식용식물자원의 하나인 당귀의 생리활성 기능과 이용가능성에 관한 연구의 일환으로 세 종류의 당귀 즉 한국당귀, 일당귀 및 중국당귀의 일반성분 및 영양성분을 비교 측정한 결과는 다음과 같다. 일반성분은 건물을 기준으로 조지방 함량은 한국당귀가 가장 높았고, 수분 함량은 일당귀가 가장 높았으며, 조단백질 함량은 중국당귀가 가장 높게 나타났다. 회분과 탄수화물의 함량은 세 시료간의 차이가 거의 없었다. 유리당은 세 종류 모두 fructose 함량이 가장 높게 나타났다. 총 아미노산 함량은 한국당귀 4178.64mg%, 중국당귀 3367.13 mg% 및 일당귀 2952.10 mg% 순으로 한국당귀에서 가장 많이 검출되었다. 한국당귀, 일당귀 및 중국당귀의 아미노산 조성은 다르게 나타났지만, 세 종류 모두 arginine, proline, lysine 함량이 비교적 높게 나타났다. 당귀의 포화지방산은 한국당귀는 caproic acid 함량이 가장 높았으며, 일당귀와 중국당귀는 palmitic acid 함량이 가장 높았다. 불포화지방산은 세 종류의 당귀 모두 linoleic acid 함량이 가장 높았으며 linolenic acid, oleic acid 순으로 나타났다. 유기산 또한 세 종류의 당귀 모두 oxalic acid 함량이 가장 높게 검출되었다. 한국당귀, 일당귀 및 중국당귀의 비타민 A 함량은 각각 5.10 mg%, 6.32 mg% 및 6.11 mg%로 검출되었다. 비타민 E는 한국당귀에서만 0.47 mg% 검출되었다. 무기질은 총 8종의 무기질 성분이 검출되었고, 이 중 K 함량이 세 종류의 당귀 모두에서 가장 높았으며 다음으로 Mg, Fe, Na 순이었다. 이상의 결과 한국당귀, 일당귀 및 중국당귀의 일반성분 및 영양성분 분석 결과는 성분의 함량 차이는 있지만 성분이 동일하거나 유사한 것으로 사료된다.
본 연구는 배양 C6 glioma 세포를 대상으로 초산납(lead acetate, LA)의 신경독성을 알아보았으며, 또한 LA의 세포독성에 대한 지금초(Euphorbiae humifusae L., EH) 추출물의 영향을 조사하였다. 본 연구에서, LA는 대조군에 비하여 농도 의존적으로 세포 생존율이 감소됨으로서 신경독성을 보였으며, $0{\sim}50{\mu}M$의 LA가 각각 포함된 배양액에서 72시간 동안 세포를 처리한 결과, $XTT_{50}$ 값은 $38.6{\mu}M$로 고독성인 것으로 나타났다. 또한, $30{\sim}50{\mu}M$의 LA가 각각 포함된 배양액에서 72시간 동안 세포를 처리한 결과 $XTT_{50}$은 $38.6{\mu}M$에서 나타났다. 이와 동시에 항산화제인 vitamin E의 처리에서 LA 독성에 의하여 감소된 세포 생존율이 유의하게 증가함으로서 LA의 독성에 산화적 손상이 관여하고 있음을 제시하였다. 한편, EH 추출물은 지질과산화 저해능을 비롯하여 superoxide dismutase (SOD)-유사활성능 및 DPPH-라디칼 소거능과 같은 항산화능에 의하여 LA 독성을 효과적으로 방어하였다. 이같은 항산화 효과는 gallic acid와 같은 폴리페놀이나 또는 flavonol이나 quercetin과 같은 플라보노이드와 같은 항산화성분에 기인된 결과로 생각된다. 결론적으로, EH 추출물과 같은 천연 소재는 차후 납신경독성과 같이 산화적 손상과 관련된 질환 치료를 위한 유용한 활용 인자로 사료된다.
