Dynamin-related protein 2A (AtDRP2A, formally ADL6), a member of the dynamin family, is critical for protein trafficking from the TGN to the central vacuole. However, the mechanism controlling its activity is not well understood in plant cells. We isolated Arabidopsis sec13 homolog1 (AtSeh1) that interacts with AtDRP2A by a yeast two-hybrid screening. AtSeh1 has four WD40 motifs and amino acid sequence homology to Sec13, a component of COPII vesicles. Coimmunoprecipitation and protein pull-down experiments demonstrated specific interaction between AtSeh1 and AtDRP2A. AtSeh1 bound to the pleckstrin homology domain of AtDRP2A in competition with the C-terminal domain of the latter, and this resulted in inhibition of the interaction between AtDRP2A and PtdIns3P in vitro. AtSeh1 localized to multiple locations: the nucleus, the prevacuolar compartment and the Golgi complex. Based on these results we propose that AtSeh1 plays a role in regulating cycling of AtDRP2A between membrane-bound and soluble forms.
This study was carried out with two types of silkworm, Bombyx mori, adults having different life span: long life span (adult living for more than fifteen days; LLS), and short life span (adult living less for than five days; SLS). The fine structures of fat body cells in the young and the senescent males and females were compared in an attempt to elucidate the aging physiology of the silkworm adult. In SLS, there were many rough endoplasmic reticula (RER) and glycogen granules in the female cytoplasm, whereas the smooth endoplasmic reticula (SER) were observed in the male cytoplasm. Also in SLS, the mitochondria were swollen and had many poor osmiophillic inclusions (fatty degeneration) at three days after emergence. In LLS, compared to SLS, comparatively normal mitochondria and nuclear membrane were observed in even five day old female. In fifteen day old LLS female, however most of cell membranes were disappeared and mitochondria were abnormally expanded. Many fat granules were observed in the cytoplasm of ten day old male (LLS) which died with full autophagic vacuole (AV) collapsed at fifteen days. Therefore, it is suggested that SLS type is recommended for the study of aging tissue, because it is easier to monitor the changes in tissue structure.
In order to clarify the relationship between the activity and age of vacular cambium in the rhizome of Botrychium ternatum, the cambia of the 6th and 10th internodes from its shoot apex were compared ultrastructurally and histochemically. The cambium in the 6th internode had two to four radially arranged cells in each row, and the cells are radially flattened and had thiner tangential walls than radial. The cambial cells were ultrastructurally characterlized by the presence of a large vacuole, few storage materials such as starch grains and lipid droplets, and various cell organelles such as mitochondria, endoplasmic reticulums and dictyosomes in cytoplasm. On the other hand, the cells of cambium in the 10th internode showed irregular arangement and somewhat enlargement in radial plane. The cells were filled with numerous storage materials and small vacuoles and had few cell organelles except for mitochondria. In addition, the activity of acid phosphatase appeared in the cambium of the 6th internode but of the 10th. From the above results, it is clear that the vascular cambium of the 6th internode was active and that of the 10th was dormant. Thus we reached a conclusion that the rhizome of '||'&'||'trychium ternatum has determinate cambium.
1 . Experimental study Preventive effect of Korea Red Ginseng (KPG) on hypertensive retinal arteriolosis in rabbits was studied. The results as follows: Blood pressure: Hypertensive group (B) was obviously raised up in comparing with that in normal group(A) and in hypertension + KRG group(C). Ocular fundus:Changes in B group including the retinal arteriospasm, crossing arterioveous, exudation and edema. But C group showed lightly. Light microscope: HE stained vascular damage in retina including thickness hyalimisation, execdates and edema Electron microscope: The endothelial cells were arranged irregularly, different shape and showed cytoplasm loose and vacuole. Immunohistochemistry: Ginseng can regulating endothelin-1, angiotension-ll, endothelium grow factor expre,j,iion and secreation in retinal blood clrultion. 2. ClinicAl Study 66 of hypertensive patients (42 men, 23 women,48-68 years old)and 20 normal person (7 men, 13 women,47-68 years old) were administrated(p.0.) by HRG (3g per day for 6 weeks). The results showed that marked effective rate and total effective rate were 53cyo and 60.6alo respectively and no severe side effects were found. The above results suggest that Ginseng have a difinite hypotensive effect and a role of preventing hyperfine sloe arteriosclerosis.
In order to evaluate the protective effect of Kamicheungkantang(KCKT) on hepatic damage induced by $CCl_4$, the study was done. The blood chemistry and histological study were done following oral administration with materials. The results were obtained as follows. 1. KCKT extracts didn't show cytotoxicity against BALB/C mouse lung fibroblast cell. 2. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum alanine aminotransferase(ALT) was significantly decreased in KCKT treated group as compared with control group. 3. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum aspartate aminotransferase (AST) was significantly decreased in KCKT treated group as compared with control group. 4. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum alkaline phosphatase(ALP) was significantly decreased in KCKT treated group as compared with control group. 5. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum lactate dehydrogenase(LDH> was insignificantly decreased in KCKT but insignificantly as compared with control group. 6. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum cholestorol was significantly decreased in KCKT treated group as compared with control group. 7. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum triglyceride was insignificantly decreased in KCKT treated groups as compared with data of control. 8. In the hepatotoxicity with $CCl_4$, serum total bilirubin, direct bilirubin, ${\gamma}$-GTP were not changed in KCKT treated groups as compared with data of control. 9. In histopathological changes, fatty changes, vacuole, nucleotic changes and fibrosis were observed in control group and degree of changes was increased over time. Whereas no differences were observed in KCKT treated group These results suggested that KCKT extracts might be usefully applied for treatment of hapatic disease and also it was necessary to do more studies about its mechanisms.
