Gaeumannomyces graminis var. tritici is a soil borne pathogenic fungus associated with wheat roots. The accurate quantification of gene expression during the process of infection might be helpful to understand the pathogenic molecular mechanism. However, this method requires suitable reference genes for transcript normalization. In this study, nine candidate reference genes were chosen, and the specificity of the primers were investigated by melting curves of PCR products. The expression stability of these nine candidates was determined with three programs-geNorm, Norm Finder, and Best Keeper. $TUB{\beta}$ was identified as the most stable reference gene. Furthermore, the exopolygalacturonase gene (ExoPG) was selected to verify the reliability of $TUB{\beta}$ expression. The expression profile of ExoPG assessed using $TUB{\beta}$ agreed with the results of digital gene expression analysis by RNA-Seq. This study is the first systematic exploration of the optimal reference genes in the infection process of Gaeumannomyces graminis var. tritici.
UHRF2 is a member of the ubiquitin plant homeo domain RING finger family, which has been proven to be frequently up-regulated in colorectal cancer cells and play a role as an oncogene in breast cancer cells. However, the role of UHRF2 in glioma cells remains unclear. In this study, we performed real-time quantitative PCR on 32 pathologically confirmed glioma samples (grade I, 4 cases; grade II, 11 cases; grade III, 10 cases; and grade IV, 7 cases; according to the 2007 WHO classification system) and four glioma cell lines (A172, U251, U373, and U87). The expression of UHRF2 mRNA was significantly lower in the grade III and grade IV groups compared with the noncancerous brain tissue group, whereas its expression was high in A172, U251, and U373 glioma cell lines. An in vitro assay was performed to investigate the functions of UHRF2. Using a lentivirus-based RNA interference (RNAi) approach, we down-regulated UHRF2 expression in the U251 glioma cell line. This down-regulation led to the inhibition of cell proliferation, an increase in cell apoptosis, and a change of cell cycle distribution, in which S stage cells decreased and G2/M stage cells increased. Our results suggest that UHRF2 may be closely related to tumorigenesis and the development of gliomas.
The chemical property of cinnamaldehyde is unstable in vivo, although early experiments have shown its obvious therapeutic effects on viral myocarditis (VMC). To overcome this problem, we used cinnamaldehyde as a leading compound to synthesize derivatives. Five derivatives of cinnamaldehyde were synthesized: 4-methylcinnamaldehyde (1), 4-chlorocinnamaldehyde (2), 4-methoxycinnamaldehyde (3), ${\alpha}$-bromo-4-methylcinnamaldehyde (4), and ${\alpha}$-bromo-4-chlorocinnamaldehyde (5). Neonatal rat cardiomyocytes and HeLa cells infected by coxsackievirus B3 (CVB3) were used to evaluate their antiviral and cytotoxic effects. In vivo BALB/c mice were infected with CVB3 for establishing VMC models. Among the derivatives, compound 4 and 5 inhibited the CVB3 in HeLa cells with the half-maximal inhibitory concentrations values of $11.38{\pm}2.22{\mu}M$ and $2.12{\pm}0.37{\mu}M$, respectively. The 50% toxic concentrations of compound 4 and 5-treated cells were 39-fold and 87-fold higher than in the cinnamaldehyde group. Compound 4 and 5 effectively reduced the viral titers and cardiac pathological changes in a dose-dependent manner. In addition, compound 4 and 5 significantly inhibited the secretion, mRNA and protein expressions of inflammatory cytokines TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 in CVB3-infected cardiomyocytes, indicating that brominated cinnamaldehyde not only improved the anti-vital activities for VMC, but also had potent anti-inflammatory effects in cardiomyocytes induced by CVB3.