Bone marrow culture systems are widely used to differentiate osteoclast-like cells in vitro using several osteotropic hormones. In this study, we isolated and cultured the mouse bone marrow cells with or without some osteotropic hormones such as parathyroid hormone(PTH), prostaglandin $E_2(PGE_2)$ and $l,25(OH)_2-vitamin$$D_3$(Vit. $D_3$). We confirmed the formation of osteoclast-like cells morphologically and functionally by the expression of tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP) and by their capability to resorb dentin slices. We also studied the effects of transforming growth $factor-{\beta}(TGF-{\beta})$ and epidermal growth factor(EGF) on the Vit. $D_3-induced$ osteoclast-like cell formation. In control, a few multinucleated cells were formed whereas PTH and $PGE_2$ increased the number of multinucleated cells. PTH, $PGE_2$ and Vit. $D_3$ induced the formation of TRAP-positive multinucleated cells. After culture of mouse bone marrow cells on the dentin slices with or without osteotropic hormones, giant cells with diverse morphology were found on the dentin slices under the scanning electronmicroscopy. After removing the attached cells, resorption pits were identified on the dentin slices, and the shape of resorption pits was variable. EGF increased the osteoclast-like cell formation induced by Vit. $D_3$, however, $TGF-{\beta}$ showed biphasic effect, which at low concentration, increased and at high concentration, decreased the osteoclast-like cell formation induced by Vit. $D_3$.
대두의 발아 및 종실의 성숙과정중 토코페롤 및 지방산 함량의 변화를 알아보기 위하여 발아과정은 실험실에서 명조건과 암조건으로 구분하여 수행하였고, 종실의 성숙과정 시험은 포장에서 실시하였으며, 토코페롤과 지방산의 함량은 HPLC와 GC를 사용하여 분석하였다. 발아과정중 각 토코페롤 및 지방질 함량은 배축부의 길이가 약 10 cm로 생육시 가장 높았으며, 발아과정 후기에서는 명조건하의 ${\alpha}-$토코페롤을 제외하고 모두 감소하였다. 종실의 초기 생성과정중 ${\delta}-$토코페롤은 가장 높은 함량을 보였으나 성숙과정의 진행과 동시에 점차 감소되었고, 역으로 ${\gamma}-$ 및 ${\alpha}-$토코페롤은 종실의 성숙과정중 꾸준히 증가하였다. 성숙과정중 종실의 유지함량은 초기단계에서 현저하게 증가하였고, 지방산조성의 변화에서는 점진적인 oleic acid의 감소와 더불어 linoleic acid의 증가가 관찰되었다. 토코페롤 동족체들과 지방산들 사이의 상관성을 검토한 결과, 일부 처리구간에서 정의 상관관계가 인정되었다.
미세조류를 이용한 생물학적 이산화탄소 고정화 방법은 이산화탄소를 효과적으로 제거할 수 있는 방법으로 널리 알려져 있다. 따라서 발전소 등에서 배출되는 폐탄산가스를 고정화하기 위하여 미세조류의 성장에 영향을 주는 운전 조건을 평가하였다. 본 실험에서 사용된 Euglena gracilis는 산성 조건에서도 잘 성장하여 오염의 가능성이 적고, 고농도 이산화탄소(10-20%)에 대한 내성이 강한 것으로 알려져 있다 또한, 단백질 함량이 풍부하고 세포벽이 얇아 배양 후 사료로의 이용성도 크다. 광반응기에서 회분식 배양을 이용하여 운전 조건을 평가한 결과 실험 조건에서 최적 pH는 3.5, 온도는 $27^{\circ}C$, 이산화탄소 농도는 5~10%, 광도는 $520{\mu}mol/m^2/s$로 각각 조사되었다. 또한 이러한 자료를 기초로 하여 연속 운전을 실시한 결과 $CO_2$농도 10%, HRT 4일에서 최종 건조 무게 $1.2g/{\ell}$로 높은 성장율을 얻었다.
A cell-based assay system for monitoring NF-$textsc{k}$B activity was developed to determine the influence of activated NF-$textsc{k}$B in human HaCaT cells. The pNF-$textsc{k}$B-SEAP-NPT plasmid that permits expression of the secreted alkaline phosphatase (SEAP) reported gene in response to the NF-$textsc{k}$B activity and contains neomycin phosphotransferase (NPT) gene for the geneticin resistance in host cells was constructed and transfected into human keratinocyte cell line HaCaT. Human HaCaT transfectant cells secreted the SEAP enzyme into the culture medium in a time-dependent manner until 72h. NF-$textsc{k}$B activities were measured in the SEAP reporter gene assay using a fluorescent detection method. The treatment of HaCaT cell transfectants with known antioxidants [e.g., N-acetyl-L-cysteine and vitamin C] showed inhibition of NF-$textsc{k}$B activity in a time-and concentration-dependent manner. The phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) known as a stimulator of NF-$textsc{k}$B expression demonstrated that it increased NF-$textsc{k}$B activity in a time- and concentration-dependent manner. This assay system could be used to determine the quantitative measurement of NF-$textsc{k}$B activity in the human skin and allow the screening of anti-inflammatory agents from various synthetic chemicals and natural products for dermatological purpose. Abbrevitions used: NF-$textsc{k}$B, nuclear factor kappa B; I-$textsc{k}$B, Inhibitory kappa B; SEAP, secreted alkaline phosphatase; NPT, neomycin phosphotransferease; PCR, polymerase chain reaction: dNTP, deoxynucleoside triphosphates; DMEM, dulbecco’s modified eagle medium; FBS, fetal bovine serum; PBs, phosphate-buffered saline; MUP, 4-methylumbellifery phosphate; NAC, N-acetyl-L-cysteine; DMSO, dimethyl sulfoxide; PMA, phorbol 12-myristate 13-acetate.
