breast milk with the matched serum of seven AD infants (4 male/3 female). Binding patterns of AD infant's IgE to breast milk extract showed visible specific band for immunoglobulin, especially in case of a lactating mother who did not completely restricted ingestion of egg, milk and soy. These results indicate that sensitization to food allergen develops via breast milk feeding. Breast milk feeding should be recommended in infants at risk of developing allergic disease, but maternal intake of highly allergenic food might be restricted for prevention and treatment of food allergy among the babies with AD.
The aim of this study was to produce enzymatic hydrolysis of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA with alcalase for the possible application of hypoallergenic foods toward cow's milk allergenic infant. The molecular weights of most of the peptides in hydrolysates from ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA by alcalase were below 3,000 dalton. Antigenesity of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA hydrolysates to rabbit anti-${\alpha}$-LA antiserum, ${\beta}$-LG antiserum and BSA antiserum were remarkably decreased by more than $10^{-3}$ at 20% inhibitionrate. Antigenesity of polyvalent antigenic peptide in ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA hydrolysates to specific rabbit anti-${\alpha}$-LA antiserum, ${\beta}$-LG antiserum and BSA antiserum was determined by PCS test using guina-pig. Hydrolysates of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA with less than 3,000 dalton did not show polyvalent antigenic reaction against rabbit antiserum. Hydrolysates of ${\alpha}$-LA, ${\beta}$-LG and BSA could be a source for the manufacturing of hypoallergenic food.
Islam, Mohammad Ashiqul;Ekeberg, Dag;Rukke, Elling-Olav;Vegarud, Gerd Elisabeth
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제28권4호
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pp.559-567
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2015
Ex vivo digestion of proteins and fat in Red Chittagong Cattle milk from Bangladesh was carried out using human gastrointestinal enzymes. This was done to investigate the protein digestion in this bovine breed's milk with an especial focus on the degradation of the allergenic milk proteins; ${\alpha}_{s1}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin and also to record the generation of peptides. Lipolysis of the milk fat and release of fatty acids were also under consideration. After 40 min of gastric digestion, all the ${\alpha}_s$-caseins were digested completely while ${\beta}$-lactoglobulin remained intact. During 120 min of duodenal digestion ${\beta}$-lactoglobulin was reduced, however, still some intact ${\beta}$-lactoglobulin was observed. The highest number of peptides was identified from ${\beta}$-casein and almost all the peptides from ${\kappa}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin were identified from the gastric and duodenal samples, respectively. No lipolysis was observed in the gastric phase of digestion. After 120 min of duodenal digestion, milk fat showed 48% lipolysis. Medium (C10:0 to C16:0) and long (${\geq}C17:0$) chain fatty acids showed 6% to 19% less lipolysis than the short (C6:0 to C8:0) chain fatty acids. Among the unsaturated fatty acids $C18:1{\sum}others$ showed highest lipolysis (81%) which was more than three times of $C18:2{\sum}all$ and all other unsaturated fatty acids showed lipolysis ranging from 32% to 38%. The overall digestion of Bangladeshi Red Cattle milk was more or less similar to the digestion of Nordic bovine milk (Norwegian Red Cattle).
개의 아토피성 피부염에서 Dermatophagoides farinae의 항원을 immunoblot을 통해 확인하였다. 실험은 D. farinae에 의해 아토피성 피부염이 유발된 16마리와 임상적으로 건강한 10마리 개의 혈청으로 수행하였으며, SDS-PAGE를 실시하여 D. farinae 추출물의 항원들이 15에서 220 kDa 범위 내에 존재하는 것을 관찰하였다. Immunoblot 결과, 임상적으로 건강한 10마리 개의 혈청에서는 단백띠가 보이지 않았으며, D. farinae에 의해 아토피성 피부염이 유발된 16마리 개의 혈청을 이용한 실험에서는 14마리에서 109 kDa, 13마리에서 44 kDa, 11마리에서 177 kDa, 7마리에서 27 kDa, 5마리에서 75 kDa, 3마리에서 15 kDa의 단백띠가 관찰되었다. 즉, D. farinae에 의해 아토피성 피부염이 유발된 개체 중 50% 이상에서 관찰되는 주요 항원은 177 kDa, 109 kDa, 44 kDa 항원이었다. 본 실험과 같이 주요 항원들을 확인하는 이러한 연구는 아토피성 피부염에 대한 새로운 면역 치료의 전략과 제제의 개발에 기여할 수 있을 것으로 생각된다.
Kim, Koth-Bong-Woo-Ri;Lee, So-Young;Song, Eu-Jin;Park, Jin-Gyu;Lee, Ju-Woon;Byun, Myung-Woo;Kim, Kyu-Earn;Ahn, Dong-Hyun
한국축산식품학회지
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제30권3호
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pp.397-402
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2010
Pork is an excellent source of essential nutrients such as protein. However, pork can trigger hypersensitivity and serum albumin of pork is known as major allergen. In this study, to evaluate the effect of gamma irradiation on the allergenicity of porcine serum albumin (PSA), PSA solution was irradiated at 3, 5, 7, 10, 15, and 20 kGy. The changes in the ability of PSA to bind IgG and patient's serum caused by gamma irradiation were observed by ci-ELISA and immunoblotting. SDS-PAGE was used for measuring the conformational change of gamma-irradiated PSA. The ability of 3-kGy-irradiated PSA to bind p-IgG and patient's serum was decreased to 30% and 15%, respectively. The binding ability showed no significant differences among all irradiated samples. SDS-PAGE showed that the irradiated PSA bands were degraded and aggregated. Immunoblotting of irradiated PSA revealed that IgG and patient's serum were rarely recognized at 3 kGy. Therefore, gamma irradiation could be applied to less-allergenic pork products.