Background: Caveolin-1, the scaffolding protein of cholesterol-rich invaginations, plays an important role in store-operated Ca2+ influx and its phosphorylation at Tyr14 (p-caveolin-1) is vital to mobilize protection against myocardial ischemia (MI) injury. SOCE, comprising STIM1, ORAI1 and TRPC1, contributes to intracellular Ca2+ ([Ca2+]i) accumulation in cardiomyocytes. The purified extract of steamed Panax ginseng (EPG) attenuated [Ca2+]i overload against MI injury. Thus, the aim of this study was to investigate the possibility of EPG affecting p-caveolin-1 to further mediate SOCE/[Ca2+]i against MI injury in neonatal rat cardiomyocytes and a rat model. Methods: PP2, an inhibitor of p-caveolin-1, was used. Cell viability, [Ca2+]i concentration were analyzed in cardiomyocytes. In rats, myocardial infarct size, pathological damages, apoptosis and cardiac fibrosis were evaluated, p-caveolin-1 and STIM1 were detected by immunofluorescence, and the levels of caveolin-1, STIM1, ORAI1 and TRPC1 were determined by RT-PCR and Western blot. And, release of LDH, cTnI and BNP was measured. Results: EPG, ginsenosides accounting for 57.96%, suppressed release of LDH, cTnI and BNP, and protected cardiomyocytes by inhibiting Ca2+ influx. And, EPG significantly relieved myocardial infarct size, cardiac apoptosis, fibrosis, and ultrastructure abnormality. Moreover, EPG negatively regulated SOCE via increasing p-caveolin-1 protein, decreasing ORAI1 mRNA and protein levels of ORAI1, TRPC1 and STIM1. More importantly, inhibition of the p-caveolin-1 significantly suppressed all of the above cardioprotection of EPG. Conclusions: Caveolin-1 phosphorylation is involved in the protective effects of EPG against MI injury via increasing p-caveolin-1 to negatively regulate SOCE/[Ca2+]i.
Echinostoma hortense (Digenea: Echinostomatidae) is one of the intestinal flukes with medical importance in humans. However, the mitochondrial (mt) genome of this fluke has not been known yet. The present study has determined the complete mt genome sequences of E. hortense and assessed the phylogenetic relationships with other digenean species for which the complete mt genome sequences are available in GenBank using concatenated amino acid sequences inferred from 12 protein-coding genes. The mt genome of E. hortense contained 12 protein-coding genes, 22 transfer RNA genes, 2 ribosomal RNA genes, and 1 non-coding region. The length of the mt genome of E. hortense was 14,994 bp, which was somewhat smaller than those of other trematode species. Phylogenetic analyses based on concatenated nucleotide sequence datasets for all 12 protein-coding genes using maximum parsimony (MP) method showed that E. hortense and Hypoderaeum conoideum gathered together, and they were closer to each other than to Fasciolidae and other echinostomatid trematodes. The availability of the complete mt genome sequences of E. hortense provides important genetic markers for diagnostics, population genetics, and evolutionary studies of digeneans.
Aims: To explore efficacy and side effects of intrapleural or intraperitoneal lobaplatin for treating patients with malignant pleural or peritoneal effusions. Methods: Patients in Jiangsu Cancer Hospital and Research Institute with cytologically confirmed solid tumors complicated with malignant pleural effusion or ascites were enrolled into this study. Lobaplatin (20-30 $mg/m^2$) was intrapleurally or intraperitoneally infused for patients with malignant pleural effusion or ascites. Results: From 2012 to 2013, intrapleural or intraperitonea lobaplatin was administered for patients with colorectal or uterus cancer who were previous treated for malignant pleural effusion or ascites. Partial response was achieved for them. Main side effects were nausea/vomiting, and bone marrow suppression. No treatment related deaths occurred. Conclusion: Intrapleural or intraperitoneal infusion of lobaplatin is a safe treatment for patients with malignant pleural effusion or ascites, and the treatment efficacy is encouraging.
