• 식물조직배양학회지
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• 제27권3호
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• pp.181-184
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• 2000

Friable callus와 compact callus를 배양 단계별로 단백질을 정량한 결과 friable callus가 가장 낮았고 배양 0주째부터 단백질 함량이 서서히 증가하여 배양 3주째 최대함량이 되었으며, 4주째부터는 감소하기 시작했다. 전기영동법으로 단백질의 패턴을 조사한 결과 compact callus와 friable callus간에 특징적인 차이를 보이는 단백질 밴드가 관찰되었다. Friable callus는 약 28 KD, 31 KD과 35 KD에서 특이적으로 나타났으며. compact callus에서는 30 KD부근의 밴드에서 많은 변화가 일어났다. 전체 단백질의 구성 아미노산은 배앙 2∼3주에 가장 높은 함량을 보였고, friable callus에서 그 함량이 가장 낮았다.

• 식물조직배양학회지
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• 제27권3호
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• pp.155-161
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• 2000

야생 흰 제비꽃 (viola patrinii DC.)의 callus로부터 분열 활성이 높고 균일한 세포주의 생산성 향상을 위한 현탁배양 방법이 세포의 생장에 미치는 영향에 관하여 조사한 결과는 다음과 같다. Compact callus의 세포생장을 위해서 배지의 종류를 MS, B5, R2, White배지로 나누어서 실험한 결과 MS배지와 R2 배지의 callus 생육이 양호하였으며, White배지를 사용시에는 횐 callus에 붉은 색소 (시코닌계 색소)가 생산되었다. 무기염의 농도에서는 생체중은 MS 기본배지에서 건물중은 1/2 NH$_4$NO$_3$, 1/2 KNO$_3$가 가장 좋았다. 배지중의 NH$_{4}$$^{+}$ 와 HO$_{3}$$^{-}$ 농도비를 100:0, 75:25, 50:50, 25:75, 0:100로 한 결과 25:75의 비에서 생육이 가장 양호하였으며, NH$_{4}$$^{+}$ 의 농도가 낮아질수록 세포에 붉은 색소가 생성되는 경향을 보였다. Casein Hydrolysate (CH)의 농도가 세포의 생장에 미치는 영향은 5 g/L 첨가시 생체중, 건물중 모두 높았다. 조직학적 관찰에 있어서는 2~4주간 된 callus는 대부분의 세포의 크기가 작고 세포질이 농후한 상태로 비교적 균일한 세포로 구성되어 있고 액포화가 거의 이루어지지 않은 상태로 세포의 분열이 왕성하게 이루어지고 있음을 관찰할 수 있었고, 6주간 배양된 callus는 신장되고 액포화된 세포들이 많이 관찰되었다.

• 생명과학회지
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• 제6권2호
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• pp.94-103
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• 1996

To understand effect of inoculum size, cell density, sucrose concentration and concentrations of MS basal on suspension culture and protoplast isolation of wild viola(Viola patrinii DC.) callus from petiole segments this experiment was conducted. In the lot of 30 mesh inoculum size, two observations were; One was that a considerable increase in the fresh and dry weight of callus was determined. Another was that the callus mass was relatively compact compared with others. A recommendable cell density was 0.4g for 20ml culture medium and the higher sucrose concentration, the higher fresh and dry weight were obtained. The dilution of MS basal salt was differently affected on fresh and dry weight; the highest fresh weight was found in 1x MS salt, while the higest dry weight was in 1/3x dilution.The addition of casein hydrolysate(3g/L) was more effective to increase of both fresh and dry weight. THe contents of protein was great in the inoculum lots with larger inoculum sizeand higher concentration of MS basal salts contenting 3g/L of casein hydrolysate and higher sucrose compared with others. The greatest protoplasts were isolated from the lot of 10 mesh size treated with 1%pectinase SE-150 and 2% cellulase YC. In general, for optimal protoplast isolation the followingconditions were recommended; 1) Use of smaller cell size cultured for 2-5 weeks, and 2) more than 5 hours incubation using the combined mixture of the enzymes with proper concentrations.

• 식물조직배양학회지
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• 제27권3호
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• pp.233-238
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• 2000

야생 흰제비꽃의 엽병 유래 callus를 장기 계대배양하는 과정 중에 발생하는 순화된 friable callus와 분화능이 높은 compact callus를 비교 관찰한 바, friable callus는 연초록색으로 부서지기 쉬운 부드러운 callus이고, compact callus는 진녹색으로 단단한 callus였다. 동결처리 한 시료를 주사전자 현미경에서 동일하게 200배로 관찰하여 보면, friable callus 는 작은 세포집단으로 이루어진 세포군의 주변부에 고도로 액포화된 세포가 광범위하게 분포되어 있는 반면, compact callus는 거의 균일한 세포들로 구성되어 세포구성이 치밀한 것으로 관찰되었다. 또한 friable callus와 compact callus로 부터의 체세포배형성은 배양세포에서 배가 발생하여 배양기간이 지남에 따라 식물체로 분화하였다. 이와 같은 과정은 배양세포의 세포질이 보다 충만한 부위에서 배유사체 (embryo like body)의 발생이 이루어지는 것으로 관찰되었다.