Projections from the prefrontal cortex to subdivisions of the dorsal raphe nucleus were investigated in the rat using retrograde and anterograde tracing methods. A retrograde tracer, gold-conjugated horseradish peroxidase (WGA-apo-HRP-gold), was injected into each subdivision of the dorsal raphe including lateral wing, dorsomedial, and ventromedial areas. The majority of retrogradely labeled cells were located in the prelimbic, infralim-bic, and dorsal peduncular areas of the medial prefrontal cortex. A few cells were also identified in the cingulate, various regions of the orbital, and agranular insular cortices. Secondly, an anterograde tracer, Phaseolus vulgaris leucoagglutinin (PHA-L), was injected into the medial prefrontal cortex involving the prelimbic or infralimbic areas. Axonal fibers with varicosities were identified in all subdivisions of the DR including the lateral wing, dorsomedial, and ventromedial areas. Projections were bilateral, with ipsilateral predominance. Axonal fibers were observed at the lateral border of medial longitudinal fasciculus or in the interfascicular region at the midline. The present findings demonstrate that both the midline and lateral wing regions of the dorsal raphe nucleus receive excitatory input from cognitive and emotional centers of the cerebral cortex.
The fiber projection from the prefrontal cortex to the locus coeruleus (LC) in the periventricular region was analyzed in rat using anterograde and retrograde tracing methods. Following injection of an anterograde tracer, Phaseolus vulgaris leucoagglutinin (PHA-L), into prelimbic and infralimbic regions of the medial prefrontal cortex, labeled axonal fibers with varicosities were observed bilaterally within the LC, with ipsilateral predominance. Terminal labeling was also observed in the region medial to the nucleus at rostral to middle levels of the LC, whereas axonal labeling in the caudal LC was minimal. Anterogradely-labeled axonal fibers were not found in the subcoerulear region. A retrograde tracer, gold-conjugated and inactivated wheatgerm-agglutinin horseradish-peroxidase (WGA-apo-HRP-gold), was injected into several rostro-caudal levels of the LC. Majority of retrogradely-labeled cells were observed in the prelimbic or infralimbic regions of the medial prefrontal cortex when the injections were made into rostral to middle levels of the LC. Only a few cells were observed in cingulate, dorsal peduncular, orbital, or insular cortices. The present findings suggest that the nucleus LC receives restricted, excitatory inputs from cognitive, emotional, and autonomic centers of the cerebral cortex and might secondarily have influences on widespread brain regions via its diversified monoaminergic innervation.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제31권2호
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pp.137-142
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2005
To analyze the developmental changes in soma diameters of digastric motoneurons, wheat-germ agglutinin conjugated horseradish peroxidase (WGA-HRP) was injected into the digastric muscle and visualized the retrogradely HRP-labeled motoneurons through tungstate/tetramethylbenzidine (TMB) and following diaminobenzidine (DAB) reactions. The results obtained from Sprague-Dawley rats at postnatal days 1 (P1), 10 (P10) and 30 (P30) indicated as follows: firstly, soma diameters of digastric motoneurons showed unimodal distribution in all postnatal days examined; secondly, the period of P1 to P10 (period 1) showed about 2 times faster growth rate than that of P10 to P30 (period 2); thirdly, the smallest soma examined in each postnatal day exhibited slower growth rate with that of the largest one (increase ratio in soma diameters from P1 to P30, smallest vs. largest = 1.62 : 1.93); Finally, relative growth rates a day showed again that period 1 had faster growth rate than that of period 2. Consequently, developmental changes in soma diameters of digastric motoneurons resulted in very different growth rates between both periods. This implies that the growth of the soma is almost completing within P10 and thereafter growing slowly. The period 1 and 2 are corresponding to sucking and sucking/masticatory period, respectively. Therefore present study providing morphological changes in soma diameters of digastric motoneurons suggests that both periods and their different growth rates of the motoneurons in each period may closely be related with each other.
형질전환 가금의 생산은 생체반응기(Bioreactor)가금에 의한 고부가가치의 생의약 물질을 저비용, 고효율로 생산할 수 있으며, 배 발달과정 및 유전자 조절기작 규명을 통한 학문적 이용성 등 다양한 분야에 응용될 수 있다. 형질전환 가금을 생산하기 위한 방법 중 닭의 배 발생 초기에 발생하는 성세포(정자 혹은 난자)의 전구세포인 원시생식세포를 이용한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 그러나 이를 검증할 원시생식세포 특이적 마커의 부재로 많은 어려움을 겪고 있다. 따라서 본 연구는 원시생식세포의 특성 분석을 위해 PAS(Periodic acid-Schiff) 염색 및 특이항체 (SSEA-1,3,4 & Integrins $\alpha$6, $\beta$l) 그리고 lectins (STA, DBA, ConA, WGA)를 이용하였다. 이번 연구결과를 통한 닭 원시생식세포의 특이적 마커의 개발은 원시생식세포를 이용한 가금의 형질전환 연구에 기여할 것이다.
