본 연구에서는 토양균이 생성하는 2차 대사산물로부터 세포증식 촉진인자 (Maturation Promoting Factor. MPF)인 cdc2/cdk2-cyclin의 복합체를 특이적으로 억제하는 물질을 분리하고 그 물질의 생리활성을 조사하였다. 토양으로부터 순수분리된 300여개의 토양균에서 생성된 배양액을 취하여 MPF의 특이적인 기질인 합성 peptide (CSH103 :HATPPKKKRK)를 사용하여 인산화 활성을 측정하였다. 그중 MPF 활성 억제능이 90% 이상인 19개의 균주를 1차적으로 선정한 후 각각에 대하여 열/pH에 대한 안정성, 각종 용매에 대한 추출성 등 이화학적 성질을 규명하였으며 이중 균주 LPL 931로부터 MPF 활성 억제제를 분리하고자 하였다. 예비실험의 결과로부터 토양균 LPL 931을 대량배양하여 열처리하고, 비이온성 수지인Amberlite XAD-2에 결합시키고 70% acetone으로 용출시켰다. 이 추출물로부터 ethylacetate와 n-butanol을 사용하여 MPF 억제 활성물질을 추출하였다. 이 추출액을 실리카겔 관 크로마토그래피, 분취 TLC, 분취 HPL를 하여 MPF 활성 억제 분획을 분리하였다.
국내에서 사용중인 농약에 대한 농민의 농약 노출량 및 양상을 조사하고자 내분비계 장애 물질로 추정되는 Mancozeb의 살포 시 작업자의 피부 노출량 및 호흡 노출량 측정을 감귤농장에서 실시하였다. 피부노출 측정은 Patch법(50$\textrm{cm}^2$)을 사용하였고 손 노출은 순면장갑을 사용하였다. 호흡노출은 XAD-2 resin 흡착제와 Personal air monitor(2L/min)를 이용, 측정하였다. Mancozeb 분석은 CS$_2$법을 이용하였고 patch, resin, 장갑, 마스크, 소변에서 Mancozeb의 회수율 및 포장회수율 모두 90%이상이었다. 감귤 재배시 Mancozeb 사용에 따른 피부노출량은 여자가 약 1800mg/hr, 남자는 약 1300mg/hr 이었고 주로 배, 등, 상박 그리고 허벅지에 노출량이 많았다. 호흡노출은 관찰되지 않았고 소변에서도 Mancozeb는 관찰되지 않았다. 위해성 평가를 위해 PDE, AQE 및 MOS를 구하였으며 MOS는 Severn의 공식을 이용하였다. MOS는 여자가 0.37, 남자가 0.58이었다.
Rubus coreantim (Rosaceae), which has been used in oriental traditional medicine as the remedies for impotence, pollution and premature ejaculation, bet-wetting and frequ ency of urination. is a fruit drug cultivating throughout southern Korea. The leaves of Rubus coreanum were extracted with 80% acetone. The extracts were separated by Ambellite XAD-2, Sephadex LH-20. MCI-gel CHP 20P and Cosmosil 75 C$_{18}$ OPN. And three flavonoids were isolated. The structures of these compounds were elucidated as quercetin-3-O-${\beta}$-D-glueuronopyranoside(l). quercetin-3-O-${\beta}$-D-glueuronopyranosyl methyl ester(2), quercetin-3-O-${\beta}$-D-xylopyranosyl-(2${\rightarrow}$1)-${\beta}$-glucopyranoside(3) on the basis of physicochemical and spectroscopic evidences.
공기 중에는 benzo(a)pyrene을 위시한 여러 가지 polynuclear aromatic hydrocarbons(PNAs)가 존재하고 있으며, 그 측정방법이 매우 복잡하여 아직 통일된 적절한 방법이 없다. 본 연구는 공기 중의 PNAs를 측정하기 위한 적절한 방법을 개발하기 위하여 여러 가지 실험을 실시하였고 또 실제로 근로자들을 대상으로 공기를 채취하여 분석한 결과는 다음과 같다. (1) 공기 중 PNAs의 채취방법으로는 Teflon filter와 Polyurethane foam 또는 XAD-2를 연결하여 사용하는 것이 가장 좋은 효과를 보였다. (2) 검체에서 PNAs를 추출하는 방법으로는 methylene chloride를 이용한 초음속진동법 (ultra sonication)이 효과적이었다. benzene과 cyclohexane은 추출효과가 methylene chloride보다 적었으며, 초음속진동시간은 15분이 가장 적절하였다. (3) 분석법으로는 high pressure liquid chromatograph(HPLC)가 적절하였다.
한강에서 추출한 휴믹물질의 산화를 위해 회전 반응기를 도입하였다. $TiO_2$ 광촉매의 혼합을 위해 사용되는 공기는 UV 램프와 광촉매 사이에서 UV 조사를 방해할 수 있으므로, 더 나은 UV 조사율을 위해 반응기 내부에 배플이 설치된 회전 반응기를 고안하였다. FT-IR, $^{13}C$-NMR의 분석 결과, 한강 휴믹물질은 다른 상용화된 휴믹물질과는 다른 특성을 보여주었다. XAD-7HP 수지로 분리된 한강 휴믹물질을, 반응 후 광촉매의 분리 및 회수문제를 해결하기 위해, $TiO_2$를 hollow bead에 고정화한 광촉매와 UV-A, UV-C 램프를 사용하여 광촉매산화시켰다. 초기 휴믹물질의 TOC 농도가 5 mg/L일 때, 초기 pH 3, $TiO_2$ 주입률 2.0 g/L을 최적 조건으로 결정하였다. 또한 UV-C와 UV-A 램프의 비교실험을 수행한 결과, 비슷한 TOC 제거율을 보였다. 하지만, 분자량 분포 실험 결과, UV-A 램프보다 UV-C 램프로 광촉매산화시킨 것이 상대적으로 저분자량 부분이 증가하였다.