Chen, Chen;Lv, Guang;Huang, Xin;Liao, Xue Pin;Zhang, Wen Hua;Shi, Bi
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.33
no.2
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pp.403-408
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2012
In this study, the homogenous Pd nanoparticles (Pd NPs) were first prepared with bayberry tannin (BT) as the stabilizers. Subsequently, the obtained bayberry tannin-stabilized Pd nanoparticles (BT-Pd) were immobilized onto ${\gamma}-Al_2O_3$ to prepare heterogeneous ${\gamma}-Al_2O_3$-BT-Pd catalysts. Fourier Transformation Infrared Spectrum (FTIR) and X-ray Photoelectron Spectroscopy (XPS) analyses confirmed that the Pd NPs were well stabilized by the phenolic hydroxyl groups of BT. Transmission Electron Microscopy (TEM) observation indicated that the diameter of the Pd NPs can be effectively controlled in the range of 4.2-16.0 nm by varying the amount of BT. It is found that the ${\gamma}-Al_2O_3$-BT-Pd catalysts exhibit highly activity for various olefin hydrogenations. For example, the initial TOF (turnover frequency) of the ${\gamma}-Al_2O_3$-BT-Pd in the allyl alcohol hydrogenation is as high as $12804 mol{\cdot}mol^{-1}{\cdot}h^{-1}$. Furthermore, the ${\gamma}-Al_2O_3$-BT-Pd can be reused 5 times without significant loss of activity, exhibiting a superior reusability as compared with conventionally prepared ${\gamma}-Al_2O_3$-Pd catalysts.
Objective: To explore the effect of portal vein chemotherapy on liver metastasis after surgical resection of colorectal cancer. Methods: Patients fulfilling the eligibility criteria were assigned to receive either surgery plus 1-week continuous infusion of 5-FU (study group) or surgery alone (observational group). Patients in the study group received portal vein chemotherapy, whereby 5-FU (1000 mg/d) and heparin (5000 IU/d) infusion was initiated from the day of surgery and lasted for 7 consecutive days. Liver metastasis was monitored during five years follow-up postoperatively. Results: Sixty four patients were recruited and assigned to the study group (12 with colon and 20 with rectal cancer) or the control group (10 with colon and 22 with rectal cancer). Liver metastasis rate was 12.5% in study and 25.0% in observational group, the difference being significant (P<0.01). Conclusion: Portal vein chemotherapy could be an effective treatment in preventing liver metastasis after surgical resection of colorectal cancer.
Objectives: To assess the efficacy, side effects, and the impact on quality of life with $Qinin^{(R)}$ (Cantharidin sodium) injection combined with chemotherapy for gastric cancer patients. Method: A consecutive cohort of 70 patients were divided into two groups: experimental group with cantharidin sodium injection combined with chemotherapy, while the control group received chemotherapy alone. After more than two courses of treatment, efficacy, quality of life and side effects were evaluated. Results: The response rate of experimental group was not significantly different from that of the control group (P>0.05), but differences were significant in clinical benefit response and KPS score. In addition, gastrointestinal reactions and the incidence of leukopenia were lower than in the control group (P<0.05). Conclusions: $Qinin^{(R)}$ (Cantharidin sodium) injection combined with chemotherapy enhances clinical benefit response, improving quality of life of gastric cancer patients and reducing side effects of chemotherapy. Thus $Qinin^{(R)}$ (Cantharidin sodium) injection deserves to be further investigated in randomized control clinical trails.
Objective: To investigate the therapeutic potential of human embryonic stem cells (hESCs) as a vaccine to induce an immune response and provide antitumor protection in a rat model. Methods: Cross-reactivity of antigens between hESCs and tumour cells was screened by immunohistochemistry. Fischer 344 rats were divided into 7 groups, with 6 rats in each, immunized with: Group 1, hESC; Group 2, pre-inactivated mitotic NuTu-19; Group 3 PBS; Group 4, hESC; Group 5, pre-inactivated mitotic NuTu-19; Group 6, PBS; Group 7, hESC only. At 1 (Groups 1-3) or 4 weeks (Groups 4-6) after the last vaccination, each rat was challenged intraperitoneally with NuTu-19. Tumor growth and animal survival were closely monitored. Rats immunized with H9 and NuTu-19 were tested by Western blot analysis of rat orbital venous blood for cytokines produced by Th1 and Th2 cells. Results: hESCs presented tumour antigens, markers, and genes related to tumour growth, metastasis, and signal pathway interactions. The vaccine administered to rats in Group 1 led to significant antitumor responses and enhanced tumor rejection in rats with intraperitoneal inoculation of NuTu-19 cells compared to control groups. In contrast, rats in Group 4 did not display any elevation of antitumour responses. Western blot analysis found cross-reactivity among antibodies generated between H9 and NuTu-19. However, the cytokines did not show significant differences, and no side effects were detected. Conclusion: hESC-based vaccination is a promising modality for immunotherapy of ovarian cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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