Melatonin (N-acetyl-5-methoxytryptamine), a major hormone of pineal gland in vertebrates, is known to be associated with regulation of the dynamic physiological functions in general and has some functions on reproduction in the ovarian follicles in particular. And its antioxidant properties as a scavenger are also reported. The aim of this study was to investigate the effect of melatonin on the in vitro maturation of mouse germinal vesicle (GV)-stage oocytes. Oocyte maturation, apoptosis, and mRNA expression of melatonin receptor were analyzed in the cumulus cell-enclosed oocytes (CEOs) cultured with melatonin for 18 h. The CEOs were obtained from 3 wk-old ICR female mice cultured in media with 0, 0.1 nM, 10 nM, or 1,000 nM melatonin for 18 h. And then the extrusion of the first polar body was assessed to evaluate the maturation rate. The apoptosis and mRNA expression of melatonin receptor (Mtnr1-a and Mtnr1-b) in cumulus cells of each group were measured by TUNEL assay, ELISA, and real time RT-PCR after in vitro maturation(IVM). The addition of melatonin in the IVM medium significantly improved nuclear maturation of the mouse GV oocytes and the highest maturation rate were obtained from the group treated with 1,000 nM melatonin. Apoptosis was not detected in IVM oocytes, but detected in cumulus cells. And cumulus cells treated with 1,000 nM melatonin exhibited significantly lower apoptosis. In the group treated with 1,000 nM melatonin, the expression of melatonin receptor mRNA was decreased in CEOs. In conclusion, melatonin has a potentially important role for regulating oocyte maturation and reduces the apoptosis of cumulus cells in vitro.
In this study, body weight levels of glucose, insulin and triglyceride in blood and glucosidase activity of the small intestine were investigated to determine the effect of Sangbaegpitang and Supungsungiwhan on the glucose metabolism of db/db mice. The GLUT4 mRNA of muscle tissue and the Acetyl CoA Carboxylase and the activation rate of GLUT2 mRNA of liver tissue were measured by the reverse transcription-polymerase chain reaction method and by the vitro transcription. The results were obtained as follows: 1. In the Sangbaegpitang administration group, (1) The level of triglyceride was decreased significantly and the glucosidase activity of the small intestine was inhibited remarkably, (2) The amounts of the GLUT4 mRNA in muscle tissue and Acetyl CoA Carboxylase mRNA in liver tissue were increased significantly. (3) Though glucose level in both fasting and non-fasting, were decreased and the insulin level in blood was increased, the results showed no statistical significance. 2. In the Supungsungiwhan administration group, (1) The levels of glucose and triglyceride were decreased significantly in the blood of non-fasting animals. (2) The glucosidase activity of small intestine was inhibited markedly and the amounts of GLUT4 mRNA of muscle tissue and GLUT2 mRNA of liver tissue were increased significantly. (3) The glucose levels in the fasting group were reduced, while insulin level was increased but showed no statistical significance, Based on the above results, our conclusions are as follows: Sangbaegpitang & Supungsungiwhan are thought to be capable of inhibiting the activity glucosidase, the enzyme which influences carbohydrate metabolism in the small intestine of db/db mice(the experimental diabetic model) and delaying the absorption of carbohydrate, thus proving effective on inhibiting the increase of non-fasting glucose level effectively. Futhermore Sangbaegpitang and Supungsungiwhan are though: to be capable of preventing the composition of free fatty acids by restoring the production of GLUT4 mRNA of muscle tissues and GLUT2 mRNA of liver tissues. Those results suggests that above prescriptions can be applied to non-insulin dependent diabetes mellitus in order to improve insulin resistance.
A series of new 2-benzoyl-3-phenyl-2,5-dihydroisoxazol-5-one, (A) and 3-phenyl-5-phenylcarbonyl-oxyisoxazole, (B) derivatives as substrates were synthesized and their quantitative structure-activity relationships (QSAR) analyses between the antifungal activities ($pI_{50}$) and physicochemical parameters of substituents onl the benzoyl group against resistant (RPC:95CC7303) and sensitive (SPC:95CC7105) Phytophthora blight (Phytophthora capsici,) were studied. The synthetic yield (%) and antifungal activities of (A) were higher than (B) and selectivities between the fungi were not showed. From the basis on the Hansch-Fujita analyses, the optimum width values ($(B_2)_{opt.}=ca.\;4.00{\AA}$) of the substituents on the benzoyl group were important factor in determining fungicidal activity against the two fungi. Influence of the substituents as electron withdrawing group on the fungicidal activity against RPC, but not for SPC. And tile bromo- and acetyl-substituents were contributed to higher antifungal activity against RPC and SPC from the results of Free-Wilson analyses.
