VvMSA, a grapevine ASR which is highly inducible by sugar and abscisic acid signals was previously shown to be a transcription factor for a hexose transporter gene VvHT1. We isolated a cDNA clone, VlASR which is regulated temporally during the grape berry development by ACP RT-PCR (annealing control primer reverse transcriptase-polymerase chain reaction) and it proved identical to VvMSA. RT-PCR and real-time PCR analyses revealed that the VlASR gene was expressed in berries at fruit set and that its expression increased as berries aged but decreased at the late ripening stage. In order to understand the regulatory mechanism of the asr gene, a genomic fragment was cloned from grapevine. The genomic DNA was 1375 bp long and a sugar box (sucrose box 3 and sucrose responsive element 1) was identified in the 611 bp upstream region of the open reading frame. Analysis of the VlASR promoter::reporter gene fusion demonstrated that this promoter was expressed in transgenic Arabidopsis even without sucrose treatment. This result suggests that the ASR/VvHT1-mediated sugar/ABA signaling, previously reported in grapevine, may not function in Arabidopsis which has no ASR homologue.
The Korean radish cationic peroxidase (KRCP) promoter, comprising nucleotides -471 to +704 relative to the transcriptional initiation site, was fused to the GUS gene and transformed to tobacco BY-2 cells. We examined how auxin (2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2,4-D), cytokinin (6-benzylaminopurine, BAP), gibberellic acid ($GA_3$), abscisic acid (ABA), methyl jasmonate (MeJA), and phosphatidic acid (PA) affect the GUS expression in the presence or absence of 2,4-D in a modified LS medium. Exogenous 2,4-D or BAP greatly decreased the GUS expression regulated by the KRCP promoter in a modified LS medium containing 0.2 mg/l 2,4-D. $GA_3$ increased the GUS expression and ABA completely reduced the inductive effect of $GA_3$. The GUS expression was also increased dose-dependently by plant defense regulators, MeJA and PA. In contrast to the above results, auxin deprivation from the modified LS medium increased the GUS expression after treatment with exogenous 2,4-D whereas BAP still greatly decreased the GUS expression dose-dependently. $GA_3$ or MeJA slightly decreased the GUS expression. The data suggest that auxin deprivation changes the sensitivity of the suspension cells to exogenous chemicals and that the regulation of the KRCP promoter by 2,4-D, $GA_3$, and MeJA is dependent on auxin, whereas the regulation by BAP is not. This study will be valuable for understanding the function and expression mode of the Korean radish cationic peroxidase in Korean radish.
Kim, Yeong Chae;Kim, Yeon Hwa;Lee, Young Hee;Lee, Sang Woo;Chae, Yun-Soek;Kang, Hyun-Kyung;Yun, Byung-Wook;Hong, Jeum Kyu
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.3
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pp.305-316
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2013
Non-protein amino acid, ${\beta}$-amino-n-butyric acid (BABA), has been involved in diverse physiological processes including seedling growth, stress tolerance and disease resistance of many plant species. In the current study, treatment of kimchi cabbage seedlings with BABA significantly reduced primary root elongation and cotyledon development in a dose-dependent manner, which adverse effects were similar to the plant response to exogenous abscisic acid (ABA) application. BABA was synergistically contributing ABA-induced growth arrest during the early seedling development. Kimchi cabbage leaves were highly damaged and seedling growth was delayed by foliar spraying with high concentrations of BABA (10 to 20 mM). BABA played roles differentially in in vitro fungal conidial germination, mycelial growth and conidation of necrotroph Alternaria brassicicola causing black spot disease and hemibiotroph Colletotrichum higginsianum causing anthracnose. Pretreatment with BABA conferred induced resistance of the kimchi cabbage against challenges by the two different classes of fungal pathogens in a dose-dependent manner. These results suggest that BABA is involved in plant development, fungal development as well as induced fungal disease resistance of kimchi cabbage plant.
