For application of a yellow pigment as food additives, stability of a water-soluble yellow pigment from Bacillus sp. PY123 was investigated. The yellow pigment from Bacillus sp. PY123 was purified with pH treatment, activated carbon and silica gel column chromatography. The partial purified yellow pigment appeared only one spot on silica gel TLC after 12 evaporation and under irradiation of UV 253nm at dark room. Rf value of the pigment was measured at 0.04 and 0.12 with development of a solvent mixture (Butanol : Acetic acid : water = 4 :1:5) and a solvent mixture (Isopropanol : Ammonia : Water = 9 :1: 2), respectively, The partial purified pigment appeared a white fluorescence under UV365nm irradiation. The partial purified yellow pigment had a main peak and a minor peak on HPLC using 20mM phosphate buffer(pH 7.0) at 1ml/min flow rate. The partial purified pigment was stable at heat treatment, acidic pH, oxide-reductants and surfactants.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.2
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pp.338-342
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2002
Antimicrobial activity of yellow pigment produced by Monascus anka Y7 (Y7) was studied. The crude yellow pigment of Y7 showed antimicrobial activity against some bacteria and yeasts. The diameter of inhibition zone against gram-positive bacteria was a little smaller t]fan that of gram-negative bacteria to the crude yellow pigment. Especially, E2 fraction obtained from the crude yellow pigment by TLC method showed high anti-microbial activity against E. coli.. The fraction had bright yellow pigment, showing fluorescent light and having the maximum absorption at 373 nm. Citrinin, a mycotoxin which had been characterized as an antimicrobial substance from a Monascus strain, was not detected in the E2 fraction and in the crude yellow pigment by the results of TLC and HPLC. This indicates that the antimicrobial activity of Y7 pigments did not any relationship with citrinin. Yellow degree (b/a of Hunters color value) of Y7 pigment was much higher than that of other natural colorants such as annatto, gardenia yellow and carthamus yellow. But the colors of all of the yellow pigments were similar by panels. Thus, the yellow pigment of Y7 could be used as a useful alternative colorant for food industry, having the advantage of antimicrobial activity.
Conversion of Gardenia jasminoides yellow pigment into blue-green pigment by 8 bacterial species was examed. Bioconversion pattern can be categorized into three types according to absorption spectra characteristics. The same pattern of the value of ${\Delta}E$ estimated by color differencemeter was also observed. Conversion rate by S. epidermidis was faster than other bacterial species. It took 16 hour for S. epidermidis to convert pigment at $37^{\circ}C$. Gardenia jasminoides yellow pigment and conversion pigment were completely separated by Amberlite XAD column chromatography with $H_2O-MeOH$ solvent system. Storage stability of the conversion pigment was better than Gardenia jasminoides yellow pigment.
Storage stability of the blue-green pigment, which was converted from Gardenia jasminoides yellow pigment by Staphylococcus epidermides and Gardenia jasminoides yellow pigment, were investigated at various conditions of light, temperature, inorganic ion and pH, The factors that cause the discoloration were light and temperature $(above\;40^{\circ}C)$. The effects of light and temperature on storage stability of blue-green pigment were less than those of Gardenia jasminoides yellow pigment. Also, the effect of light was decreased by using green filter. There were no significant effects of pH and inorganic ion on both pigments.
In order to develop the method for mass production of natural food colorant from Monascus anka, optimum cultivation conditions for producing red and yellow pigments by cultiva- ting the mold in a jar fermenter and their color characteristics were investigated. The mold produced red and yellow pigments both intracellularly and extracellularly. These pigments showed unique light absorption characteristics with maximum absorption of 494, 380, 506, and 388 nm for extracellular red pigment (ERP), extracellular yellow pigment (EYP), intracellular red pigment (IRP), and intracellular yellow pigment (IYP), respectively. Optimum conditions for producing red pigments were found to be temperature 30$\circ$C, initial pH 6.0, rice powder 3-5%, peptone 0.05%, magnesium sulfate 0.25%, aeration rate 0.1 vvm. Optimum temperature for producing yellow pigments was around 35$\circ$C which is higher than that of producing red pigments. The initial pH and rice powder concentration for producing yellow pigments were the same as those of producing red pigments. The higher concentration of nitrogen source and inorganic salt, aeration rate, the more the yellow pigments were produced. The optimum agitation speed was 100 - 300 rpm for pigment production.
