In order to isolate carotenoid-hyperproducing yeast, low-dose gamma irradiation was used as means of mutagenesis. Phaffia rhodozyma was treated by gamma irradiation of less than 10 kGy, which is considered to be a wholesome irradiation condition established by the Food and Drug Administration. Through repeated rounds of gamma irradiation and visual screening, mutant 3A4-8 was obtained. It produced a $3,824{\mu}g$ carotenoid/g yeast, 69% higher content than $2,265{\mu}g/g$ yeast of the unirradiated one. This result indicates that low-dose gamma irradiation could be used as means of mutagenesis to obtain carotenoid-hyperproducing strain of Phaffia rhodozyma, since only carotenoid-hyperproducing yeast survived gamma irradiation by scavenging oxygen radicals generated by radiolysis of water.
The chromosomal DNA fragment from Phaffia rhodozyma CBS 6938 which is able to autonomously replicate in the yeast Saccharomyces cerevisiae was cloned on an integrative URA3 plasmid. Its minimal fragment exhibiting autonomously replicating activiy in the S. cerevisiae gave a higher frequency transformation efficiency than that found for centromere-based plasmid, and enabled extrachromosoma1ly stable transmission of the plasmids in one copy per yeast cell under non-selective culture condition. The 836-bp DNA element lacked an ORF and did not contain any acceptable match to an ARS core consensus. Sequence analysis, however, displayed a cluster of three hairpin-Ioop-sequences with individual $\triangle {G_{25}}^{\circ}C$ free energy value of -10.0, -17.5, and -17.0 kcal. $mor^{-l}$as well as a 9-bp sequence with two base pair mismatches to the S. cerevisiae/E. coli gyrase-binding site. This 836-bp sequence also included one 7-bp sequence analogous to the core consensus of centromeric DNA element III (CDEIII) of S. cerevisiae, but CDEIII-like 7 bp sequence alone did not give a replicative function in this yeast.
Kim, Nam-Hoon;Shin, Jung-Kue;Lee, Seok-Hoon;Cho, Hyung-Yong;Pyun, Yu-Ryang
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.31
no.6
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pp.1529-1535
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1999
This study was done for the extraction of carotenoid from Phaffia rhodozyma in combination with PEF and other methods. PEF treatment conditions were $30{\sim}80\;kV/cm,\;100{\sim}1000\;Hz\;and\;100{\sim}1000\;{\mu}s$. In order to increase permeability of yeast cell wall, various methods such as freezing-thawing, mechanical treatment, solvents, permeabilizing agents, and yeast cell wall lytic enzyme were used before PEF treatment. The combination of PEF $(50\;kV/cm,\;300\;Hz,\;1000\;{\mu}s)$ and conventional methods such as solvent and freezing-thawing pre-treatment had no effects on the extraction of carotenoid pigments. The extent of extracted carotenoid by the PEF $treatment(50\;kV/cm,\;300\;Hz,\;1000\;{\mu}s)$ combined with yeast cell wall lytic enzyme and mechanical pre-treatment increased 52% and 69.8% more than the sum of that by each treatment, respectively. Permeabilizing agents, especially Tween 20 and capric acid, enhanced the extraction efficiency of carotenoid pigments from P. rhodozyma cells. These results indicated the feasibility for the continuous extracting carotenoid pigments from P. rhodozyma by PEF combined with other permeabilizing methods.
Specific carotenoids and astaxanthin biosynthesis power of Phaffia rhodozyma mutant 876, which was obtained after NTG a and UV treatments, was higher than those of the wild type by 40% and 50%, respectively. The mutant strain did not show t the catabolite repression even at 22% (w/v) glucose concentration. The optimum C{N ratio was 2.0, and the optimum t temperature and initial pH were $22^{\circ}C$ and 6.0, respectively. 80th cell growth and astaxanthin formation decreased drastically a as the fermentation temperature was increased over $22^{\circ}C$, whereas they were comparable in the pH range between 5.0 and 7 7.0. Inoculum size did not affect the final cell density nor the carotenoids biosynthesis, and 3%(v/v) was selected as optimal. H Higher dissolved oxygen concentration facilitated astaxanthin biosynthesis, and aeration rate of 1.0 v/0/m and agitation speed of 400 rpm were selected as optimum. The final cell dens때 of 43.3 g/L and the volumetric astaxanthin and carotenoids concentrations of 110.6 mg/L and 149.4 mg/L, respectively, were obtained. The specific carotenoids concentration was 3.45 m mg{g-yeast(dry). Yx/s and Yp/s values of 0.37 and 1.08 were obtained. The result of this study will provide basic information u useful for mass production of astaxanthin from P. rhodozyma fermentation.