A method for the determination of alkylphenols, chlorophenols and bisphenol A in paper materials using GC/MS-SIM has been developed. Eleven endocrine disrupting chemicals (EDCs) of phenols in paper samples were extracted with acetonitrile. Also, solid-phase extraction (SPE) with XAD-4 and subsequent conversion to isobutoxycarbonyl derivatives or tert.-butyldimethylsilyl derivatives for sensitive analysis with the selected ion-monitoring (SIM) mode. The recoveries were 82.4∼108.8 % by area ratio of pheranthrene-d$\sub$10/ vs bisphenol A d$\sub$l6/. (isoBOC derivatization and TBDMS derivatization) The SIM responses were linear with the correlation coefficient varying 0.9717∼0.9995 (isoBOC derivatization), and 0.9842∼0.9980 (TBDMS derivatization). The range of concentrations was respectively, 0.95∼l.44 ng/g in 2,4-dichlorophenol, 1.01∼1.17 ng/g in t-butylphenol, 2.17∼5.84 ng/g in pentachlorophenol, 12.68∼14.88 ng/g in nonylphenol and 30.84∼153.72 ng/g in bisphenol A.
To search and develop the compounds exhibiting antifungal activities against the mycelial phase of Candida albicans, approximately 2,900 microorganisms isolated from soil were examined for antifungal activity. Among them, a strain with preferential activity against the mycelial phase of Candida albicans was isolated and identified as Streptomyces sp. A393. Isolation and purification of compounds A393 showing antifungal activity against the mycelial phase of C. albicans were performed using XAD-7 column chromatography, silica gel chromatography, preparative thin- layer silica gel chromatography, and HPLC. The molecular weights of compounds isolated from Streptomyces sp. A393 were determined as 774, 790, 804 and 820. These compounds appeared to have a structure of macrolide antibiotics, oligomycin A, B, C and E. Especially, oligomycin E, which is formerly reported to have no antifungal activity, showed antifungal activity against the mycelial phase of Candida albicans.
Free and glycosidically bound volatiles from three green tobacco leaves(NC 82, KF 109 and Br-21) were separated by nonionic resin Amberlite XAD-2 adsorption column chromatography and election by selective solvents. Aglycones from the glycosidically bound fractions were released by enzymatic hydrolysis with almond B-glucosidase. A total of 20 components identified from free and glycosidically bound fractions, the major components were benzaldehyde, benzyl alcohol, 2-phenylethyl alcohol, 3-oxo- -ionol, 3-hydroxy-B-ionone, 3-oxo-7, 8-dihydro-n-ionol and scopoletin. Six Cl.B norisoprenoids identified in this study, which have been described to possess a characteristic tobacco aroma-enhancing effect, were not presented in free forms but rather bound glycosidic forms.
양파 조미액으로부터 ACE 저해활성 물질을 분리하기 위해 hexane, ethylether, ethylacetate, butanol과 물로 분획시, 4.8g의 당 함량과 31.9 mg의 phenol성 물질을 함유한 butanol 분획이 82.1%의 ACE 저해활성을 나타내었고, 70.3%의 ACE 저해활성을 보인 양퍄 조미액보다 높은 저해활성을 보였다. Butanol 분획을 Amberite XAD-2column으로 분리한 결과, ACE 저해활성을 보이는 미흡착 분획(F1)를 얻었다. 활성분획 F1을 Sephadex LH-20column으로 분획한 결과, 4개(F1-1,F1-2,F1-3,F1-4)의 분획을 얻었으며, 이중 F1-3 분획의 ACE 저해활성은 93%로 가장 높은 저해활성을 보였다. Sephadex LH-20 column chromatography에 의해 얻어진 활성분획F1-3을 Supercosil LC-18 column을 이용하여 분리한 결과, 6분대에서 ACE 저해활성을 가지는 단일 peak(F1-3a)를 얻었다. 각 정제 과정에서 얻은 분획들은 전형적인 flavonoid의 band I과 bandII의 피크를 보였다. 또한 ACE에 대한 저해기작은 flavonoid 물질이 보이는 전형적인 비경쟁적 저해양상을 보였다.
청주 근처 토양에서 분리한 에너지 대사 저해제인 2,4-dinitrophenol (DNP)에 내성을 보이는 Streptomyces CM 001 균주가 생산하는 항진균성 물질(CUA)을 순수하게 분리 정제하고 화학분석을 통한 구조의 규명, 항진균활성 연구 및 유전적 변이원성(mutagenicity)등을 살펴보았다. CM 001 균주를 베네트 배지와 같이 영양성이 좋은 배지에서 배양시 항진균 활성이 동반 생성되는 색소와 비례적으로 증가했다. 배양 상등액 속의 항진균성 물질들을 염산처리, 유기용매처리 후 Amberlite XAD-4 column chromatography, silica gel adsorption-Sephadex LH-20 chromatography 과정을 통해 색소가 제거된 부분 정제 백색분말로 얻었다 이로부터 Prep. HPLC과정을 통하여 8종의 화합물을 각기 분리하였는데 이 화합물들은 동일한 UV spectrum과 216, 260nm에서 최대 흡수파장을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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