Normalized resistance interpretation (NRI) analysis for tetracycline was applied to generate information on the epidemiological cut-off value for Vibrio ichthyoenteri isolated from diseased olive flounder (Paralichthys olivaceus) larvae. Thus, 42 strains of V. ichthyoenteri were used to determine minimum inhibitory concentration (MIC) values of tetracycline using Etest. Also, 11 tetracycline resistance related genes were investigated by PCR method. Most tetracycline-resistant strains harbored both tetB and tetM with a few exceptions. NRI-derived mean and 2 SD above the mean of theoretical normal distributions of susceptible isolates were 0.33 mg/L and 1.66 mg/L, respectively. The epidemiological cut-off value for V. ichthyoenteri from the calculations could be set to S ${\leq}$ 2 mg/L. Of the 42 strains, 15 were classified as non-wild type (NWT), and MIC values of the NWT strains vary regardless of tetB and tetM detection, suggesting that there may be other mechanisms involved in tetracycline resistance in this Vibrio species.
Vibrio parahaemolyticus species, which cause acute gastroenteritis in humans, were isolated from farmed fish and seawater and their antimicrobial-resistance pattern and factor were investigated. They exhibited the highest resistance to ampicillin (88.9%), followed by trimethoprim (51.9%) and rifampin (22.2%). The relatively high resistance to trimethoprim was unexpected because trimethoprim was not commonly used in fish farming in Korea. R plasmid related resistance was identified by the treatment of novobiocin (7 ug/mL) and it was named as pVPBW1. A putative trimethoprim resistance gene in 2.0 kb fragment of pVPBW1 was also confirmed.
Vibrio parahaemolyticus causes food poisoning, mainly via marine fisheries products. We investigated the virulence factors and drug resistance of V. parahaemolyticus isolated from fisheries products purchased from the Yeosu Fisheries Market. The isolates were identified using a variety of biochemical tests and the detection of toxR and hns gene. The presence of the virulence factor-encoding genes tdh and trh in the isolates was also investigated by PCR. The resistance of the isolates to 13 antibacterial agents was tested using the disc-diffusion method and carriage of β-lactamase genes and class 1 integrons by ampicillin-resistant isolates was investigated by PCR. Four of seventeen isolates identified as V. parahaemolyticus by biochemical tests produced a species-specific PCR band. Those isolates showed >98% 16S rRNA gene sequence homology with V. parahaemolyticus and only one isolate harbored the tdh gene. All of the V. parahaemolyticus isolates were resistant to ampicillin and amoxicillin; moreover, VPA0477, a class A β-lactamase gene, and class 1 integrons were detected. Therefore, V. parahaemolyticus from fisheries products represents a low risk to human health. Also, V. parahaemolyticus is likely to develop multidrug resistance because it has class 1 integrons.
To obtain antimicrobial compounds against fish pathogenic bacteria from natural products, 80% methanolic extracts from 14 species of medicinal plant were screened for antimicrobial activity against fish pathogenic bacteria, Edwardsiella tarda and Vibrio anguillarum. Among them, Glycyrrhiza glabra, Rhus vemiciflua and Sanguisorba officinalis were effective for growth inhibition of Gram-negative bacteria, both E. tarda YSF and V. anguillarum YSR. Through the activity-guided isolation for R. verniciflua extract that exhibited the highest antimicrobial activity among three extracts, one antimicrobial compound (1) was isolated and identified as methyl-3,4,5-trihydroxybenzoate, or methyl gallate. This compound significantly inhibited the growth of tested strains of both E. tarda and V. anguillarum exhibiting MIC of 1 mg/ml for each strain.
Kim, Won Sik;Hong, Seung Bok;Lee, Kyung;Lee, Jung Nam;Shin, Kyeong Seob
Korean Journal of Clinical Laboratory Science
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v.36
no.1
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pp.1-6
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2004
The enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC)-PCR is a recently described DNA fingerprinting technique based on amplification of repetitive element distributed in bacteria. We applied of ERIC-PCR to clinical isolates of Vibrio parahaemolyticus and other bacteria associated diarrhea. Twenty isolates of V. parahaemolyticus were used for intragenic genotyping, which were isolated from 2001 to 2002 in Chungbuk National University hospital. For interspecies genotyping, V. vulnificus, V. alginolyticus, V. parahaemolyticus, Escherichia coli, Salmonella and Shigella spp. were used. The genotyping were analyzed by ERIC-PCR. The genotyping of V. parahaemolyticus were grouped two major pattern (A, B) and were subdivided into 10 subtypes (A1, A2, B1-B8) by ERIC-PCR. These method distinctly differentiated bacterial species associated diarrhea. Those results show that ERIC-PCR can be reliable and efficient method for genotyping of V. parahaemolyticus and bacteria associated diarrhea.
