Proceedings of the Korean Society for Bioinformatics Conference
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2001.10a
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pp.45-60
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2001
. Mediator of transcriptional regulation is the evolutionary conserved coactivator complex that plays He central role in the integration and recruitment of diverse regulatory signals and transcription machinery to certain promoters. In yeast, each Mediator subunit is required for transcriptional regulation of a distinct group of genes. In order to decipher the mechanistic roles of Mediator proteins in regulating developmental specific gene expression, we isolated, and analyzed a multiprotein complex containing Drosophila Mediate. homologs (dMediato.). dMediato. interacts with several sequence-sperific transcription factors and basal transcription machinery, and is critical for activated transcription in response to diverse transcriptional activators. In order to elucidate the function of Mediator in metazoan development, we isolated mutants of a conserved Mediate. subunit, Drosophila Med6 (dMed6). dMed6 null homozygotes failed to pupate and died in the third larval instar. Larval mitotic cells and most imaginal discs showed severe defects in proliferation, but no apparent morphological defect was observed in other larval tissues. Clonal analysis of dMed6 mutant cells revealed that dMed6 is essential for cell viability and proliferation of most adult cell types. Drosophila cDNA microarray, quantitative RT-PCR, and in situ expression analyses of developmentally regulated genes in dMed6 mutants showed that transcriptional activation of a subset of genes involved in neuroblast proliferation in the larval brain were most affected. Our results suggest that dMed6 is required in most for transcriptional regulation of a subset of genes important for cell proliferation and metabolism.
WRKY family proteins are a class of plant-specific transcription factors involved in stress response signaling pathways. In this study a gene encoding a putative WRKY protein was isolated from a pepper EST database (http://genepool.kribb.re.kr). The cDNA, named Capsicum annuum WRKY2 (CaWRKY2), encodes a putative polypeptide of 548 amino acids, containing two WRKY domains with zinc finger motifs and two potential nuclear localization signals. Northern blot analyses showed that CaWRKY2 mRNA was preferentially induced during incompatible interactions of pepper plants with PMMoV, Pseudomonas syringae pv. syringae 61, and Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria race 3. Furthermore, CaWRKY2 transcripts were strongly induced by wounding and ethephon treatment, whereas only moderate expression was detected following treatment with salicylic acid and jasmonic acid. CaWRKY2 was translocated to the nucleus when a CaWRKY2-smGFP fusion construct was expressed in onion epidermal cells. CaWRKY2 also had transcriptional activation activity in yeast. Taken together our data suggest that CaWRKY2 is a pathogen-inducible transcription factor that may have a role in early defense responses to biotic and abiotic stresses.
Three novel Class A genes that encode heat shock transcription factor (HSF) were cloned from Oryza Sativa L using a yeast hybrid method. The OsHSF7 gene was found to be rapidly expressed in high levels in response to temperature, which indicates that it may be involved in heat stress reception and response. Over-expression of OsHSF7 in transgenic Arabidopsis could not induced over the expression of most target heat stress-inducible genes of HSFs; however, the transcription of some HSF target genes was more abundant in transgenic plants following two hours of heat stress treatment. In addition, those transgenic plants also had a higher basal thermotolerance, but not acquired thermotolerance. Collectively, the results of this study indicate that OsHSF7 might play an important role in the response to high temperature. Specifically, these findings indicate that OsHSF7 may be useful in the production of transgenic monocots that can over-express protective genes such as HSPs in response to heat stress, which will enable such plants to tolerate high temperatures.
Jiang, Dao-Jun;Yu, Hong-Xiu;Hexige, Sa-Yin;Guo, Ze-Kun;Wang, Xiang;Ma, Li-Jie;Chen, Zheng;Zhao, Shou-Yuan;Yu, Long
BMB Reports
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v.37
no.4
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pp.402-407
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2004
A human gene T-complex protein 10 like (TCP10L) was cloned in our lab. A previous study showed that it expressed specifically in the liver and testis. A transcription experiment revealed that TCP10L was a transcription factor with transcription inhibition activity. In this study, the human MAD4 was identified to interact with TCP10L by a yeast two-hybrid screen. This finding was confirmed by immunoprecipitation and subcellular localization experiments. As MAD4 is a member of the MAD family, which antagonizes the functions of MYC and promotes cell differentiation, the biological function of the interaction between TCP10L and MAD4 may be to maintain the differentiation state in liver cells. Also, we propose that the up-regulation of Myc is caused by the down-regulation of TCP10L in human hepatocarcinomas.
