본(本) 시험(試驗)은 우리나라 토착대두근류균(土着大豆根瘤菌)의 균주(菌株) 인식(認識)과 분류(分類)를 위하여 서울농대(農大) 시험포장(試驗圃場)의 13개(個) 대두품종근류(大豆品種根瘤)에서 순수분리(純粹分離)한 대두근류균(大豆根瘤菌) 27개(個)와 본(本) 실험실보유(實驗室保有) 대두근류균(大豆根瘤菌) 6개(個)에 대하여 혈청면역적(血淸免疫學的) 시험(試驗)을 행(行)하였으며 그 결과(結果)는 다음과 같이 요약(要約)된다. 1. 항원조성(抗原組成)이 상이(相異)한 4개(個)의 대두근류균(大豆根瘤菌)에 대하여 얻어진 4가지 항혈청(抗血淸)과 위 33개(個) 대두근류균(大豆根瘤菌)을 tube 응집반응(凝集反應), 응집소(凝集素) 흡착반응(吸着反應) 및 gel 면역확산반응(免疫擴散反應)을 실시(實施)한 결과(結果), 33개(個) 대두근류균중(大豆根瘤菌中) 25개(個)를 4가지 serogroup과 그에 속(屬)한 각(各) serotype으로 구분(區分)할 수 있었다. 2. 33개(個) 대두근류균중(大豆根瘤菌中) Hill, 밀양품종(密陽品種)에서 분리(分離)한 2가지 분리균(分離菌) 및 방사(放射), 장백품종(長白品種)에서 분리(分離)한 2가지 분리균(分離菌), 그리고 팔달(八達), 새알, 장백품종(長白品種)에서 분리(分離)한 4가지 분리균(分離菌)이 혈청면역학적(血淸免疫擧的) 검정(檢定)에 의하여 각각(各各) 동일균주(同一菌株)로 밝혀졌다. 3. 본(本) 실험결과(實驗結果), 혈청면역학적(血淸免疫學的) 방법(方法)에 의하여 우리나라 토착대두근류균(土着大豆根瘤菌)의 균주(菌株) 인식(認識) 및 체계적(體系的)인 분류(分類)와 아울러 균주(菌株)와 대두품종간(大豆品種間)의 친화성(親和性)을 밝히는 것이 가능(可能)하리라 생각된다.
Kudoa septempunctata is a myxozoan parasite that causes food poisoning in individuals consuming olive flounder. The present study aimed to investigate the currently insufficiently elucidated early molecular mechanisms of inflammatory responses in the intestine owing to parasite ingestion. After Kudoa spores were isolated from olive flounder, HT29 cells were exposed to spores identified to be alive using SYTO-9 and propidium iodide staining or to antigens of Kudoa spores (KsAg). IL-1β, IL-8, TNF-α and NFKB1 expression and NF-κB activation were assessed using real-time PCR, cytokine array and western blotting. The immunofluorescence of FITC-conjugated lectins, results of ligand binding assays using Mincle-Fc and IgG-Fc, CLEC4E expressions in response to KsAg stimulation, and Mincle-dependent NF-κB activation were assessed to clarify the early immune-triggering mechanism. Inflammatory cytokines (IL-1β, GM-CSF and TNF-α), chemokines (IL-8, CCL2, CCL5 and CXCL1) and NF-κB activation (pNF-κB/NF-κB) in HT29 cells increased following stimulation by KsAg. The immunofluorescence results of spores and lectins (concanavalin A and wheat germ agglutinin) suggested the importance of Mincle in molecular recognition between Kudoa spores and intestinal cells. Practically, data for Mincle-Fc and KsAg binding affinity, CLEC4E mRNA expression, Mincle immunofluorescence staining and hMincle-dependent NF-κB activation demonstrated the involvement of Mincle in the early immune-triggering mechanism. The present study newly elucidated that the molecular recognition and immune-triggering mechanism of K. septempunctata are associated with Mincle on human intestinal epithelial cells.
