• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제15권6호
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• pp.783-788
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• 2002

Bovine yolk sac at day 24 of pregnancy, and placental membranes (chorion and allantois) from days 70 and 100 of pregnancy were isolated and cultured in a modified minimum essential medium in the presence of $[^{35}S]$methionine. Proteins synthesized and secreted by isolated bovine yolk sac, chorion and allantois were analyzed by fluorography of two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis. Serum-like proteins,transferrin, ${\alpha}$-fetoprotein, ${\alpha}$1-antitrypsin and ${\alpha}$1-acid glycoprotein,were the major protein products of yolk sac. A 21 kDa protein produced by yolk sac was identified immunochemically as retinol-binding protein (RBP). Chorion and allantios from days 70 and 100 of pregnancy were active in protein synthesis and secretion. Both chorion and allantois did not secret serum-like proteins but secreted a number of neutral-to-acidic proteins including RBP. Secretory proteins produced by the yolk sac, chorion and allantois may play important roles in the embryonic development and the successful outcome of pregnancy. Antiserum against bovine placental RBP was employed to the immunocytochemistry by immunoperoxidase method. Immunoreactive RBP was localized in epithelial cells and island-like cell clones of yolk sac. Immunostaining for RBP was detected in simple columnar epithelium of chorion and in simple squamous epithelium of allantois. In the present study, proteins synthesized and secreted by yolk sac at day 24 of pregnancy, chorion and allantois from days 70 and 100 of pregnancy were characterized In addition, RBP was localized in yolk sac, chorion and allantois by immunoperoxidase method. The immunoperoxidase method has been proven to be a very effective technique to identify the cellular source of protein synthesis in extraembryonic membranes.

• 한국동물학회지
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• 제35권1호
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• pp.17-22
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• 1992

The three yolk polypeptides have been isolated and partially characterized. Their molecular weights of YPI, YP2, and YP3 were 48, 000, 47, 000, and 46, 000, respectivelv, as judged by SDS-polyacrvlamide gel electrophoresis. They have different digestion products upon in situ peptide mapping by limited proteolysis. Two-dimensional gel electrophoresis showed that their isoelectric points were heterogeneous from 5.92 to 6.54. And thew showed three different antigen-antibody reactions when each polvpeptides is reacted with antisera made to a mixture of all of three. These data reported here indicate that the yolk proteins are consisted of distinctive polypeptides in Drosophlla sp. (robusta species group).

• 한국양식학회지
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• 제9권1호
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• pp.83-92
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• 1996

농어목 어류, C. diagramma 암컷의 vitellogenin과 난황단백의 면역화학적 특성을 서로 비교하였다. 면역화학적 방법에 의해 C. diagramma 암컷의 혈청에서 vitellogenin 1 (VTG1)과 vitellogenin 2 (VTG2)를 동정하였으며, sephacryl S-300 gel 여과법에 의하여 측정된 분자량은 각각 560,000과 410,000이었다. 암컷의 난소 추출액에서는 두 가지 형태의 난황단백인 E2와 E3가 분리되었으며, 이들의 분자량은 각각 410,000과 170,000이었다. $17\beta$-estradiol ($E_2$)을 주사한 수컷의 혈청과 간조직을 abidine-biotin complex (ABC) 방법으로 분석한 결과, vitellogenin과 유사한 물질이 검출되었다. 이상의 결과로 부터, 외인성 $E_2$ 에 의해 간에서 합성된 vitellogenin은 혈액 속으로 방출된 후 난소로 이동되는 것으로 추정되었다. 암컷의 $E_2$, 혈중농도는 산란기인 6월에 최고치를 나타내었고, vitellogenin 상대농도도 $5\~6$월에 최고치를 나타내었다. $E_2$와 vitellogenin의 변화는 본 종의 난소성숙과 밀접한 관계가 있으며, 난황형성에 있어서도 중요한 역할을 하고 있음을 알 수 있었다. 암컷 혈청 VTG2와 난소추출액 E2의 분자량이 서로 같고, vitellogenin이 간에서 합성되어 난소내로 이동하는 점으로 보아, 난소내 난황단백 성분의 전구물질은 혈청내의 vitellogenin인 것으로 추정되었다.

• 대한수의학회지
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• 제41권2호
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• pp.197-202
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• 2001

Although several methods have been developed and applied to control swine respiratory diseases, the disease induces severe economic impact to swine industry worldwide. As one of the new trials, application of egg yolk antibody(IgY) was attempted for the purposes and immune response in sera and egg yolk was analysed with ELISA in previous study. In this study, immunological specificity of the IgY was analysed by Western blot analysis. In the analysis of causative agents of atrophic rhinits, B bronchiseptica and P multocida 4D, proteins of 33, 40, 43, 67 and 141 kDa were specifically reacted with IgY Also, 40 and 110 kDa proteins were identified as the major immunogens in P multocida 3A. In A pleuropneumoniae serotypes 2 and 5, 40 kDa and 47 kDa proteins were found to be the major reactive ones. These results suggested that egg yolk antibodies from immunized hens was specific with antigens injected into hens and partially purified antigens, outer membrane proteins and dermonecrotic toxin, were more effective than bacterin for the production of specific antibody.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제28권2호
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• pp.15-20
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• 1986

가잠 신장형란의 배자형성에 있어서 유전자의 발현기구를 해명하기 위한 연구의 일환으로, 미수정란 난황단백질과 미수정란으로부터 추출한 RAN의 무세포단백질 합성계에서의 번역활성능에 대해 검토했다. 그 결과, ki란 미수정란의 난황단백질은 질적인 면에서 볼 때 정상란과의 차이를 인정할 수 없었다. 또한 in vitro 무세포 단백질 합성계에서 번역활성능을 가진 모성유래의 mRNA 분자종에 있어서도 ki란은 정상란과의 비교에서 이렇다 할 차이가 없었다.