Plant growth retardants reduce the plant height by inhibiting stem elongation in Lilium davuricum. To investigate the plant hormones related to stem elongation, we sprayed 50 $mg{\cdot}L^{-1}$ diniconazole to young plants of L. davuricum and quantified the contents of endogenous gibberellic acids (GA) and abscisic acid (ABA). In GA biosynthesis, L. davuricum had not only the early C-13 hydroxylation ($GA_{19}{\rightarrow}GA_{20}{\rightarrow}GA_1$) pathway resulting in $GA_1$ as the active form but also the non C-13 hydroxylation (NCH, $GA_{12}{\rightarrow}GA_{24}{\rightarrow}GA_9{\rightarrow}GA_4$) with $GA_4$ as the active form. However, the main pathway was NCH because $GA_4$ concentration of 55 $ng{\cdot}g^{-1}$ dry wt was much higher than $GA_1$ content of 0.23 $ng{\cdot}g^{-1}$ dry wt in control plant. Diniconazole inhibited GA biosynthesis through NCH pathway from its early stage. $GA_{12}$ content decreased by diniconazole up to 6% level of that of control and this effect continued to $GA_4$. Diniconazole reduced $GA_{12}$ content by 12.7 $ng{\cdot}g^{-1}$ dry wt, whereas that of control plant was 213.8 $ng{\cdot}g^{-1}$ dry wt. ABA content decreased up to one third of control by diniconazole application. From the contents of endogenous $GA_4$, $GA_1$, and ABA in this study, we could conclude that diniconazole reduces the plant height by inhibiting $GA_4$ biosynthesis in L. davuricum.
Phenylalanine ammonia-lyase (PAL), a key enzyme of the phenylpropanoid biosynthesis pathway, is activated by a number of developmental and environmental cues. The coding region of the NtPAL4 gene was 2,154 bp in length, and its deduced protein was composed of 717 amino acids. Sequence analysis of NtPAL4 cDNA from tobacco (Nicotiana tabacum L.) revealed high structural similarity to PAL genes of other plant species. The NtPAL4 gene exists as a single copy in the tobacco plant, and its transcripts were strongly expressed in flowers and leaves. NtPAL4 expression was significantly induced in response to NaCl, mannitol, and cold treatments, but it was not induced by abscisic acid (ABA). NtPAL4 expression decreased gradually after treatment with ABA and $H_2O_2$; however, NtPAL4 transcripts accumulated after treatment with methyl viologen (MV). Our results suggest that the NtPAL4 gene may function in response to abiotic stresses.
The effect of $Cd^{2+}$ on stomatal apertures of epidermal strips and intact leaves in Commelina communis L. was investigated. Cadmium stimulated stomatal opening. The stomata, treated with 100 $\mu$M $Cd^{2+}$ opened to a degree of about 8.38 fm, but the stomata, treated with no cadmium opened to 3.74 ${\mu}{\textrm}{m}$. In order to show that there was no mechanical or osmotic impediment preventing the stomata in the epidermal strips, salicylic acid (SA) and abscisic acid (ABA) were used. The treatment of 100 $\mu$M SA and 1 $\mu$M ABA inhibited 14% and 28% of stomatal opening, respectively. Other heavy metals such as $Al^{3+} and Ag^{2+}$ were also used to investigate the effect of the stomatal apertures. The treatment of $Al^{3+} and Ag^{2+}$ also stimulated 19% and 41% of stomatal opening. To understand how cadmium open stomata, the effect of cadmium on the K+ influx into the epidermal strips was investigated. $Cd^{2+}$, SA, ABA inhibited 98%, 28%, 34% of K+ uptake respectively. 3-weeks old Commelina was transferred to and grown in Hoagland solution (0,5 mM $Cd^{2+}$, 10 mM $Cd^{2+}$) for 4 days and stomatal conductance were measured. The treatment of 5 mM $Cd^{2+}$ and 10 mM $Cd^{2+}$ showed about 51% and 70% inhibition of stomatal conductance, respectively Therefore, it could be concluded that stomata in epidermal strips and intact leaves behaved differently and cadmium- stimulated stomatal opening was due to the result of cadmium uptake into the epidermal strips instead of K+. [cadmium, stomata, stomatal conductance]
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.78.2-79
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2003
Pepper defensin ( CADEFl) clone was isolated from cDNA library constructed from pepper leaves infected with avirulent strain Bv5-4a of Xanthomonu campestris pv. vesicatoria. The deduced amino acid sequence of CADEFl is 82-64% identical to that of other plant defensins. Putative protein encoded by CADEFl gene consists of 78 amino acids and 8 conserved cysteine residues to form four structure-stabilizing disulfide bridges. Transcription of the CADEF1 gene was earlier and stronger induced by X campestris pv. vesicatoria infection in the incompatible than in the compatible interaction. CADEF1 mRNA was constitutively expressed in stem, root and green fruit of pepper. Transcripts of CADEFl gene drastically accumulated in pepper leaf tissues treated With Salicylic acid (SA), methyl jasmonate (MeJA), abscisic acid (ABA), hydrogen Peroxide (H$_2$O$_2$), benzothiadiazole (BTH) and DL-${\beta}$-amino-n-butyric acid (BABA). In situ hybridization results revealed that CADEF1 mRNA was localized in the phloem areas of vascular bundles in leaf tissues treated with exogenous SA, MeJA and ABA. Strong accumulation of CADEF1 mRNA occurred in pepper leaves in response to wounding, high salinity and drought stress. These results suggest that bacterial pathogen infection, abiotic elicitors and some environmental stresses may play a significant role in signal transduction pathway for CADEF1 gene expression.