Background and Objectives : Korean mistletoe lectin (Viscum album coloratum agglutinin, VCA) and bee venom (BV) have been reported to induce apoptosis in various cancer cell lines in vitro and to show antitumor activity against a variety of tumors in animal models. However, the comparative effect of VCA and BV on the anti-cancer effect and mechanisms of action has not been determined. In this study, the effect in a human hepatocellular carcinoma cell line, Hep G2 cells, was examined. Methods : Cytotoxic effects of VCA and BV on Hep G2 cells were determined by 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay in litro. The apoptotic cell death was then confirmed by propidium iodide staining and DNA fragmentation analysis. The mechanisms of action were examined by the expression of anti-apoptotic proteins and activation of mitogen-activated protein kinases. The involvement of kinase was examined in VCA or BV-induced apoptosis by using kinase inhibitors. Results : VCA and BV killed Hep G2 cells in a time and dose-dependent manner. Treatment of Hep G2 cells with VCA activated poly (ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) known as a marker of apoptosis, and mitogen-activated protein kinases signaling pathways including MAPK/ERK, p38 MAPK and JNK. BV also activated PARP-1, MAPK/ERK. and p38 MAPK but not JNK. The expression level of anti-apoptotic molecule, Bcl-X, was decreased by VCA treatment but not by BV. Finally, the phosphorylation level of ERM proteins involved in the cytoskeleton homeostasis was decreased by both stimuli. VCA-induced apoptosis was partially inhibited by in the presence of JNK and p38 inhibitor, but BV only by p38 inhibitor. Conclusions : VCA-induced apoptosis is dependent on the activation of p38 and JNK. while BV-induced apoptosis is mediated by p38 activation in Hep G2 cells.
본 연구는 tilapia의 Edwardsiella tarda균체 항원(FKC)에 대한 항원성을 증가시키고, 백신의 투여 효과를 지속시키기 위해 백신을 3종류의 adjuvant 즉 FCA, FIA 및 PAS에 혼합하여 사용했을 때와 adjuvant만을 사용했을 때 그리고 E. tarda의 FKC를 투여 했을 때의 효과를 비교 조사하고자 하였다. Microtiter법에 의해 응집 항체가의 지속성을 측정하였고, 공격 시험에 대한 방어 효과는 E. tarda T1123균주의 농도별에 따른 상대 생존율(RPS)로서 판정하였다. 3종류의 adjuvant에 혼합시킨 백신 실험구는 FKC 단독 투여 실험구에 비하여 8주째 높은 응집 항체가를 지속시켰다. 가장 높은 응집 항체가는 2주째 FCA+FKC, PAS+FKC 및 FKC 실험구에서 나타났다. 상대 생존율이 60이상으로 나타난 실험구는 면역 처리 후 3주째 $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$와 $2.5{\times}10^8\;CFU/ml$ 농도로서 공격 시험한 FCA+FKC, PAS+FKC 및 FKC 실험구와 8주째 $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$ 농도로서 공격 시험한 FCA+FKC 및 PAS+FKC 실험구 이었다. Adjuvant만으로 면역 처리한 Tilapia의 E. tarda에 대한 저항성은 대조구보다 다소 높은 것으로 나타났다. Tilapia의 에드와드병에 대한 백신의 adjuvant로서 FCA와 PAS는 백신 효과를 장기간 지속시켜 방어력을 증강시킨 것으로 나타났다.
1990년 7월부터 1991년 11월까지 우리나라에서 넙치 양식이 주로 이루어지고 있는 동해 및 남해안과 제주도 연안에 위치하고 있는 여러 넙치 양식장을 대상으로 넙치 에드와드병의 원인균인 Edwardsiella tarda를 분리하여, 이들의 생화학적 및 혈청학적 특성을 알아 보았다. 분리된 에드와드균은 131균주로서 이들의 생화학적 특성을 조사한 결과, 균주 모두 $H_2S$ 및 indole를 생성하고, glucose, maltose, mannose, galactose 및 fructose등의 당을 산화시키고 가스를 형성하나 xylose, sucrose, rhamnose등의 당은 분해를 시키지 못하는 등의 특성을 가지고 있었다. 분리된 131균주 중 지역별로 대표가 되는 10개의 균주를 선택하여, 혈청학적 특성을 비교한 결과 일본에서 분류되고 있는 E. tarda의 세가지 혈청형을 나타내는 항혈청 E-22(혈청형 a), SU-138(혈청형 b) 및 SU-100(혈청형 c)과 대표균주간에는 항체가 E-22항혈청에 대하여는 2560-5120의 응집를 보인 반면, SU-138 및 SU-100의 항혈청에서는 각각 40-80과 40 이하의 응집를 보여 대표균주는 E. tarda serotype a와 유연성이 깊은 것으로 나타났다. 또한 대표균주들을 10% acrylamide gel상에서 전기영동하여 세균단백질을 비교하여 본 결과, 대표 균주 모두가 단백질의 종류 및 양에 있어서 거의 동일한 것으로 나타났다.