Hydrolase activities of excretory-secretory products (ESP) and somatic extracts (SE) from Anisakis simplex sensu stricto (s.s.) and Anisakis pegreffii larvae were investigated by using API ZYM kit. In esterase group, acid phosphatase showed high activity from both of A. simplex (s.s.) and A. pegreffii. Esterase (C4) showed activity only from SE and A. simplex (s.s.) showed higher activity than A. pegreffii. Alkaline phosphatase, acid phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase showed higher activity in 3rd stage larvae than in 4th stage larvae of both species. In aminopeptidase group, only leucine arylamidase showed remarkable activity in SE of both anisakid species, and A. simplex (s.s.) SE showed higher activity than A. pegreffii SE. In glycosidase group, N-acetyl-${\beta}$-glucosaminidase, ${\alpha}$-mannosidase, ${\alpha}$-fucosidase showed higher activity in A. simplex (s.s.) than A. pegreffii, and 4th larvae showed higher activity than 3rd larvae. These differences in hydrolase activity of anisakid nematodes larvae are thought to be due to different metabolism such as growth, moulting, digestion and feeding.
$\underline{Purpose}$: This study investigated the influence of irradiation and cisplatin on PrxI & PrxII expression and on their survival rates (SR) in SK-N-BE2C and Rat2 cell lines. $\underline{Materials\;and\;Methods}$: The amount of PrxI & PrxII production with or without N-acetyl-L-cysteine (NAC) pretreatment was studied using a western blot after 20 Gy irradiation to determine the degree of inhibition of ROS accumulation. In addition, the amount of PrxI & PrxII production after cisplatin and after combination with cisplatin and 20 Gy irradiation was studied. The SRs of the cell lines in SK-N-BE2C and Rat 2 cells, applied with 20 Gy irradiation only, with various concentrations of cisplatin and with the combination of both, were studied. The 20 Gy irradiation-only group and the combination group were each subdivided according to NAC pretreatment, and corresponding SRs were observed at 2, 6, 12 and 48 hours after treatment. $\underline{Results}$: Compared with the control group, the amount of PrxI in SK-N-BE2C increased up to 60 minutes after irradiation and slightly increased after irradiation with NAC pretreatment 60 minutes. It did not increase in Rat2 after irradiation regardless of NAC pretreatment. PrxII in SK-N-BE2C and Rat2 was not increased after irradiation regardless of NAC pretreatment. The amounts of PrxI and PrxII in SK-N-BE2C and Rat2 were not increased either with the cisplatin-only treatment or the combination treatment with cisplatin and irradiation. SRs of irradiation group with or without NAC pretreatment and the combination group with or without NAC pretreatment were compared with each other in SK-N-BE2C and Rat2. SR was significantly high for the group with increased amount of PrxI, NAC pretreatment and lower the cisplatin concentration. SR of the group in SK-N-BE2C which had irradiation with NAC pretreatment tended to be slightly higher than the group who had irradiation without NAC pretreatment. SR of the group in Rat2 which had irradiation with NAC pretreatment was significantly higher than that the group which had irradiation without NAC pretreatment. Compared to the combination group, the irradiation-only group revealed statistically significant SR decrease with the maximal difference at 12 hours. However, at 48 hours the SR of the combination group was significantly lower than the irradiation-only group. $\underline{Conclusion}$: PrxI is suggested to be an antioxidant enzyme because the amount of PrxI was increased by irradiation but decreased pretreatment NAC, a known antioxidants. Furthermore, cisplatin may inhibit PrxI production which may lead to increase cytotoxicity of irradiation. The expression of PrxI may play an important role in cytotoxicity mechanism caused by irradiation and cisplatin.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.37
no.5
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pp.542-547
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2008
The anti-diabetic effects of water extracts (WE) from medicinal herbs on hepatic glucose-regulating enzymes, such as glucokinase (GCK), pyruvate dehydrogenase (PDH), acetyl-CoA carboxylase (ACC) and ${\alpha}$-glucosidase, were studied using the cytosol fraction in liver and mitochondia fraction in heart of a type II diabetic animal (GK rat, Goto-Kakizaki). The free radical scavenging activity of water extracts by DPPH method was also tested. We found that free radical scavenging activity was strong in Corni fructu (CF), Mokdan Bark (MDB), Chenhwabon (CHB) and Sanyack (SY), while that of Backbocreng (BBR), Shuckgihwang (SGH) and Taecsa (TS) was lower. For GCK activity in cytosol of liver, CF and CHB had a more effective activity than other extracts. PDH activity in mitochondria fraction of heart was higher in all of the extracts, expect for the TS extract, than in the control. ACC activity in cytosol fraction of liver was significantly higher in the CF, CHB, SGH, TS and SY extracts than in the control. CF, BBR and MDB led to a decrease in the ${\alpha}$-glucosidase activity. Therefore, these results suggest that all of the extracts may be used as functional material in the development as anti-diabetic functional food and medicine.