Contents of amino acids, vitamins, and minerals as well as its antioxidant activitiy of Laminaria japonica water extract have been analyzed for preparation of functional foods and cosmetic products. From the analysis of total amino acids, eighteen kinds of amino acids were found in the water extract of Laminaria japonica. Among total amino acids, the order of contents was glutamic acid (2.07 mg/g), alanine (0.51 mg/g), aspartic acid (0.44 mg/g), glycine (0.34 mg/g), and valine (0.34 mg/g). In case of free amino acids, glutamic acid (0.95 mg/g), prolin (0.54 mg/g), aspartic acid (0.44 mg/g), leucine (0.07 mg/g), and phenylalanine (0.07 mg/g) were dominant compositions. Vitamin E was only detected in water extract of Laminaria japonica. The mineral contents were as follows: K 752.60 mg, Na 259.20 mg, Ca 80.20 mg, P 29.50 mg, and Fe 8.32 mg based on 100 g Laminaria japonica water extract. The nitrite scavenging activity of the extract were gradually increased with the extracts contents to 86.2% at concentration of 100 mg/mL and DPPH radical scavenging activity of the extracts were 86.4% at concentration of 50 mg/mL.
최근에 들어서 전세계적으로 식물 자원에서의 항균력 및 항산화력에 대한 관심이 광범위하게 증가하고 있다. 이는 사용되고 있는 항균제와 항산화제보다 안전한 대체 자원에 대한 관심이 높아졌기 때문으로 볼 수 있다. 따라서 본 연구에서는 Viburnum sargentii 씨앗의 메탄올 추출물의 항균력 및 항산화력과 화학적 구성에 대하여 연구를 진행하였다. 추출물의 화학 조성은 가스 크로마토 그래피-질량 분석법으로 측정하였고, 디스크 확산 분석법을 이용하여 항균 활성을 알아보았다. 액체 배지 감수성 실험을 통해 최소 억제 농도(MIC)를 측정하였고, 한천 희석법을 통해 최소 살균 농도(MBC)를 측정하였다. V. sargentii 메탄올 추출물은 실험에 사용된 그람 양성균(Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophyticus) 및 그람 음성균(Escherichia coli, Pseudomonas putida, Proteus vulgaris)의 성장을 억제하였고, MIC와 MBC는 그람 양성균에서 0.156-1.25 mg/ml, 그람 음성균에서는 0.625-5.0 mg/ml의 범위를 나타내었다. 가스 크로마토 그래피-질량 분석법 결과에서는 V. sargentii 메탄올 추출물이 약리 활성을 가지는 ${\beta}-sitosterol$과 vitamin E와 같은 여러 파이토케미컬을 포함하고 있는 것을 확인하였다. V. sargentii 메탄올 추출물의 항산화 활성은 DPPH free radical scavenging assay, reducing power assay, total antioxidant capacity의 세 가지의 실험 방법을 통하여 확인하였으며, V. sargentii 메탄올 추출물의 농도가 증가함에 따라 항산화 활성도 증가하는 것을 세 가지 실험에서 모두 확인하였다. 이러한 결과를 통하여 V. sargentii 씨앗이 병원성 균의 성장을 억제할 수 있는 활성을 가질 뿐만 아니라, 항산화 활성을 가지는 구성물이 풍부함으로 추가적인 연구를 진행하기에도 충분한 가치가 있는 것을 확인하였다.
