CJ-50005 is an inactivated whole virus vaccine derived from hepatitis A virus (HM175) grown in human MRC-5 diploid fibroblasts cell culture. In order to evaluate the mutagenic potential of CJ-50005, : 3 sets of mutagenicity tests were performed. In the reverse mutation test wing Salmonella typhimurium TA1535, TA1 537, TA98, TA100 and TA102, CJ-50005 did not increase the number of revertants at any concentration tested in this study (2.8, 1.4, 0.7, 0.35 and 0.175 $\mu\textrm{g}$/plate). CJ-50005, at concentration of 2.8, 1.4 and 0.7 $\mu\textrm{g}$/ml, did not increase the number of cells having structural or numerical chromosome aberration in cytogenic test using Chinese Hamster Lung cells. In mouse micronucleus test, no significant increase in the occurrence of micronucleated polychromatic erythrocytes was observed in ICR male and female mice intraperitoneally administered with CJ-50005 at the doses of 25, 12.5 and 6.25 $\mu\textrm{g}$/kg. These results indicate that CJ-50005 has no mutagenic potential in these in vitro and in vivo system.
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified hemagglutinin of swine influenza virus (H1N1) as antigen was developed for detection of antibody to avian influenza virus (AIV). The sensitivity and specificity of a developed and commercial available ELISA kits were compared with those of agar gel precipitation (AGP) test and hemagglutination inhibition (HI) test using sera collected from chickens under condition of field exposure. The concentration of antigen, serum dilution and concentration of enzyme-conjugated secondary antibody in developed ELISA (S-ELISA) were 0.5ug/100ul, 1:200 and 0.03ug/100ul, respectively. The correlation coefficients between S-ELISA and commercial ELISA and HI titers were 0.419 and 0.533, respectively. A significant correlation (p < 0.01) was not found between HI and ELISA titers. The S-ELISA was found to be as more sensitive and specific than the AGP test, showing 86.8% sensitivity and 85.3% specificity. It is suggested that the ELISA using the SIV as antigen may be useful method as an investigating tool for AIV serological surveillance.
Objectives: The purpose of this study is to verify whether droplet-induced propagation, the main route of infectious diseases such as COVID-19, can occur in semiconductor FAB (Fabrication), based on research results on general droplet propagation. Methods: Through data surveys droplet propagation was modeled through simulation and experimental case analysis according to general (without mask) and mask-wearing conditions, and the risk of droplet propagation was inferred by reflecting semiconductor FAB operation conditions (air current, air conditioning system, humidity, filter conditions). Results: Based on the results investigated to predict the possibility of spreading infectious diseases in semiconductor FAB, the total amount of droplet propagation (concentration), propagation distance, and virus life in FAB were inferred by reflecting the management parameter of semiconductor FAB. Conclusions: The total amount(concentration) of droplet propagation in the semiconductor fab is most affected by the presence or absence of wearing a mask and the line air dilution rate has some influence. when worn it spreads within 0.35~1m, and since the humidity is constant the virus can survive in the air for up to 3 hours. as a result the semiconductor fab is judged to be and effective space to block virus propagation due to the special environmental condition of a clean room.
Kim, Hyun-Ran;Lee, Sin-Ho;Kim, Jae-Hyun;Yoon, Gum-Ook;Kim, Jeong-Soo
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.138.2-139
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2003
Grapevine leafroll-associated 1 virus (GLRaV-1) and Grapevine leafroll-associated 3 virus (GLRaV-3), member of the genus Ampelovirus, are important viral disease of grapevine in the world. these viruses transmitted only dicotyledonous host by vectors such as mealybugs and there is no suitable herbaceous host for virus. The diseased leaves turn yellowish or reddish depending on cultivars and viruses. Viruses are existed at low concentration and ununiformly distribution in grapevine. Using small-scale double-stranded RNA (dsRNA) extraction method, reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) product of 1Kb long which encoded of coat protein (CP) gene for both viruses was successfully amplified with a specific primers. The RT-PCR product was cloned into the plasmid vector and its nucleotide sequences were determined from selected recombinant cDNA clones. Sequence analysis revealed that the CP of GLRaV-1 consisted of 969 nucleotide, which encoded 323 amino acid residues and CP of GLRaV-3 consisted of 942 nucleotide, which encoded 314 amino acid residues. The CP of GLRaV-1 and GLRaV-3 has 93.8% and 98.7% amino acid sequence identities, respectively.
For rapid and sensitive measurement of antiviral activities, application of a recombinant virus containing firefly luciferase gene was attempted. Recombinant human cytomegalovirus (HCMV) containing luciferase gene driven by HCMV late gene pp28 promoter (HCMV/pp28-luc) was used to test the antiviral activities of three known compounds and the result was compared with results from the conventional plaque assay for measuring the production of infectious viruses. When human fibroblast cells were infected with HCMV/pp28-luc, luciferase activity was observed at 2 days after infection and reached maximum at 6 days after infection, whereas the production of infectious virus was maximal at 4 days after infection. The antiviral activities of ganciclovir, acyclovir, and papaverine were measured in HFF cells infected with HCMV/PP28-luc and the luciferase activity was compared with the infectious virus titers. Luciferase activity decreased as the concentration of ganciclovir or papaverine increased, while there was a slight decrease in luciferase activity with acyclovir. The level of the decrease in Luciferase activity was comparable to the level of decrease in the production of infectious virus. Therefore, the antiviral assay using recombinant virus HCMV/pp28-luc resulted in sensitivity similar to the conventional plaque assay with a significant reduction in assay time.