Background: Angelica gigas, A. sinensis, and A. acutiloba are commercially important in the herbal medicine market, and among them, A. gigas has the highest economic value and price. However, their similar morphological traits are often used for fraud. Despite their importance in herbal medicine, recognition of the differences between Angelica species is currently inadequate. Methods and Results: A multiplex polymerase chain reaction (PCR) method was developed for direct detection and identification of A. gigas, A. sinensis, and A. acutiloba. The gene for the distinction of species was targeted at ITS in the nucleus and trnC-petN gene in chloroplasts. The optimized multiplex PCR in the present study utilized each Angelica species-specific primer pairs. Each primer pair yielded products of 229 base pairs (bp) for A. gigas, 53 bp for A. sinensis, 170 bp for A. acutiloba. Additionally non-specific PCR products were not detected in similar species by species-specific primers. Conclusions: In the present study, a multiplex-PCR assay, successfully assessed the authenticity of Angelica species (A. gigas, A. sinensis, and A. acutiloba). and whole genome amplification (WGA) was performed after DNA extraction to identify, the species in the product. The detection method of raw materials developed in the present study could be applied to herbal medicine and health functional food management.
UDP-N-Acetylglucosamine(GlcNAc):$\beta$1,4-D-mannoside$\beta$-l ,4N-acetylglucosaminyltransferase-III (GnT-III) and UDP-N-GlcNAc:$\alpha$-6-D-mannosid$\beta$-1,6N-acetylglucosaminyltransferase-V(GnT - V) activities were determined in human hepatoma cell lines and metastatic colon cancer cells, and their activities were compared with those of normal liver cells and fetal hepatocytes. GnT-III activities were higher than those of GnT-V in hepatic carcinoma cells. When the two enzyme activities were assayed in highly metastatic colon cancer cells, GnT - V activities were much higher than those of GnT-III. When GlcN, GlcN-biant-PA and UDP-GlcNAc were used as substrates, the enzymes displayed different kinetic properties between hepatic and colon cancer cells, depending on their metastatic potentials. Normal cells of two origins had characteristically very low levels of GnT-III and -V activities, whereas hepatoma and colon cancer cells contained high levels of activities. These data were supported by RT-PCR and Northern blot analyses, showing that the expression of GnT-III and -V mRNAs were increased in proportion to the enzymatic activities. The increased GnT-III, md -V activities were also correlated with increased glycosylation of the cellular glycoproteins in hepatoma and colon cancer cells, as examined by lectin blotting analysis by using wheat germ glutinin (WGA), erythroagglutinating phytohemagglutinin (E-PHA), leukoagglutinating phytohemagglutinin (L-PHA), and concanavalin A (Con A). Treatment with retinoic acid, a differentiation agent, resulted in decreases of both GnT-III and -V activities of HepG2 and HepG3 cells. In colon carcinoma cells, however, treatment with retinoic acid resulted in a reduction of GnT-V activity, but not with GnT-III activity. Although the mechanism underlying the induction of these mzymes is unclear, oligosaccharides in many glycoproteins have been observed of cancer cells.
본 연구에서는 향신료 조제품인 고추다대기의 사용원료 확인을 위한 분자생물학적 기법을 이용한 시험법을 검토하였다. 시료 중 원료성분 확인을 위하여 고추, 마늘, 양파의 종 특이 프라이머를 이용하였으며, 대상 식품원료로는 고추다대기 6건을 선정하였다. 시료로부터 직접 유전자 추출 후 PCR을 실시하였으나 고추 등 사용원료의 확인이 어려웠다. 따라서 염 성분을 제거하기 위하여 증류수를 이용하여 3~4회 세척 후 PCR한 결과 6건 중 5건에서만 고추유전자 확인되었으며, 마늘 및 양파 성분은 모두 확인이 불가능하였다. 따라서 염 성분 제거 후 추출유전자의 증폭을 위하여 Whole Genome Amplification (WGA) 키트를 사용 후 PCR을 실시하였다. 그 결과 모든 시료에서 고추유전자(102 bp)를 확인하였으며, 양파를 함유하는 6건 및 마늘을 함유하는 4건에서 각각 양파(280 bp) 및 마늘(180 bp) 유전자를 확인하였다. 따라서 본 연구에서 검토된 고추다대기에 대한 시료 전처리법, 유전자추출법, 추출유전자증폭법 등은 고추다대기를 이용한 불량고춧가루 제조 시 이를 판별할 수 있어 식품안전관리에 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
