Kim, Eunji;Noh, Hee Min;Phat, Chanvorleak;Lee, Gung Pyo;Kim, Jun Hong;Park, Tae-Sung;Lee, Chan
원예과학기술지
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제34권6호
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pp.924-939
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2016
The great economic losses caused by Cucumber mosaic virus (CMV) infection of peppers has led to the development of genetically modified (GM) CMV-resistant peppers. We developed virus-resistant pepper plants using Agrobacterium tumefaciens -mediated transformation. The expressed recombinant protein was purified using nickel-nitrilotriacetic acid resin and immunoaffinity chromatography, and purity was assessed by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Immunoblot analysis revealed the purified CMV coat protein (CMV-CP) had a molecular mass of 25 kDa. After in-gel digestion and desalting, the internal peptide fragments of CMV-CP were sequenced by matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight. Most GM pepper and Escherichia coli BL21 internal peptides had identical peptide sequences and contained 137 of 183 whole peptides in CMV-CP. A quantitative enzyme-linked immunosorbent assay was performed to detect CMV-resistant GM peppers. We also provide basic information about the expressed protein in GM peppers for further safety assessment. The contents of soluble protein and CMV-CP were measured in GM and control peppers cultivated in three different areas of Korea. Statistical significance in terms of cultivation areas, harvest times, generations, and plant tissue origin were determined based on a P value of 0.05. The highest amount of CMV-CP was detected at the seedling stage from plant grown in each region. T3 and T5 showed significantly different levels of CMV-CP from T4 in leaves in the whorl stage. No statistical differences were observed among GM peppers at different stages of maturity in any cultivation area. The results from this study contribute to the safety evaluation of newly designed CMV-resistant GM peppers and provide a standard against which to compare other virus-resistant GM peppers.
보리 재배면적 증가로 인하여 월동한 애멸구 밀도증가가 벼 줄무늬잎마름병의 대면적 발생 위험이 상존하고 있다. 특히 호남지역은 보리재배 논과 1모작 이앙 또는 직파재배 논이 혼재하고 있어 보리 수확과 동시에 보독충인 애멸구는 벼가 자라고 있는 논으로 대규모 이동하여 병 발생을 조장하고 있다. 재배양식에 따른 줄무늬잎마름병 발생양상은 1모작 이앙과 담수직파 재배에서 병발생이 각각 2.5, 2.4%로 이모작 이앙 1.3%보다 높았다. 보리재배 논과의 2m 이내의 거리에서 보리 수확 3일전 애멸구 밀도는 5마리에서 수확 3일후 63마리로 급격하게 증가하였다. 또한 보리재배 논과 거리가 멀어짐에 따라서 애멸구 밀도는 크게 감소하였다.
Bang, Hyun Bae;Lee, Yoon Hyeok;Lee, Yong Jae;Jeong, Ki Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권2호
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pp.356-363
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2016
Human papillomavirus (HPV), a non-enveloped, double-stranded DNA tumor virus, is a primary etiological agent of cervical cancer development. As a potential tool for prophylactic vaccination, the development of virus-like particles (VLPs) containing the HPV16 L1 capsid protein is highly desired. In this study, we developed a high-level expression system of the HPV16 L1 in Escherichia coli for the purpose of VLP development. The native gene of HPV16 L1 has many rare codons that cause the early termination of translation and result in the production of truncated forms. First, we optimized the codon of the HPV16 L1 gene to the preferable codons of E. coli, and we succeeded in producing the full-size HPV16 L1 protein without early termination. Next, to find the best host for the production of HPV16 L1, we examined a total of eight E. coli strains, and E. coli BL21(DE3) with the highest yield among the strains was selected. With the selected host-vector system, we did a fed-batch cultivation in a lab-scale bioreactor. Two different feeding solutions (complex and defined feeding solutions) were examined and, when the complex feeding solution was used, a 6-fold higher production yield (4.6 g/l) was obtained compared with that with the defined feeding solution.
Alam M.F.;Banu M.L.A.;Swaraz A.M.;Parvez S.;Hossain M.;Khalekuzzaman M.;Ahsan N.