본 연구는 산란계 사료 내 케일, 명일엽 및 부산물의 급여 시 생산성, 계란품질 일반성분, 미량광물질 및 지방산 조성에 미치는 영향을 알아보고자 시험을 실시하였다. 산란계 총 560수를 7처리 4반복 반복당 20수씩 공시하여 무첨가구, 케일 0.1%, 케일 0.3%, 케일 부산물 0.3%, 명일엽 0.1%, 명일엽 0.3% 그리고 명일염 부산물 0.3%로 처리를 나누어 사양 시험을 실시하였다. 공시재료인 케일 및 명일엽에서는 Vit. A는 검출되지 않았으나 Vit. E의 함량은 각각 3,213 및 $3,177{\mu}g$/100 g이었으며, 부산물은 각각 272.7, $747.1{\mu}g$/100 g으로 나타났다. 지방산 함량으로는 케일 전초에서 불포화지방산함량이 높았으며 케일 부산물이 가장 낮았다. 하지만, 명일엽의 경우 전초와 부산물의 불포화지방산 함량이 유사하게 나타났다. 시험 기간 중 산란을, 난중, 사료 섭취량 및 사료요구율은 각 처리간 유의적인 차이가 나타나지 않았으며 난각강도, 난각두께 및 Haugh unit에 있어서 역시 처리구간 차이는 나타나지 않았으나 난황색은 대조구 대비 케일 및 명일엽 첨가구에서 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 지방산 함량으로는 불포화지방산 함량이 대조구와 비교 시 케일 0.1%를 제외한 처리구에서 높게 나타났으나 처리구가 차이는 나타나지 않았다. 계란 내 Vit. A함량은 케일에서는 첨가 수준이 높을수록 함유량이 증가하는 경향을 나타냈으며 Vit. E함량에서 명일엽의 경우 케일에 비해 전처리구에서 높게 나타났다. 결론적으로, 케일 및 명일엽 부산물의 급여는 산란계 사료 내 첨가 급여 시 생산성 및 계란 품질에 크게 영향하지 않았으나 난황색을 개선시켰으며 생리활성물질 인 Vit. A와 Vit. E의 함량을 증가시키는 결과를 나타내어 그 이용 가능성을 충분히 제시한 결과라 할 수 있다. 하지만, 아직까지 첨가수준 및 급여 방법에 대한 연구가 미흡한 점을 미루어 볼 때 향후 더 많은 연구가 필요할 것으로 사료된다.
천연물 유래 생활습관병의 예방 및 치료에 유용한 성분을 함유하고 있는 소재를 탐색하고자 능이버섯 추출물의 생리활성을 확인하였다. 능이버섯 추출물의 nitrite 제거활성은 pH 1.2에서 강한 활성을 보였으며, 농도 의존적으로 활성이 증가하였고, 0.5 mg/mL 처리 시 저해활성이 99.85$\pm$3.05%로 대조구로 사용한 Vitamin C(0.1 mg/mL)의 99.18$\pm$0.31%과 유사하였다. 전자공여활성 역시 농도 의존적으로 증가하였으며, 0.1 mg/mL에서 90.42$\pm$0.54%로 가장 우수하게 나타났고, 0.05 mg/mL에서도 61.08$\pm$1.38%으로 높게 나타났다. 대조구로 사용한 0.1 mg/mL의 vitamin C는 95.36%, vitamin E는 92.56%, BHT는 49.55로 나타났다. 또한 능이버섯 추출물의 항산화 활성은 0.05 mg/mL 이상의 농도에서 유의차(p<0.001) 있게 항산화 활성이 존재하였으며, 특히 1 mg/mL 농도에서는 합성항산화제인 BHT보다 강한 항산화력을 나타냈다. 능이버섯 추출물의 SOD유사활성은 3,250$\pm$51 unit/g로 나타났으며, 혈전 용해활성은 표준시료인 Streptokinase(제일제당)의 1,180 unit/g보다 높은 1,843.8 unit/g의 활성을 보였고, ACE저해활성은 통상법에서 52.89$\pm$1.93%와 전처리법에서 57.63$\pm$0.61%로 높게 나타났다. 암세포에 대한 능이버섯 추출물의 세포독성에서, 폐암 세포주인 A549에 대한 증식 억제율은 능이버섯 추출물 50 mgg/mL 처리 시 84.71$\pm$2.97%로 가장 높게 나타났고, 자궁암 세포주인 HeLa의 세포독성은 1~50 mgg/mL 농도에서 40% 이상의 증식 억제효과를 나타냈으며, 위암 세포주인 AGS의 경우 5~50 mg/mL에서 약 70%의 높은 증식 억제율을 나타냈다. 간암세포주인 SK- Hep-1에 대한 능이버섯 추출물의 세포독성은 0.1~5 mg/mL까지는 증식 억제율이 증가하였으나 42.53% 수준이었다. Ames test를 이용한 돌연변이원성 실험결과 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100의 자연 돌연변이수에 비해 능이버섯 추출물 처리 시 2배 이상의 histidine positive revertant colony가 형성되어 돌연변이 유발성이 있음을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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