Thp1/PCID2, PCI domain-containing protein, is a component of the evolutionally conserved TREX-2 complex linking mRNA transcription and export. In fission yeast, Schizosaccharomyces pombe, the pci2 (SPBC1105.07c) gene encodes a PCI domain-containing protein that is predicted as a fission yeast orthologue of Thp1 (in budding yeast)/PCID2 (in human). Repression of pci2 expression inhibited both growth and mRNA export. And over-expression of pci2 also exhibited growth retardation with slight accumulation of $poly(A)^+$ RNA in the nucleus. Moreover, yeast two-hybrid and co-immunoprecipitation analysis showed that the Pci2 protein physically interacted with Sac3 and Dss1, which are members of TREX-2 complex. These observations support that the S. pombe Pci2 protein, as a component of TREX-2 complex, is implicated in mRNA export.
We improved on a unified saccharification and fermentation (USF) system for the direct production of ethanol from agarose by increasing total agarase activity. The pGMFα-NGH plasmid harboring the NABH558 gene encoding neoagarobiose hydrolase and the AGAG1 and AGAH71 genes encoding β-agarase was constructed and used to transform Saccharomyces cerevisiae 2805. NABH558 gene transcription level was increased and total agarase activity was increased by 25 to 40% by placing the NABH558 gene expression cassette upstream of the other gene expression cassettes. In the 2805/pGMFα-NGH transformant, three secretory agarases were produced that efficiently degraded agarose to galactose, 3,6-anhydro-L-galactose (AHG), neoagarobiose, and neoagarohexaose. During the united cultivation process, a maximum of 2.36 g/l ethanol from 10 g/l agarose was produced over 120 h.
The transactivation potential of HIV-1 Vpu was identified from the yeast two-hybrid screening process. The helix II domain of HIV-1 Vpu protein and mutant Vpu protein lacking the transmembrane domain exhibited transactivation of the LacZ and Leu2 reporter genes carrying LexA upstream activating sequences, but full-length HIV-1 Vpu and the helix I domain of HIV-1 Vpu did not. The helix II domain of HIV-1 Vpu consists of a number of acidic amino acids, and is especially rich in glutamic acid, a characteristic of many transcription factors. This result suggests that protein-protein interaction may occur through the acidic helix II domain of HIV-1 Vpu.
One of the WHSC1/MMSET/NSD2 variant RE-IIBP is a histone H3-K27 methyltransferase with transcriptional repression activity. Overexpression of RE-IIBP in various types of leukemia suggests it's role in leukemogenesis. Here we identify two proteins, KRAB zinc finger protein ZNF 350 and enolase-1 as RE-IIBP interacting proteins by yeast two-hybrid screening and confirmed direct interaction in vivo and in vitro. Both proteins have been known for their role in transcriptional repression. Reporter assays using transient transfection demonstrated that both ZNF 350 and enolase-1 proteins synergistically repressed transcription with RE-IIBP, respectively. These results indicate both proteins have roles in RE-IIBP mediated transcriptional repression by involving co-repressor complex.
Microorganisms are significantly affected when the ambient pH of their environment changes. They must therefore be able to sense and respond to these changes in order to survive. Previous investigators have studied various fungal species to define conserved pH-responsive signaling pathways. One of these pathways, known as the Pal/Rim pathway, is activated in response to alkaline pH signals, ultimately targeting the PacC/Rim101 transcription factor. Although the central signaling components are conserved among divergent filamentous and yeast-like fungi, there is some degree of signaling specificity between fungal species. This specificity exists primarily in the downstream transcriptional targets of this pathway, likely allowing differential adaptation to species-specific environmental niches. In this review, the role of the Pal/Rim pathway in fungal pH response is discussed. Also highlighted are functional differences present in this pathway among human fungal pathogens, differences that allow these specialized microorganisms to survive in the various micro-environments of the infected human host.
Park, Gyung-Soon;Ryu, Young-Hyo;Hong, Young-June;Uhm, Han-Sup;Choi, Eun-H.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2012.02a
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pp.476-476
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2012
Although plasma is an efficient means of microbial sterilization, mechanism of plasma effect on microorganisms still needs to be clarified. In addition, a limited number of studies are available on eukaryotic microorganisms such as yeast and fungi in relation to plasma application. Thus, we investigated cellular and molecular aspects of plasma effects on a filamentous fungus, Neurospora crassa by making use of argon plasma jet at atmospheric pressure. The viability and cell morphology of N. crassa spores exposed to plasma were both significantly reduced depending on the exposure time when treated in water. The intracellular genomic DNA content was dramatically reduced in fungal tissues after a plasma treatment and the transcription factor tah-3 was found to be required for fungal tolerance to a harsh plasma environment.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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