Journal of Plant Biotechnology
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제6권4호
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pp.221-227
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2004
Protocol was established for production of virus free healthy seeds using meristem ($0.3-0.5\;\cal{mm}$ in size) culture and field management under net house condition in tomato. The isolated meristem was found well established in MS liquid medium containing $0.1\;\cal{mg}\;1^{-1}\;of\;GA_3$. For shoot and root development either from primary meristem or from nodal segment of meristem derived plants, semisolid MS medium having $0.5\;\cal{mg}\;1^{-1}$ of IBA was found most effective. The elimination of the studied viruses (ToMV, CMV, ToLCV) in meristem-derived plants was confirmed by DAS-ELISA test. For field management of the virus eradicated meristem-derived plants, use of net house was found very effective measures to check viral vector visit and eventually infection. The meristem-derived plants were vigor and high yielder than the native seed derived plants and produced healthy seeds. Due to stop vector visit, no viral symptoms were observed in both $R_1\;and\;R_2$ plants cultivated in net house condition. Starting of viral infestation was observed in $R_2$ generation when they were planted in open house condition without control of vector visit. Therefore, for management of viral diseases, use of virus free meristem derived plantlets and their subsequent cultivation in soil under net house condition without using any vector killing insecticide can be recommended for producing healthy seeds in tomato. The developed protocol for environmentally healthy tomato seed production in Bangladesh may be used in the countries having similar tropical like environment conducive for viral vector visit.
Statement of problem : Resin cements were used widely on all ceramic crowns, but the influence of resin cements on biocells was not understood clearly. Purpose : This study was investigated to evaluate the biocompatibility of resin cements for all-ceramic crowns. Material and Method : The resin cements used in this study were Panavia F (Kuraray Co., Ltd. Japan), Variolink II (Vivadent Ets., Schann / Liechtenstein), and Bistite II (Bistite dual cure resin cement-clear Tokuyama Soda Co. Japan). The viability of normal human oral keratocytes, gingival fibroblast, and gingival fibroblast immortalized by Human Papilloma virus 16 was measured in vitro for evaluation of cytotoxicity on resin cements, and the response of pulp tissue was analyzed and evaluated with light microscope after application of cements at cutting edge of incisors. Results : The normal human oral keratocytes was the most sensitive to toxicity of resin cement, and toxicity of cements was higher in Bistite II than in Variolink II. The cell viability of immortalized gingival fibroblast did not affected by type of cement and cultivation period, but there was a tendency that cytotoxicity in Bistite II was higher than in Variolink II. The cell viability of gingival fibroblast was similar to that of immortalized gingival fibroblast regardless of cement type, but Bistite II showed more toxic than others after 5 days cultivation. The responses of pulp tissue according to cement type were similar after 2 days cultivation, but revealed high toxicity in Bistite II after 10 days cultivation. Conclusion : Variolink II was more biocompatible than any other resin cements used in this study.
맥류 주 재배지인 전남북 및 경남북을 중심으로 국내에서 밀, 보리 등 맥류에 심각한 피해를 일으키는 바이러스인 BaYMV, BaMMV 그리고 SBWMV를 대상으로 바이러스 발병 현황 조사를 실시하였다. RT-PCR 방법을 이용하여 진단 한 결과 2014년과 2015년 발병포장 내 이병면적율은 5% 미만에서 90% 이상까지 지역에 따라 다양하게 확인되었다. 2014년 조사 결과 전북지역의 부안과 김제에서 90% 이상으로 가장 높은 이병면적율을 보였고, 전남 지역의 보성, 강진, 해남, 장흥 지역은 30%의 이병면적율을 보였다. 2014년 조사결과 전남북 및 경남북 모든 지역에서 BaYMV가 확인되었고, 전남의 일부 지역에서는 BaYMV가 우점하면서 BaMMV와 복함 감염되어 피해를 주고 있는 양상을 보였다. 2015년의 전체적인 발생상황은 군산지역에서 70%로 높은 이병면적율을 보임과 동시에 전북의 다양한 지역에서 BaYMV 감염이 확인되었다. 또한 전남 지역 중 영광지역이 BaYMV와 BaMMV의 복합 감염으로 나타났다. SBWMV 감염이 확인된 고성지역을 제외하고 조사기간 동안 경남북의 모든 조사 지역에서 BaYMV 단독 감염으로 확인되었다. 본 실험 결과 지역별 기온차이에 의해 복합감염 형태의 발병양상의 차이가 나타났으며, 지구 온난화에 의한 기온상승을 대비하여 관련 연구가 더 필요할 것으로 사료된다.