To produce yellow pigment selectively, mutants were induced from Monascus anka Nakazawa et Sato IFO 4478 (KCCM 11832 strain), and their characteristics were evaluated. Five kinds of auxotrophic mutants which required amino acids for growth and pigmentation, were isolated through a series of mutagenic treatments. Especially, asparagine auxotroph Y7 produced high ratio of yellow pigment. This mutant showed all the morphological characteristics of Monascuceae but the shape of colony and the diameter of conidia. Mutant Y7 was propagated by sexual reproduction more often than asexual reproduction, which could be effective in production of pigments. Yellow pigment produced extracellularly by the mutant Y7 was more soluble in polar solvents such as ethanol and water than in nonpolar solvents. Its productivity of yellow pigment was 2.2 times higher in the mutant Y7 than in parents. In addition, its yellow pigment showed characteristics of maximum absorption at 373 nm. Moreover, the hue of pigment produced by the mutant Y7 was bright yellow, and it was stable through the subculture over 10 generations.
A study of general characteristics of acetone extracted pigment from the cell mass of Rhodospirillum rusrum DSM 467 was carried out for the development of natural food colorant. Through visible absorption scanning, it showed seven absorption peaks at 355, 410, 529, 624, 680 and 747nm, and it was shown to be yellow color. In acidic and neutral conditions, the color was yellow, while in the alkaline condition it was greenish yellow. This pigment was stable at pH range between 3.0~10.0, and below 4$0^{\circ}C$. In the presence of light and oxygen, the stability of pigment rapidly degraded and it became unstable in the presence of metal ions such as Cu2+, Al3+ and Fe3+. Through TLC analysis, it was shown to be composed of seven color fractions.
The Gardenia jasminoides yellow pigment and converted pigments were completely separated by Amberlite XAD-4 column chromatography. These Pigments were gel filtrated on Sephadex LH-20 column chromatography. The characteristics of absorption spectra of eluate and fractionated pigments were investigated. The pigment converted by Lactobacillus plantarum showed a single blue color with an absorption peak at 588 nm and its molecular size was bigger than that of crocetin. The pigment, converted by Staphylococcus epidermidis, Showed blue-green color, which was composed of yellow color with an absorption peak at 418 nm and blue color at 588 nm. Molecular size of the yellow pigment was smaller than crocetin and that of blue color.
This study was performed to evaluate single-dose toxicity of the gardenia yellow pigment in Sprague-Dawley rats and New-Zealand White rabbits via oral routes. The yellow pigment was administered in rats at does levels of 5,000, 2,500, 1,250, 625, 312.5mg/kg and 9mg/kg. And also yellow pigment was administered in rabbits at does levels of 5,000, 2,500, 1,250mg/kg 0 unit /kg. The rats and rabbits of both sexes were observed daily for 14 days after single oral administration. Yellow pigment treated rats and rabbits did not induce any mortalities and abnormal signs in clinical findings, body weights, gross findings and histopathological finding. Based on these results, it is impossible to estimate LD50 values in rats and rabbits. Therefore, it was concluded that gardenia yellow pigment have no effect on acute toxicity and side effect in rats and rabbit.
Monacolin K and yellow pigment, produced by Monascus sp., have each been proven to be beneficial compounds as antihypercholesterolemic and anti-inflammation agents, respectively. However, citrinin, a human toxic substance, was also synthesized in this fungus. In this research, solidstate fermentation of M. purpureus TISTR 3541 was optimized by statistical methodology to obtain a high production of monacolin K and yellow pigment along with a low level of citrinin. Fractional factorial design was applied in this study to identify the significant factors. Among the 13 variables, five parameters (i.e., glycerol, methionine, sodium nitrate, cultivation time, and temperature) influencing monacolin K, yellow pigment, and citrinin production were identified. A central composite design was further employed to investigate the optimum level of these five factors. The maximum production of monacolin K and yellow pigment of 5,900 mg/kg and 1,700 units/g, respectively, and the minimum citrinin concentration of 0.26 mg/kg were achieved in the medium containing 2% glycerol, 0.14% methionine, and 0.01% sodium nitrate at $25^{\circ}C$ for 16 days of cultivation. The yields of monacolin K and yellow pigment were about 3 and 1.5 times higher than the basal medium, respectively, whereas citrinin was dramatically reduced by 36 times.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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