Islam, Sk Injamamul;Mou, Moslema Jahan;Sanjida, Saloa;Tariq, Muhammad;Nasir, Saad;Mahfuj, Sarower
Genomics & Informatics
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제20권1호
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pp.11.1-11.20
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2022
Vibrio harveyi belongs to the Vibrio genus that causes vibriosis in marine and aquatic fish species through double-stranded DNA virus replication. In humans, around 12 Vibrio species can cause gastroenteritis (gastrointestinal illness). A large amount of virus particles can be found in the cytoplasm of infected cells, which may cause death. Despite these devastating complications, there is still no cure or vaccine for the virus. As a result, we used an immunoinformatics approach to develop a multi-epitope vaccine against most pathogenic hemolysin gene of V. harveyi. The immunodominant T- and B-cell epitopes were identified using the hemolysin protein. We developed a vaccine employing three possible epitopes: cytotoxic T-lymphocytes, helper T-lymphocytes, and linear B-lymphocyte epitopes, after thorough testing. The vaccine was developed to be antigenic, immunogenic, and non-allergenic, as well as having a better solubility. Molecular dynamics simulation revealed significant structural stiffness and binding stability. In addition, the immunological simulation generated by computer revealed that the vaccination might elicit immune reactions in the actual life after injection. Finally, using Escherichia coli K12 as a model, codon optimization yielded ideal GC content and a higher codon adaptation index value, which was then included in the cloning vector pET2+ (a). Altogether, our experiment implies that the proposed peptide vaccine might be a good option for vibriosis prophylaxis.
Objective : Morus alba Linne Root Bark (MRAL) is a medicinal herb in Korean Medicine, known for its anti-inflammatory and anti-allergic properties. However, its mechanisms of action and the cellular targets have not yet been found and the study was developed to investigate the allergic suppressive effect of MRAL. The purpose of this study is to investigate the allergic suppressive effects of MRAL on activation of MC/9 mast cells. Methods : Cytotoxic activity of MRAL (50, 100, 200, 400 ${\mu}g/mL$) on MC/9 mast cells measured using EZ-Cytox cell viability assay kit (WST reagent). The levels of interleukin-5 (IL-5), IL-13 and IL-4, IL-5, IL-6, IL-13 mRNA expression were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and real-time PCR respectively. The expression of transcription factors such as GATA-1, GATA-2, NFAT, AP-1 and NF-${\kappa}B$ p65 DNA binding activity were measured by western blot and electrophoresis mobility shift assay (EMSA). Results : Our results indicated that MRAL (50 ${\mu}g/mL$, 100 ${\mu}g/mL$) significantly inhibited PMA/Ionomycin-induced production of IL-5 and IL-13 and the expression of IL-4, IL-5, IL-6 and IL-13 mRNA in MC/9 mast cells. Moreover, MRAL (50 ${\mu}g/mL$, 100 ${\mu}g/mL$) inhibited PMA/Ionomycin-induced GATA-1, GATA-2, NFAT-1, NFAT-2, c-Fos protein expression and NF-${\kappa}B$ p65 DNA binding activity in MC/9 mast cells. Conclusions : In conclusion, we suspect the anti-allergenic activities of MRAL, may be related to the regulation of transcription factors GATA-1, GATA-2, NFAT-1, NFAT-2, c-Fos and NF-${\kappa}B$ p65 DNA binding assay causing inhibition of Th2 cytokines IL-5 and IL-13 in mast cells.
본 연구에서는 우유 앨러지의 원인물질중의 하나인 casein단백질을 생체가 알르겐 물질로 인식할 수 없는 수준의 분자로까지 분해하여 항원성을 저감시키고 또한 풍미가 좋은casein분해물을 제조하기 위하여 분해특성이 다른 효소를 사용하여 만들어진 분해물의 특성과 항원성을 조사하였다. 박테리아 효소인 Neutrase, Alcalase, Protamex, Pescalase을 처리한 casein가수분해물의 평균분자량은 1,100~2,300 dalton이었고 곰팡이 효소인 MP, Flavourzyme, LP, Promod경우에는 거의 770 ~ 1,140 dalton범위였다. 항원성 저감정도를 측정하기 위하여 토끼항casein항혈청을 이용하여 ELISA억제시험을 실시한 결과 항체결합을 50%저해하는 미분해casein단백질의 농도는 $10^{3.6}$ng/ml였다. 박테리아 효소인 Neutrase, Alcalase, Protamex, Pescalase에 의한 Casein가수분해물의 값은 각각 $10^{4.8},\;10^{5.5},\;10^{5.9},\;10^{6.1}\;ng/ml$이었고, 곰팡이 효소인 MP, Flavourzyme, LP, Promod경우에는 각각 $10^{6.3},\;10^{6.3},\;10^{6.5},\;10^{6.8}\;ng/ml$로 나타났다. 박테리아와 곰팡이효소의 조합인 Fla+prota, Pro+prota처리구에서는 $10^{7.4},\;10^{7.3}ng/ml$로 나타났다. 따라서 미분해 casein의 항원성을 1로 하면, casein분해물의 항원성은 최고 1/8,000 이하로 저하되었다. 수신피부아나피랙시스반응(PCA)을 이용한 항원성시험에서 casein으로 피하 감작할 경우 푸른색 반점이 나타났으나 효소처리구에서는 이러한 반점이 나타나지 않아 충분히 항원성이 저감화 되었음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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