The effects of wounding and jasmonic acid(JA) on polyphenol oxidase(PPO) in tomato(Lycopersicon esculentum Mill.) seedlings were investigated. PPO was strongly induced by wounding or JA, and the response was also shown to be systemically induced by wounding. Mechanical wounding in cotyledon or leaf produced a signal that caused the concentration of PPO to increase in the unwounded cotyledon, in the first leaves but not in the second leaves. Severity of wounding and light intensity also affected wound induced change in PPO activity, JA showed a stimulatory effect on the loss of chlorophyll and the rapid increase in PPO activity. The PPO was clearly more active in the wounded leaves than in controls. The potency and specificity of the JA indicate a close relationship between JA and wound-induced changes in PPO in tomato species. JA and abscisic acid(ABA) acted similarly on both unwounded and wounded leaves, but the amount of PPO in the wounded leaves was always more than the respective controls. The highest increase in PPO activity occurred in woundand JA-induced leaves of seedlings kept under bright lighting. Benzyladenine(BA) completely abolished JA- and ABA-induced PPO activity. The results suggest that JA-induced PPO activity is due to de novo PPO synthesis. Histochemical tests for PPO in stems of wound- and JA -treated tomato plants indicate that PPO was localized primarily, in the. outer .cortex . and xylem parenchyma. It is concluded that exogenously applied JA acts as stress agents and PPO may be a component of the inducible anti-hervivore defense response.
This study was conducted to increase grape quality by treating plant growth regulator (PGR) in 'Campbell Early' grape. Foliar application of gibberellic acid ($GA_3$) at $5mg{\cdot}L^{-1}$ on flower cluster of 'Campbell Early' grape at 3-5 unfolded leaf stage effectively increased columella length, berry weight, soluble solid contents and promoted skin color development. Foliar application of $20mg{\cdot}L^{-1}$ abscisic acid (ABA) mixed with $5mg{\cdot}L^{-1}$ of $GA_3$ on flower cluster of 'Campbell Early' grape at 3-4 unfolded leaf stage effectively increased skin anthocyanin contents without any detrimental effects on berry enlargement and columella growth. Foliar application of $2.5mg{\cdot}L^{-1}$ thidiazuron mixed with $5mg{\cdot}L^{-1}$ of $GA_3$ on flower cluster of 'Campbell Early' grape at 3-4 unfolded leaf stage effectively increased fruit quality indices such as higher soluble solid contents and less titratable acidity.
Baek, Dongwon;Chun, Hyun Jin;Kang, Songhwa;Shin, Gilok;Park, Su Jung;Hong, Hyewon;Kim, Chanmin;Kim, Doh Hoon;Lee, Sang Yeol;Kim, Min Chul;Yun, Dae-Jin
Molecules and Cells
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v.39
no.2
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pp.111-118
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2016
MiR399f plays a crucial role in maintaining phosphate homeostasis in Arabidopsis thaliana. Under phosphate starvation conditions, AtMYB2, which plays a role in plant salt and drought stress responses, directly regulates the expression of miR399f. In this study, we found that miR399f also participates in plant responses to abscisic acid (ABA), and to abiotic stresses including salt and drought. Salt and ABA treatment induced the expression of miR399f, as confirmed by histochemical analysis of promoter-GUS fusions. Transgenic Arabidopsis plants overexpressing miR399f (miR399f-OE) exhibited enhanced tolerance to salt stress and exogenous ABA, but hypersensitivity to drought. Our in silico analysis identified ABF3 and CSP41b as putative target genes of miR399f, and expression analysis revealed that mRNA levels of ABF3 and CSP41b decreased remarkably in miR399f-OE plants under salt stress and in response to treatment with ABA. Moreover, we showed that activation of stress-responsive gene expression in response to salt stress and ABA treatment was impaired in miR399f-OE plants. Thus, these results suggested that in addition to phosphate starvation signaling, miR399f might also modulates plant responses to salt, ABA, and drought, by regulating the expression of newly discovered target genes such as ABF3 and CSP41b.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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