Objectives: This study was performed to investigate the effect of TJGB on the liver of high-fat diet (HFD)-fed mice and the cell viability of HepG2 cells. Methods: After a week adaptation, 8-week-old C57BL/6N mice were fed with a 45% HFD or normal diet for 3 weeks. For the next 9 weeks, the mice were divided into 6 groups: normal diet group; HFD group; HFD plus orlistat group; HFD plus Ephedra sinica Stapf (ES) group; HFD plus low dose of TJGB group; HFD plus high dose of TJGB group. To estimate the effect of TJGB in the liver of HFD-fed mice, the protein expressions of phospho-acetyl-CoA carboxylase (p-ACC) and liver X Receptor (LXR) were determined by Western blot assay. The cell viability of ES and TJG was also evaluated in HepG2 cells. Results: The administration of TJGB had little effect on the protein expressions of p-ACC and LXR in the liver of HFD-fed mice. And the cytotoxicity was showed above 7.8 ㎍/mL in HepG2 cells. Conclusion: Further research is needed to evaluate the mechanism of TJGB on hepatic steatosis and cytotoxicity in HepG2 cells.
The result of the screening of lectins on 28 species of marine shell fishes(mollusks) showed that 10 species (Tapes philippinarum, Cyclosunetta menstrualis, Neptunea arthritica cumingii, Omphalius pfeifferi carpenteri, Chlorostoma argyrostoma turbinatum, Chiorostoma argyrostoma lischkei, Semisulcosira corea, Neptunea polycosta, Babylonica japonica, Noverita didyma) were present hemagglutinating properties to human A, B, and O group, and animal blood erythrocytes. A new lectin from Tapes philippinarum. was isolated and partially characterized. The lectin was purified by (NH$_4$)$_2$SO$_4$ precipitation and ion exchange chromatography on DE 53 column. Six fractions were obtained from DE 53 column by salt gradient elution but only 0.3M, and 0.4M NaCl fraction had strong lectin activity. On its 0.3M NaCl fraction, purity was identified by polyacrylamide gel electrophoresis. This lectin was inhibited by N-acetyl-D-galactosamine. It seems that two kinds of lectin react as antigen by immunochemical studies.
Acorenone, a diterpene isolated from Acorus gramineus, showed strong resistance inhibitory activity against multi-drug resistant microorganisms such as Staphylococcus aureus SA2, which has resistance to 10 usual antibiotics including chloramphenicol (Cm). At the level of $5\;{\mu}g/ml$ when combined with $50\;{\mu}g/ml$ of Cm. Bacterial resistance to Cm is due to the presence in resistant bacteria of an enzyme, chloramphenicol acetyltransferase (CAT), which catalyses the acetyl-CoA dependent acetylation of the antibiotic at C-3 hydroxyl group. To elucidate the mechanism of resistant inhibitory effect, the acorenone which had the strongest resistant inhibitory activity, was investigated on the CAT assay. As the result, the combination of Cm and acorenone showed the strongest inhibitory activity on CAT as noncompetitive and dose dependent manner.
Retrogradation characteristics of the acetylated and raw starch were investigated with the chucheongbyeo and Samkangbyeo. The freeze-thaw stability and syneresis on starch gel were more stable and lower in acetylated rice starch, suggested that the rice starch acetylated with acetyl group is more stable in the various conditions. The retrogradation time constant of acetylated rice starch gel from the Chucheongbyeo and Samkangbyeo which were measured at 5$^{\circ}C$ storage were 11.7 days and 10.2 days, respectively. In addition, the retrogradation time constant in 21$^{\circ}C$ were 50.5 days and 49.8 days, indicating that retrogradation was noticiably retarded in this occation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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