이 실험(實驗)은 계혈청(鷄血淸)에 들어 있는 뇌염(腦炎)바이러스에 대한 비특이억제물질(非特異抑制物質)(NSI)의 성상(性狀)과 이의 Acetone-ether와 Kaolin 처리(處理)에 의한 NSI의 제거효력(除去效力)등을 Gel filtration 및 Zonal Centrifugation technique를 이용하여 시험 하였다. 그 결과(結果) (1) 계혈청(鷄血淸)에 들어 있는 비특이 억제물질은 Group A arbovirus 보다 Group B arbovirus에 대하여 더 예민하였다. (2) 연령(年齡)에 의한 NSI의 역가(力價)차이는 없었다. (3) NSI를 제거(除去)하기 위한 Acetone-ether 및 Kaolin 처리는 그 효력면에서 차이가 없었다. (4) 계혈청(鷄血淸)을 일정한 온도(溫度)로 가열(加熱)하면 NSI의 역가(力價)가 상승(上昇) 하였다. (5) NSI의 성분(成分)은 Gel filtraction에서 주로 첫 Peak (IgM)에 있었고, Zonal Centrifugation에서는 원심관의 상층(上層)에 있는 것으로 보아, 이것은 분자량(分子量)은 크고 Density는 낮은 지질단백(脂質蛋白)으로 생각된다. (6) 거위 적혈구에 대한 응집소(NA)는 acetone-ether 처리에 의하여 부분적(部分的)으로 파괴 되었으나 Kaolin 처리에서는 그렇지 못하였고, 10% 거위혈구액으로써 완전 제거할 수 있었다. (7) NA는 Gel filtration 및 Zonal Centrifugation에서 첫 peak (IgM)에 나타났다.
치아우식증의 원인균으로 알려져 있는 Streptococcus mutans의 여러 균주 중 GS-5균주는 AgI/II 유전자 내에 생기는 nonsense mutation에 의하여 절편의 분비형 AgI/II 단백질을 발현한다. 이러한 사실은 S. nutans GS-5가 독특한 임상 기능을 가질 수 있음을 암시하며, 최근의 보고는 임상적으로 분리된 S. mutans 균주를 이용한 실험 결과에 근거하여 이러한 가능성을 지지한다. 본 연구는 이전의 실험을 통하여 S. mutans의 agI/II 유전자를 확보한 후 재조합 단백질인 N-terminal AgI/II 단백질을 생산하였다. 이 후 하이브리도마를 통하여 1C11A라 명명되는 세포막 단백질 AgI/II에 대한 단항체를 생산하였으며, Western blot과 ELISA를 통하여 이 항체가 AgI/II 단백질에 매우 높은 특이성을 나타냄을 알 수 있었다. 새로이 얻어진 단항체는 AgI/II와 관련된 질환의 기전을 규명하는데 기초 재료가 될 것이다.
Purpose : Rotavirus is a most common etiologic agent of pediatric gastroenteritis. The standard method to diagnose rotavirus infection was the detection of viral particles in specimens through electron microscopy. But it was complex. Enzyme immunoassay and latex agglutinin are preferred because they are relatively handy, inexpensive and take a short time, in comparison with electron microscopy. However, several reports have shown that the use of ELISA to diagnose rotavirus infection in neonates can result in false positive reactions. The main purpose of this study is to compare ELISA and RT-PCR in the diagnosis of neonatal rotavirus infection. Methods : Data presented in this study were obtained form 123 newborn babies in the nursery of the Fatima Hospital, Masan, Korea, form Jury to December, 1997. We obtained two samples of stool from each of the newborn babies and then performed the Rotazyme test and the RT-PCR. In the Rotazyme test, the results were interpreted according to visual findings. The samples were used for the RT-PCR test after at stock $-30^{\circ}C$ to identify rotavirus group A. The result of the two tests were compared. Results : The informations are divided into 73 males and females. Out of the total informations 15 were transferred from other hospitals. Their average gestational age was $38.5{\pm}1.6$ weeks. The average birth weight was $3134.8{\pm}539gm$. In the Rotazyme test, 75 samples turned out to be positive. Out of them, 55 samples(75.3%) were positive and 18 samples(24.7%) were negative in the RT-PCR. On the other hand, in the Rotazyme test, 50 samples turned out be negative. Out of them, 27 samples(54%) were positive and 23 samples(46%) were negative in the RT-PCR. Conclusion : Rotavirus infection in uncommon in neonates. The diagnosis based on visual findings using Rotazyme test has a disadvantage in the sense that it can result in false positive reactions and false negative reactions in the diagnosis of neonatal rotavirus infection.