• Korean Chemical Engineering Research
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• 제49권6호
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• pp.798-803
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• 2011

난황에 포함된 IgY는 포유동물에 있는 바이러스나 항원에 반응하는 항체와 같은 역할을 한다. IgY 분리를 위해 난황을 전처리한 후 3-zone SMB를 이용하여 지질단백질들로 부터 분리하는 전산모사연구를 수행하였다. 회분식 크로마토그래피와 pulse input method(PIM) 실험을 이용하여 전산모사 매개변수와 흡착 등온식을 얻었다. Aspen simulator를 이용하여 전산모사를 수행하여 IgY를 분리할 수 있는 SMB 운전조건을 다음과 같이 제시할 수 있었다. 삼각형 이론의 $m_2$와 $m_3$ 값은 각각 0.18, 1.0이고 스위칭 타임은 419 초이었다. 전산모사 결과 raffinate의 IgY 순도가 98.39%이고 두번째 싸이클에서 순도가 정상상태에 도달하였다.

• 한국동물학회지
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• 제39권3호
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• pp.292-298
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• 1996

안점의 꽃갯지렁이(Pseudopotamilla occelata)의 난자형성중 난황단백질의 전구체인 체강액 단백질(CP)은 수용체에 의해 중개되는데 이러한 수용체 중개에 의한 난모세포내로의 유입은 GTP-binding protein에 의해 조절되는 것으로 확인되었다. 체강액 단백질(CP)을 가장 활발히 투과시키는 중기 난모세포내로의 125 I-CP의 유입은 GTP에 의해 촉지되었고, GTP 유사체인 GTPrS나 GTP$\beta$S의 효과를 금입자로 표지된 체강액 단백질을 이용하여 전자현미경으로 확인해 본 결과, gold-labeled CP는 난황립에 집중되었고, 이러한 현상도 GTP에 의해서는 촉진되었고 GTPrS에 의해서는 억제되었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권2호
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• pp.189-195
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• 2006

A study was conducted to develop optimal conditions for a large-scale, sequential separation method for value-added components from egg yolk. Starting with liquid egg yolk, immunoglobulin Y (IgY), phospholipids, and neutral lipids were extracted sequentially using water, ethanol, and n-hexane. The remainder was yolk proteins. Adjusting the pH of diluted egg yolk to pH 5.0-5.2 decreased phospholipids content in the supernatant after centrifugation, which was very important for preventing clogging problem of ultrafiltration filters during the subsequent concentration step for IgY separation. Extraction of precipitants after centrifugation with four volumes of 100% ethanol once removed most of the phospholipids and the purity of phospholipids was more than 85% (wt.) after drying. The subsequent extraction of precipitant from ethanol extraction with four volumes of hexane 3 times removed neutral lipids almost completely and resulted in a high protein product with minimal lipids. The sequential separation method is considered to be advantageous for large-scale separations of many valuable components from egg yolk.

• Animal cells and systems
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• 제5권1호
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• pp.85-90
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• 2001

Yolk platelets, one of the main food stores in the embryonic development, are composed of proteins. However, little is known about the identity of proteins utilized at certain stages of embryogenesis. In this study, we followed the fates of embryonic storage proteins by using an anti-polyubiquitin monoclonal antibody (mAB) as a probe. The mAb recognized the major storage proteins of Drosophila, Xenopus and chicken eggs. In the Drosophila embryo, the mAb-reactive 45-kDa protein was not used until stage 11 but was used up at stage 16 when the embryo completed segmentation. In the Xenopus embryo, the mAb-reactive 111 kDa protein was mostly utilized between stages 42 and 45 implying that the protein might be an energy source used just prior to feeding on food. By N-terminal sequencing the storage protein of Xenopus embryo was identified as a lipovitellin 1. This study confirms that storage proteins are used almost simultaneously at certain stages of embryogenesis and that vitellogenin 1 is the last storage protein in Xenopus embryogenesis.

• KSBB Journal
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• 제14권6호
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• pp.677-681
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• 1999

계란의 난황으로부터 유래한 IgY의 분리와 정제과정이 흐름을 정리한 결과, 난황에서의 수용성 단백질의 분리단계가 단백질의 수율을 증가시키는데 가장 큰 영향을 미치는 것으로 판단되었다. 본 연구에서는 자연 침전방법을 통하여 실험하였는데 수율의 증가를 위해서는 원심분리와 같이 수용성 단백질의 양을 많이 얻을 수 있는 방법이 필요하고, 인지질이나 lipoprotein등의 성분의 제거효율을 높이기 위해서는 x-carrageenan등과 같은 natural gum성분의 첨가와 같은 방법이 필요하다. 그러므로 자연침전을 이용하여 수율의 증가측면과 비용의 절감의 효과를 얻을 수 있었다. 보다 효율적인 IgY의 분리를 위해서는 초기 단계에서 수율의 극대화와 불순성분 제거의 최대화가 동시에 요구되고 있다. 전처리 후의 시료를 이용하여 이온교환 크로마토그래피와 gel filtration chromatography를 통해 순도 90% 이상의 IgY를 얻을 수 있었다.