목적 : 만성 염증성 질환에 대한 전침효과를 알아보기 위해 complete Freund's adjuvant(CFA) 유발 관절염 모델의 거퇴 관절 내 염증관련 단백질 및 복합당질의 변화를 살펴보았다. 방법 : Sprague-Dawley계 흰쥐의 족부에 CFA를 주사한 다음 3일 간격으로 2Hz, 15Hz 및 120Hz 전침자극을 주며 부종 형성여부를 plethysmometer로 측정하여 판정하였으며 30일째 거퇴관절을 취하여 4% paraformaldehyde에 고정하고 EDTA용액에서 탈회시켜 파라핀연속 절편을 얻어 $NF-{\kappa}B$를 비롯한 5종의 염증관련 단백질의 발현 및 복합당질 변화를 살펴보았다. 결과 : 관절연골 내 면역반응 중 연골기질은 반응이 없거나 약하고 연골세포는 $NF-{\kappa}Bp65$, $I-{\kappa}B{\alpha}$, iNOS 반응이 강하며 특히 유리연골층에서 더 현저하였으나 염증 및 전침자극에 따른 변화는 없었다. 관절낭에서 면역반응을 살펴보면 염증유발시 활액세포의 면역반응세포는 $I-{\kappa}B{\alpha}$가 감소한 반면 iNOS, $IL-1{\beta}$는 증가하며 특히 iNOS 증가가 현저하였으며 전침자극에 의해 iNOS 가 감소하였다. 활액막조직에서 모든 면역반응이 증가하며 특히 $NF-{\kappa}Bp65$, $I-{\kappa}B{\alpha}$, iNOS 반응이 현저한데 전침자극에 의해 $IL-1{\beta}$를 제외한 모든 반응이 감소하였다. 복합당질 염색성은 CFA를 주사한 염증유발 흰쥐군이 정상군에 비해 감소하였다. 관절연골 중 구역간질의 중성복합당질 및 연골세포피막의 산성복합당질이 현저히 감소하였다 Lectin반응도 DBA을 제외한 모든 발현이 염증유발시 감소하였다. 그러나 전침처리에 의해 정상군과 유사한 염색성과 lectin반응을 유지하였다. 특히 구역간질의 중성복합당질과 연골세포의 sWGA와 RCA-1 반응이 현저하였다. 결론 : 만성 염증성 동물모델의 거퇴 관절 내 염증관련 단백질은 관절연골보다 관절낭에서, 복합당질의 변화는 관절연골에서 큰 변화를 보였으며 전침의 자극에 의해 이들 변화가 억제되는 것을 알 수 있다. 이상의 결과로 보아 전침처치는 염증관련 단백질 발현 및 복합당질의 변화 억제를 통해 만성 관절염 질환에 효과적임을 알 수 있다.
A whole genome association (WGA) study was conducted to identify quantitative trait loci (QTL) for body conformation traits in Hanwoo cattle. The phenotypes of 497 steers were recorded from the Hanwoo Improvement Center of National Agricultural Cooperative Federation, Seosan, Korea, and analyzed using the Illumina Bovine 50 k SNP chip. A set of 35,987 SNPs that were available in the Hanwoo population was selected from the chip. After adjustments for the effects of year-season of birth, region and sire, phenotypes were regressed on each SNP using a linear regression model. Three hundred nineteen SNPs were detected for the ten conformation traits (p<0.003). For the significant SNPs, stepwise regression procedures were applied to determine best sets of markers. A total of 72 SNPs were selected (p<0.001), for which the sets of 5, 9, 10, 9, 8, 11, 4, 6, 3 and 7 SNPs were determined for height at withers, rump height, body length, chest depth, chest width, rump length, hip width, thurl width, pinbone width and heart girth, respectively. About 7-26% of the total phenotypic variation was explained by the set of SNPs for each trait. QTL for the conformation traits were harbored on most bovine chromosomes (BTAs). Four SNPs with pleiotropic effects on height at withers and rump height were detected on BTAs 3, 4, 6 and 16. A SNP with pleiotropic effects on chest width and rump length was also detected on BTA10. Two QTL regions, i.e. between 87 and 97 Mb in BTA3 and between 41 and 44 Mb in BTA7, were found, in which SNPs were detected for the five and three conformation traits, respectively. The detected SNPs need to be validated in other Hanwoo populations for commercial application to the genetic improvement of conformation characteristics in Hanwoo via marker-assisted selection (MAS).
삼차신경주감각핵에서 치수유래 일차들신경섬유의 종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말에 함유된 연접소포들을 형태학적으로 비교하기 위하여 신경추적자(WGA-HRP)를 흰쥐 앞니의 치수강에 주입하여 치수 유래 일차들신경종말을 표식한 후, 투과형 전자현미경을 통한 미세구조적 정량 분석을 실시하였다. 표식된 치수유래 일차들신경종말은 직경이 $45{\sim}55\;nm$인 구형의 소포를 함유하고 있었으며, 일부 직경이 $80{\sim}120\;nm$ 큰 치밀소포가 관찰되기도 하였다. 또한 표식된 신경종말은 다형성 연접소포를 함유하고 있는 연접이전신경종말과 대칭연접을 이루고 있었다. 일차들신경종말의 연접소포들은 긴 지름에 대한 짧은 지름의 비율(form factor)이 $0.6{\sim}0.99$의 분포를 보인 반면, 연접이 전신경종말의 연접소포들은 $0.25{\sim}0.99$까지 다양하게 나타났다. 또한 대부분의 연접이전신경종말은 GABA에 대한 면역양성반응을 보였다. 이상의 결과는 표식된 신경종말과 그에 연접하는 연접이전신경종말의 연접소포는 서로 다른 형태를 보이고 있으며, 또한 그 연접이전신경종말이 억제성 신경전달물질인 GABA를 함유하고 있음을 나타낸다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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