Propolis extracts는 다양한 성분으로 구성되어 있는 수지상의 혼합물로서 여러 약리작용을 보여주기 때문에 민간요법으로 널리 이용되어왔다. 특히 propolis extracts는 독성이 거의 없다는 장점 때문에 면역증강제재로서 활용가능성이 높게 평가되고 있다. 이에 본 실험에서는 대상으로 in vitro 및 in vivo상에서 propolis extracts가 양식넙치 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. In vitro상에서 propolis extracts가 PBL의 탐식능 및 NBT assay활성능에 미치는 영향을 조사 한 바 유효농도는 $50{\sim}150{\mu}g/ml$ 이었으며, 가장 활성이 높은 농도는 $100{\mu}g/ml$ 이었다. In vivo상에서 양식넙치에 propolis extracts를 단독 또는 S. iniae 불활화 균액과 혼합하여 어체에 투여 후에 면역반응에 미치는 영향을 조사하였다. Haematocrit치는 propolis extracts단독 및 vaccine과 혼합 처리 할때 유의적 차이를 보이지 않았다. 그렇지만, 혈청 lysozyme과 신장대식세포의 탐식능, 활성산소 환원능 및 항체가는 propolis extracts+vaccine 투여구에서 유의적으로 증가하였다. 이러한 결과들에 의하여 propolis extracts는 양식넙치에서 특이적 및 비특이적 면역증강작용이 우수하므로 향후 양식어류에 있어서 비특이적 면역증강 물질 및 adjuvant로 활용가능성이 기대되어진다.
Hepatocellular carcinoma (HCC) has been one of the most fatal malignant tumors worldwide and its associated morbidity and mortality remain of significant concern. Based on in-depth reviews of serological diagnosis of HCC, in addition to AFP, there are other biomarkers: Lens culinaris agglutinin-reactive AFP (AFP-L3), descarboxyprothrombin (DCP), tyrosine kinase with Ig and eprdermal growth factor (EGF) homology domains 2 (TIE2)-espressing monocytes (TEMs), glypican-3 (GPC3), Golgi protein 73 (GP73), interleukin-6 (IL-6), and squamous cell carcinoma antigen (SCCA) have been proposed as biomarkers for the early detection of HCC. The diagnosis of HCC is primarily based on noninvasive standard imaging methods, such as ultrasound (US), dynamic multiphasic multidetector-row CT (MDCT) and magnetic resonance imaging (MRI). Some experts advocate gadolinium diethyl-enetriamine pentaacetic acid (Gd-EOB-DTPA) MRI and contrast-enhanced US as the promising imaging madalities of choice. With regard to recent advancements in tissue markers, many cuting-edge technologies using genome-wide DNA microarrays, qRT-PCR, and proteomic and inmunostaining studies have been implemented in an attempt to identify markers for early diagnosis of HCC. Only less than half of HCC patients at initial diagnosis are at an early stage treatable with curative options: local ablation, surgical resection, or liver transplant. Transarterial chemoembolization (TACE) is considered the standard of care with palliation for intermediate stage HCC. Recent innovative procedures using drug-eluting-beads and radioembolization using Yttrium-90 may exhibit beneficial effects in HCC treatment. During the past few years, several molecular targeted agents have been evaluated in clinical trials in advanced HCC. Sorafenib is currently the only approved systemic treatment for HCC. It has been approved for the therapy of asymptomatic HCC patients with well-preserved liver function who are not candidates for potentially curative treatments, such as surgical resection or liver transplantation. In the USA, Europe and particularly Japan, hepatitis C virus (HCV) related HCC accounts for most liver cancer, as compared with Asia-Pacific regions, where hepatitis B virus (HBV) may play a more important role in HCC development. HBV vaccination, while a vaccine is not yet available against HCV, has been recognized as a best primary prevention method for HBV-related HCC, although in patients already infected with HBV or HCV, secondary prevention with antiviral therapy is still a reasonable strategy. In addition to HBV and HCV, attention should be paid to other relevant HCC risk factors, including nonalcoholic fatty liver disease due to obesity and diabetes, heavy alcohol consumption, and prolonged aflatoxin exposure. Interestingly, coffee and vitamin K2 have been proven to provide protective effects against HCC. Regarding tertiary prevention of HCC recurrence after surgical resection, addition of antiviral treatment has proven to be a rational strategy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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