Epstein-Barr virus (EBV), cytomegalovirus (CMV), hepatitis B virus (HBV), parvovirus B19 (B19)등 4종의 바이러스는 인체에 감염을 일으키는 병원체로서 DNA를 유전물질로 함유한다. 각 바이러스 유전자의 염기서열을 분석하여 EBV CMV, HBV의 pol 유전자와 B19의 ns 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 primer를 설계 제작하고 단일 시험으로 4종의 바이러스를 동시에 검출할 수 있는 다중 중합효소 연쇄반응(Multiplex PCR)법을 확립하였다. Primer 염기서열, PCR 반응조성물의 농도, PCR 반응시간 및 온도조건을 최적화하여 민감도를 증대시킴으로써, 단일 시험으로 5-10 분자수의 유전물질까지 검출이 가능하였다. 또한 4종의 바이러스 사이에 교차반응이 일어나지 않았으며 생체시료를 이용한 시험에서도 특이성과 민감도가 유지됨을 확인하였다. 그러므로 본 연구에서 확립한 다중 중합효소 연쇄반응은 세포배양액 또는 생체 시료에 감염된 4종 DNA 바이러스진단에 효율적으로 이용할 수 있을 것이라고 판단된다.
Kim, Teoan;Lee, Young Man;Lee, Hoon Taek;Heo, Young Tae;Yom, Heng-Cherl;Kwon, Mo Sun;Koo, Bon Chul;Whang, Key;Roh, Kwang Soo
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제14권2호
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pp.163-169
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2001
Despite the high potency of the retrovirus vector system in gene transfer, one of the main drawbacks of has been difficulty in preparing highly concentrated virus stock. Numerous efforts to boost the virus titer have ended in unsatisfactory results mainly due to fragile property of retrovirus envelope protein. In this study, to overcome this problem, we constructed our own retrovirus vector system producing vector viruses encapsulated with VSV-G (vesicular stomatitis virus G glycoprotein). Concentration process of the virus stock by ultracentrifuge did not sacrifice the virus infectivity, resulting in more than 108 to 109 CFU (colony forming unit) per ml on most of the target cell lines tested. Application of this high-titer retrovirus vector system was tested on chicken embryos. Injection of virus stock beneath the blastoderms of pre-incubated fertilized eggs resulted in chick embryos expressing E. coli LacZ gene with 100% efficiency. Therefore, our results suggest that it is possible to transfer the foreign gene into chicken embryo using our high-titer retrovirus vector.
바이오 의약품 생산과정의 대부분 공정에서 분리막이 사용되고 있다. 분리막 공정은 다른 공정의 전처리, 공정 자체의 불순물 분리, 바이러스 제거, 목표 생성물 농도 조절 및 완충 용액 교환 등에 사용된다. 인체에 사용하는 바이오 의약품의 바이러스 오염은 심각한 임상 결과와 직결되는 민감한 문제이기 때문에 바이러스 필터는 제품의 효능과 안정성을 보장하기 위해 중요한 역할을 한다. 바이러스 필터는 일반적으로 표면 개질된 PVDF, PES, CRC 등 다양한 고분자로 만들어진 복합다층 구조를 가지고 있다. 제조업체에 따라 대칭(symmetric) 또는 비대칭(asymmetric) 등 다른 기공 구조와 형태를 가지고 있으며, 주름막, 평판 시트 또는 중공사 형태로 사용된다. 바이러스 필터는 Asahi Kasei 를 비롯해 Millipore, Pall, Sartorius 등 몇몇 해외 업체들이 독점적으로 국내에 공급하고 있다. 바이러스 필터를 대체하려면 검증작업을 통해 규제기관의 승인을 받는 등 상당한 시간과 비용이 소요된다. 최근 일본의 수출규제로 국산화가 중요해진 만큼 제거 성능 고도화 등 선제적으로 기술자립도를 높여가야 한다.
We aimed to investigate the antiviral activity of Zanthoxylum species against influenza virus A/WS/33, A/PR/8 and B/Lee/40 used by sulforhodamine B (SRB) assay and the action of leaves extracts of Zanthoxylum piperitum on life cycle of influenza virus A/WS/33. Among the twelve extracts, only the leaf extract of Z. piperitum exhibited strong antiviral activity at low concentration of less than 10${\mu}g/m{\ell}$ with no citotoxicity (50${\mu}g/m{\ell}$) against all of three viruses. In addition, only oseltamivir showed antiviral activity with $IC_{50}$ of 65.3${\mu}g/m{\ell}$ against influenza A/WS/33 among the viruses. Furthermore, the leaf extract of Z. piperitum suppressed infection of influenza virus A/WS/33, when added just prior (-1 hr) or after virus inoculation (0 hr). Leaf extract of Z. piperitum directly affect the infectivity of influenza virus A/WS/33 particles. Therefore, Leaf extract of Z. piperitum exhibited higher antiviral activity against three influenza viruses than that of the oseltamivir, which directly interacts with influenza A/WS/33 particles, affecting the initial stages of infection such as receptor binding and virus entry.
The susceptibility of five different marine fish to iridovirus IVS-1 infection was analyzed and found a higher the cumulative mortality in the order of rock bream (Oplegnathus fasciatus), red sea bream (Pagrus major), sea perch (Lateolabrax sp.), rockfish (Sebastes schlegeli) and black porgy (Acanthopagrus schlegeli). However, the concentrations of virus in the infected spleens of these species did not differ significantly. To determine the release of iridovirus from infected fish into culturing seawater, rock bream were challenged with iridovirus IVS-1 and the concentration of virus in the water was analyzed using PCR. Over the 10 days of the analysis, the linear relationship between the number of dead fish and viral DNA concentration found in culturing seawater should be considered direct evidence of horizontal iridovirus transmission.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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