A total of 96 ISA Brown layers, 63-wk-old, were used in a 12-day feeding trial to measure the effect of dietary astaxanthin and capxanthin on their accumulation in egg yolk. The hens were fed diets containing astaxanthin from the yeast, Phaffia rhodozyma, at 22.5 mg/kg feed, or synthetic compound at 45 mg/kg feed, and capxanthin from paprika extract at 45 mg/kg feed. The levels of yolk astaxanthin from the two pigments were saturated at $9^{th}$ day of feeding. Capxanthin was not accumulated in egg yolk but its derivatives were slightly present after $6{\sim}9$ days of feeding. The level of astaxanthin accumulated in egg yolk was proportional to the level of dietary astaxanthin. Except the color of egg yolk, other quality factors of eggs were not significantly different among the treatments.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.27
no.5
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pp.935-939
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1998
The concentrations of astaxanthin and $\alpha$-tocopherol were measured from the muscle of the rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) that had been fed the red yeast(Phaffia rhodozyma) containing 0.2% astaxanthin for 7, 14 and 21 days. The effect of the astaxanthin supplementation for 21 days on peroxidation of liver and muscle lipids of the rainbow trouts was examined. The astaxanthin was found to be accumulated in the rainbow trout muscle when fed for 7 days with astaxanthin supplementation(80mg/kg diet) in the form of the red yeast and the content did not increase further when fed longer up to 21 days. Seven days supplementation of astaxanthin raised the rainbow trout muscle content of the astaxanthin to 17.3$\mu\textrm{g}$/g tissue from 11.8$\mu\textrm{g}$/g tissue in mature control group. Although the hepatic TBARS level was found to be significantly decreased, the astaxanthin supplementation did not alter the $\alpha$-tocopherol and TBARS contents of the rainbow trout muscle.
Kim, Soo-Ki;Lee, Jun-Hyeong;Lee, Chi-Ho;Yoon, Yoh-Chang
Journal of Microbiology
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v.45
no.2
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pp.128-132
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2007
The red yeast Xanthophyllomyces dendrorhous (previously named Phaffia rhodozyma) produces astaxanthin pigment among many carotenoids. The mutant X. dendrorhous G276 was isolated by chemical mutagenesis. The mutant produced about 2.0 mg of carotenoid per g of yeast cell dry weight and 8.0 mg/L of carotenoid after 5 days batch culture with YM media; in comparison, the parent strain produced 0.66 mg/g of yeast cell dry weight and a carotenoid concentration of 4.5 mg/L. We characterized the utilization of carbon sources by the mutant strain and screened various edible plant extracts to enhance the carotenoid production. The addition of Perilla frutescens (final concentration, 5%) or Allium fistulosum extracts (final concentration, 1%) enhanced the pigment production to about 32 mg/L. In a batch fermentor, addition of Perilla frutescens extract reduced the cultivation time by two days compared to control (no extract), which usually required five-day incubation to fully produce astaxanthin. The results suggest that plant extracts such as Perilla frutescens can effectively enhance astaxanthin production.
Iturriaga, Enrique A.;Velayos, Antonio;Eslava, Arturo P.
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.5
no.4
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pp.263-274
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2000
Carotenoids are widely distributed natural pigments which are in an increasing demand by the market, due to their applicatins in the human food, animal feed, cosmetics, and pharmaceutical industries. Although more than 600 carotenoids have been identified in nature, only a few are industrially important (${\beta}$-carotene, astaxanthin, lutein or lycopene). To date chemical processes manufacture most of the carotenoid production, but the interest for carotenoids of biological origin is growing since theire is an increased public concern over the safety of artificial food colorants. Although much interest and effort has been devoted to the use of biological sources for industrially important carotenoids, only the production of biological ${\beta}$-carotene and astaxanthin has been reported. Among fungi, several Mucorales strains, particularly Blakeslea trispora, have been used to develop fermentation processes for the production of ${\beta}$-carotene on almost competitive cost-price levels. Similarly, the basidiomycetous yeast Xanthophyllomyces dendrorhous (the perfect state of Phaffia rhodozyma), has been proposed as a promising source of astaxanthin. This paper focuses on recent findings on the fungal pathways for carotenoid production, especially the structure and function of the genes involved in the biosynthesis of carotenoids in the Mucorales. An outlook of the possibilities of an increased industrial production of carotenoids, based on metabolic engineering of fungi for carotenoid content and composition, is also discussed.
The applicability of electronic nose was tested to detect lipid peroxidation in chickens and to measure antioxidant effect of astaxanthin in chicken carcasses. Two sources of astaxanthin were fed to 62-wk-old spent laying hens to improve meat quality: natural astaxanthin (NA) from the red yeast, Phaffia rhodozyma, and synthetic astaxanthin (SA) from chemical synthesis. One hundred forty four ISA Brown laying hens were used in a 6-wk feeding trial. Three treatments consisted of the basal diet (control), SA (100 mg astaxanthin/kg basal diet) and NA (50 mg astaxanthin/kg basal diet). The astaxanthin levels of SA and NA were set to give a similar degree of skin pigmentation. After 6-wk feeding of astaxanthin, the skins from NA and SA were discriminated from the control by electronic nose. However, electronic nose failed to distinguish between SA and NA skins after 6-wk feeding. The astaxanthin level differences between skins of SA and NA were not remarkable during the 6-wk trial. The lipid peroxide formation in skin was significantly decreased by SA but not by NA. The antioxidation effect of SA was detected by electronic nose because SA skin was discriminated from others. NA was a better pigmentation agent than SA, but the reverse was true in antioxidation. Electronic nose is applicable for detecting astaxanthin in chicken, and meat off-flavor caused by lipid peroxidation during storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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