Integumentary structures of the rockfish, Sebastiscus tertius were examined by means of the light and transmission electron microscopy. Stratified epidermal layer consists of supporting cells, unicellular glands, granular cells and mitochondria-rich cells. The epidermal layer could be classified into superficial, intermediate and basal layer by morphology and structure of the supporting cells. Mucous cells of unicellular gland were observed in the superficial and intermediate layer of the epidermis. The mucous materials were identified as acidic and carboxylated mucosubstance by histochemical methods. Club cell has well-developed central vacuole, rough endoplasmic reticula and Golgi complex in the cytoplasm. Granular cells were observed in the superficial layer and contained numerous granules of high electron density. Mitochondria-rich cells are characterized by well-developed microfilaments in cortex and numerous tubular mitochondria in medullar cytoplasm. Three types of pigment cells in the dermal layer could be distinguished with electron density of cytoplasmic inclusions.
Antibodies raised against the purified p-subunit of $\beta$-conglycinin were used in immunohistochemical studies to monitor the pattern of $\beta$-conglycinin mobilization in the cotyledons during soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed germination. Western blot analysis revealed that the break down of the $\beta$-subunit of $\beta$-conglycinin commenced as early as 2 days after seed imbibition (DAI). Concurrent with the degradation of the $\beta$-subunit of $\beta$-conglycinin, accumulation of 48, 28, and 26 kD proteolytic intermediates was observed from 2 to 6 DAI. Western blot analysis also revealed that the acidic subunit of glycinin was mobilized earlier than the basic subunit. The basic glycinin subunit was subjected to proteolysis within 2 DAI resulting in the appearance of an intermediate product approximately 2 kD smaller than the native basic glycinin subunit. In contrast to the major seed storage proteins, lipoxygenase was subjected to limited proteolysis and was detected even after 8 DAI. The first sign of $\beta$-conglycinin breakdown was observed near the vascular strands and proceeded from the vascular strands towards the epidermis. Protein A-gold localization studies using thin sections of soybean cotyledons and antibodies raised against the $\beta$-subunit of $\beta$-conglycinin revealed intense labeling over protein bodies. A pronounced decrease in the protein A-gold labeling intensity over protein bodies was observed at later stages of seed germination. The protein bodies, which were converted into a large central vacuole by 8 DAI, contained very little 7S protein as evidenced by sparse protein A-gold labeling in the vacuoles.
The location of actin and myosin of the several stages of Cwptosporinium parvum was observed. The tissue antigen of C. pcruum was prepared through immunosuppression of IgG mice with Depomedrol . The thin sectioned specimens, which were incubated with the IgG fraction of the rabbit polyclonal antibodies raised against chicken back muscle actin and bovine uterus myosin, were treated with 10 nm gold-conjugated goat anti-rabbit IgG, Electrodense particles were located mainly on the pellicles of all observed developmental stages of the parasites. The number of actin gold particles in the cytoplasm increased when the parasite was dividing actively as in case of meronts. Especially in macrogametocytes, a lot of actin and myosin particles were synthesized and storaged as amilopectin-like bodies. There were many actin gold particles along the microspikes of cytoplasmic membranes in various developmental stages. The actin and myosin observed in this study may play important roles to control the shape of the parasites and movement of cytoplasmic membranes as cvtoskeletal proteins.
The Journal of the Convergence on Culture Technology
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v.5
no.3
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pp.327-332
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2019
Today's scientists try to remove heavy metals with many new technologies such as phytoremediation. One of the best cutting edge technologies is developing transgenic plants to remove certain heavy metal in soil. I constructed the transformation vector expressing T. goesingense Metal Transport Protein1 gene and TgMTP1: GFP genes. The transgenic plants were selected and confirmed the transformed genes into Arabidopsis thaliana genome. Expression was confirmed in several parts in Arabidopsis cells, tissues and organs. When TgMTP1 overexpressing Arabidopsis thaliana were subjected, transgenic plants showed higher heavy metal tolerance than non-transgenic. For further study I selected the transgenic plant lines with enhanced tolerance against four different heavy metals; Zn, Ni, Co, Cd. The accumulation of these metals in these plants was further analyzed. The TgMTP1 overexpressing Arabidopsis thaliana plant of selected lines are resistant against heavy metals. This plant is characterized by the expression of the MTP1 gene accumulating heavy metal in the vacuole and being simultaneously expressed on the plasma membrane. In conclusion, these plants may be used in plant purification applications, and as a plant with increased tolerance.
To establish an infection, fungal pathogens must recognize diverse signals from host surfaces. The rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, is one of the best models studying host-pathogen interactions. This fungus recognizes physical or chemical signals from the host surfaces and initiates the development of an infection structure called appressorium. Here, we found that protein MoAfo1(appressorium formation, MGG_10422) was involved in sensing signal molecules such as cutin monomers and long chain primary alcohols required for appressorium formation. The knockout mutant (ΔMoafo1) formed a few abnormal appressoria on the onion and rice sheath surfaces. However, it produced normal appressoria on the surface of rice leaves. MoAfo1 localized to the membranes of the cytoplasm and vacuole-like organelles in conidia and appressoria. Additionally, the ΔMoafo1 mutant showed defects in appressorium morphology, appressorium penetration, invasive growth, and pathogenicity. These multiple defects might be partially due to failure to respond properly to oxidative stress. These findings broaden our understanding of the fungal mechanisms at play in the recognition of the host surface during rice blast infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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