Kim, Dong-Gyun;Ahn, Sun-Hee;Bae, Ju-Yoon;Kong, In-Soo
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.2
no.4
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pp.263-266
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2007
Vibrio vulnificusis a causative agent of serious diseases in humans resulting from the contact of wound with seawater or consumption of raw seafood. Several studies aimed at detecting V. vulnificus have targeted vvh as a representative virulence toxin gene belonging to the bacterium. In this study, we targeted the rpoS gene, a general stress regulator, to detect V. vulnificus. PCR specificity was identified by amplification of 8 V. vulnificus templates and by the loss of a PCR product with 36 non-V. vulnificus strains. The PCR assay had the 273-bp fragment and the sensitivity of 10 pg DNA from V. vulnificus. SYBR Green I-based real-time PCR assay targeting the rpoS gene showed a melting temperature of approximately $84^{\circ}C$ for V. vulnificus strains. The minimum level of detection by real-time PCR was 2 pg of purified genomic DNA, or $10^3$ V. vulnificus cells from pure cultured broth and $10^3$ cells in 1g of oyster tissue homogenates. These data indicate that real-time PCR is a sensitive, species-specific, and rapid method for detecting this bacterium using the rpoS gene in pure cultures and in infected oyster tissues.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.22
no.3
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pp.225-232
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1987
Authors studied on the isolation of V. damsela from sea water, fish and shellfish at the Keoje Hae keumkang on the southern sea and at Hongdo island and Heucksan island on the western sea of Korea from May to September in 1986. Authors investigated for the isolated strains to bacteriological identification, hemolysis about various erythrocytes and antibiotic susceptibilities. The results obtained were as follows: 1. V. damsela was isolated 14 strains from total 383 specimens; 233 cases of sea water, 40 cases of fish and 110 cases of shellfish, respectively. Eight strains were isolated from sea water and 6 strains were isolated from shellfish. 2. The biochemical characteristics which differentiate it from other Vibrio species were indole negative, ornithine negative, Voges-Proskauer positive, arginine positive, galactose positive, glucose positive, maltose positive, mannose positive, trehalose positive, and growth in nutrient broth with 1% to 6% NaCl. 3. On hemolysis reaction on blood agar media using human, rabbit and guinea pig erythrocytes, human erythrocytes were 11 strain positive, rabbit erythrocytes were 12 strain positive and guinea pig erythrocytes were 13 strain positive. 4. Senistivity test using with chemotherapeutic agents of "BioLab" Microbial Sensitivity Test Discs were generally sensitived to amikacin, ampicillin, cephalothin, chloramphenicol, clindamycin, erythromycin, gentamycin, kanamycin, methicillin, penicillin, streptomycin, tetracycline and tobramycin, respectively, but were resistant to lincomycin.
Vibrio species are Gram-negative basophils that are ubiquitous in seawater, increasing in number as the water temperature increases. Humans are usually infected by the consumption of contaminated seawater or seafood. V. alginolyticus infection in humans is mainly associated with infections of the skin and ears, such as acute otitis media and cellulitis. In this study, the distribution of V. alginolyticus along the coast of Jeju Island, and its relationship with water temperature, salinity, DO, and pH was investigated. The antibiotic susceptibility of the bacteria isolated was also tested. In seawater, the Daejeong area had the highest detection rate, with 13 cases (21.7%), and the Hallim area showed the lowest detection rate, with eight cases (13.3%) in. In shellfish, the Daejeong area had the highest rate, with seven cases (23.3%), and the Seongsan and Hallim areas had the lowest detection rate, with four cases (13.3%). The overall detection rate was the highest in Daejeong area, with 20 cases (22.2%), and the lowest in the Hallim area, with 12 cases (13.3%). The detection rate was highest when the water temperature was highest.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.3
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pp.345-353
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1986
Authors studies on the isolation of non-sucrose fermentation Vibrio species such as V. parahaemolyticus, V. vulnificus and V. damsela from sea water, shellfishes and various algae at Ulleung island in the east of Korea on summer in 1985. Authors carried out test for isolated strains to biochemical characteristics, halophilism, hemolysis and serological reaction. The results obtained were as follows: 1. Strains isolated from total specimens were 25 strains of V. parahaemolyticus, 2 strains of V. vulnificus and 1 strain of V. damsela, respectively. 2. Isolated frequency of Vibrio species from sea water and marine products was lower than on specimens in the southern sea of Korea from 1980 to 1985. 3. On hemolysis reaction on blood agar media using human and rabbit erythrocytes, 14 strains among 25 strains of V. parahaemolyticus isolated were positive, and V. vulnificus and V. damsela were positive, respectively. 4. The distributions of serotypes of V. parahaemolyticus isolated were from O1 group to O10 group, and from K 10 to K 69. The results of K serotypes were as follows ; serotype K 10 and K 33 were 2 strains, serotype K 59 and K 69 were 1 strain, respectively. And 2 strains of V. vulnificus isolated were not agglutinated by antiserum of V. vulnificus. Therefore, the probability is that 2 strains of V. vulnificus isolated were other serotypes distributed on sea weater and marine products of Ulleung island of Korea.
Park, Gyung-Soo;Lee, Seung-Min;Han, Tae-Jun;Lee, Jung-Suk
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.13
no.2
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pp.106-111
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2008
Six standard methods for marine ecotoxicological tests were established(or applicated) using marine decomposer, primary producers and consumers. Development processes referred to the standard methods established by USEPA(United States Environmental Protection Agency), international organizations and European methods. However, the standard test species were selected among the domestic species generally found in the Korean waters and sediments. The test methods provide the culture/maintenance of test species, test methods, reproducibility and quality acceptance criteria etc. A total of nine test species were designated including bioluminescent bacteria(Vibrio fischeri), diatom(Skeletonema costatum), seaweed(Ulva pertusa), rotifer(Brachionus plicatilis), benthic copepod(Tigriopus japonicus), benthic amphipods(Mandibulophoxus mai, Monocorophium acherusicum), and fishes(Oryzias latipes, Paralichthys olivaceus). These test species represent the decomposer, primary producer and consumers in marine trophic system in Korean coastal ecosystems, and we recommend the "battery test" including at least one species from the each trophic level for marine ecotoxicological test.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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