Waterborne infectious disease is induced by several pathogenic microbes such as bacteria, viruses and protozoans, and the cases caused by viral infection is currently increasing. Water treatment process could reduce the number of virus in the water, but there were many difficulties to completely remove the virus particles from water. Therefore, the membrane separation technology which was reported to effectively remove pollutants from raw water has attracted increasing attention and demand. Since its efficiency has been introduced, demands for evaluation method toward the membrane filtration process are increasing. However, progression of the method development is slow due to the difficulties in cultivation of several waterborne viruses from animal models or cell culture system. To overcome the difficulties, we used adenovirus, one of the commonly isolated pathogenic waterborne viruses which can grow in cell culture system in vitro. The adenovirus used in this study was identified as human adenovirus C strain. The adenovirus was spiked in the raw water and passed through the microfiltration membrane produced by Econity, a Korean membrane company, and then the viral removal rate was evaluated by real-time PCR. In the results, the amount of virus in the filtered water was decreased approximately by 5 log scale. Because coagulant treatment has been known to reduce filtering function of the membrane by inducing fouling, we also investigated whether there was any interference of coagulant. In the results, we confirmed that coagulant treatment did not show significant interference on microfiltration membrane. In this study, we found that waterborne virus can be effectively removed by membrane filtration system. In particular, here we also suggest that real-time PCR method can rapidly, sensitively and quantitatively evaluate the removal rate of virus. These results may provide a standard method to qualifying membrane filtration processes.
Zhong-Tian Xu;Hai-Tao Weng;Jian-Ping Chen;Chuan-Xi Zhang;Jun-Min Li;Yi-Yuan Li
The Plant Pathology Journal
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제40권1호
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pp.73-82
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2024
Gardenia (Gardenia jasminoides) is a popular and economically vital plant known for its ornamental and medicinal properties. Despite its widespread cultivation, there has been no documentation of plant viruses on gardenia yet. In the present study, gardenia leaves exhibiting symptoms of plant viral diseases were sampled and sequenced by both metatranscriptome and small RNA sequencing. As a consequence, bean common mosaic virus (BCMV) was identified in gardenia for the first time and named BCMV-gardenia. The full genome sequence of BCMV-gardenia is 10,054 nucleotides (nt) in length (excluding the poly (A) at the 3' termini), encoding a large polyprotein of 3,222 amino acids. Sequence analysis showed that the N-termini of the polyprotein encoded by BCMV-gardenia is less conserved when compared to other BCMV isolates, whereas the C-termini is the most conserved. Maximum likelihood phylogenetic analysis showed that BCMVgardenia was clustered closely with other BCMV isolates identified outside the leguminous plants. Our results indicated that the majority of BCMV-gardenia virus-derived small interfering RNAs (vsiRNAs) were 21 nt and 22 nt, with 21 nt being more abundant. The first nucleotide at the 5' termini of vsiRNAs derived from BCMV-gardenia preferred U and A. The ratio of vsiRNAs derived from sense (51.1%) and antisense (48.9%) strands is approaching, and the distribution of vsiRNAs along the viral genome is generally even, with some hot spots forming in local regions. Our findings could provide new insights into the diversity, evolution, and host expansion of BCMV and contribute to the prevention and treatment of this virus.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제7권1호
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pp.1-4
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2003
Sericulture is a traditional agro-industry, which involves mulberry cultivation and silkworm rearing, has made great contributes to the human civilization. With the development of national economy and modem technology, mulberry and silkworm are being used to develop products with functionality besides the traditional cocoon production in China. In this paper, we brief the current developing situation of sericultural byproducts with functionality in the following aspects. (1) Functional products from silkworm larvae: silkworm powder, white muscardine silkworm, isolation and purification of anti-bacterial proteins from the larvae and production of medically valuable substances by Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus (BmNPV) vector. (2) Utilization of silkworm feces: for pillow and for isolation of chlorophyll etc. (3) Production of valuable Chinese traditional medicine like Cordyceps sinensis with pupae, functional utilization of pupa protein and chitin. (4) Silk as additives to cosmetics, silk food and medical materials. (5) Functional utilization of mulberry: cultivation of edible fungus on mulberry shoots as medium, mulberry fruit drinks, mulberry tea, etc. The prospect of sericultural byproduct industry in China is also discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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